Консорциум штаммов бактерий Lactobacillus plantarum БИМ В-404 Д, Lactobacillus plantarum БИМ В-405 Д, Lactobacillus paraplantarum БИМ В-551 Д, Lactobacillus casei БИМ В-552 Д, используемый для силосования растительного сырья

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ КОНСОРЦИУМ ШТАММОВ БАКТЕРИЙБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ СИЛОСОВАНИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Найденко Инна Александровна Денисенко Вера Витальевна Царева Екатерина Александровна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси(56)2265655 С 2, 2005.а 20050709, 2007.2155496 С 2, 2000. ВАСИЛЕНКО С.Л. и др. Актуальные вопросы переработки мясного и молочного сырья Сб. научных трудов,2009. - Минск, 2010. - С. 39-47. ЗИНОВЕНКО А.Л. и др. Инновационные технологии в животноводстве. Тезисы докладов Международной научнопрактической конференции.Ч.1. - Жодино, 2010. - С. 236-238. ПЕТРУШЕНЯ Н.И. и др. Материалы конференции Современные технологии сельскохозяйственного производства.Международная научно-практическая конференция. - Гродно, 2009. С. 487. БУРЯКО И.А. Выделение и изучение бактерий рода , перспективных для силосования кормов Автореф. дис. - Минск, 1991. - С. 19-20. ПЕТРУШЕНЯ Н.И. и др. Современные технологии и комплексы технических средств в сельскохозяйственном производстве. Материалы международной научно-практической конференции. Минск, 2005. - С. 22-23.(57) Консорциум штаммов бактерийБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д, используемый для силосования растительного сырья. Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, биотехнологии, касается консорциума штаммов молочнокислых бактерий и может быть использовано в кормопроизводстве для повышения качества силосованных кормов. Использование биологических препаратов на основе живых культур кислотообразующих бактерий является наиболее распространенным, дешевым и безопасным способом приготовления силосованных кормов. Эффективность биологических препаратов для силосования растительного сырья определяется свойствами бактериальных штаммов, входящих в их состав. Известны биологические препараты для силосования кормов, в состав которых входит один штамм бактерий 1-6. Недостатком таких препаратов является их невысокая эффективность. 17637 1 2013.10.30 Известен препарат для силосования на основе семи штаммов молочнокислых бактерий 7. Препарат используется для улучшения качества силосованных кормов, повышения аэробной стабильности силоса. Однако отсутствуют сведения о практически значимых свойствах консорциума, информация о взаимном влиянии штаммов при производстве и использовании препарата. Наиболее близким по технической сущности к изобретению является ассоциация из восьми штаммов молочнокислых и пропионовокислых бактерий 8, используемая для силосования (прототип). Недостатком прототипа является отсутствие широких диапазонови температур роста, не приведены данные о взаимном влиянии штаммов в составе закваски, о спектре антифунгальной активности, способности ассоциации к утилизации углеводов. Задачей данного изобретения является расширение ассортимента биологических средств для силосования растительных кормов и получение консорциума, содержащего штаммы молочнокислых бактерий, обладающие комплексом практически значимых свойств, что обеспечивает активное размножение бактерий консорциума в силосной массе, в том числе при изменении внешних условий ( и температуры), способствует ингибированию роста микроорганизмов, вызывающих аэробную порчу силоса. Задача решается путем использования консорциума штаммов молочнокислых бактерийБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д для силосования растительного сырья. Консорциум отличается от известных тем, что в его состав входят специально подобранные, не подавляющие друг друга штаммы, которые характеризуются комплексом взаимодополняющих свойств, обеспечивающих способность консорциума утилизировать широкий спектр углеводов, расти в широком диапазоне температур ии подавлять рост плесневых грибов - возбудителей аэробной порчи силоса. Соотношение штаммов в консорциуме составляет 1111, допускается изменение соотношения штаммов таким образом, чтобы доля, приходящаяся на один из штаммов, была не менее 1/5. Консорциум является неделимым. Консорциум штаммов стабилен и сохраняет жизнеспособность и свои свойства при длительном хранении (более 3-х месяцев). Метаболизм консорциума бродильного типа. При сбраживании глюкозы образуется преимущественно молочная кислота, в меньшей степени уксусная кислота и этанол. Консорциум ферментирует глюкозу, галактозу, лактозу, сахарозу, фруктозу, маннозу, рибозу,маннитол, сорбитол, целлобиозу, мальтозу, трегалозу, мелецитозу, туранозу, глюконат,рамнозу, ксилозу, мелибиозу, раффинозу, арабинозу, гентиобиозу, сорбозу, инулин, ликсозу, тагатозу, арабитол, эскулин, крахмал, адонитол, амигдалин, арбутин, салицин. Консорциум растет на среде 9, средах с растительными и дрожжевыми экстрактами. Консорциум растет при температуре от 10 до 45 С, приот 4,0 до 8,8. Оптимальная температура роста - 302 С, оптимальный диапазон- 6,4-6,8, условия роста микроаэробные. При росте на стандартных питательных средах в оптимальных условиях через 20 ч культивирования титр живых клеток достигает 3-6 млрд./мл,снижается до 4,2-4,6. Консорциум подавляет развитие таких плесневых грибов, как, ., . ,, . ,,. ШтаммыБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д выделены в Беларуси из силосованных кормов, идентифицированы в соответствие с руководством Берги. Штаммы депонированы в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов. Штаммы непатогенны, токсических веществ не образуют, что позволяет использовать их в микробиологической и биотехнологической промышленности, сельском хозяйстве. Сущность предлагаемого технического решения поясняется следующими примерами. Пример 1. Получение консорциума штаммов бактерийБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д. 2 17637 1 2013.10.30 Для приготовления консорциума готовили жидкую стандартную питательную среду 9. Среду стерилизовали 30 мин при 1 атм., охлаждали до 28-30 С и вносили 18-ти часовые культуры (инокуляты) штаммов бактерийБИМ В-404 Д,БИМ В-405 Д,БИМ В-551 Д,БИМ В-552 Д. Количество вносимого инокулята составляло 10 об. , штаммы культивировали раздельно. Культивирование проводили в течение 18 ч при 30 С. Полученные культуральные жидкости штаммов, содержащие живые клетки, смешивали и получали консорциум. Консорциум характеризовался высокой скоростью роста - через 18 ч культивирования титр молочнокислых бактерий достигал 6109 КОЕ/мл,снижался до 4,2. Пример 2. Использование консорциума для силосования растительного сырья. В измельченную массу кукурузы в стадии молочно-восковой спелости вносили консорциум штаммов (см. пример 1) в количестве 0,01 от веса зеленой массы, тщательно перемешивали, закладывали в силосное хранилище, трамбовали до удельной плотности 600-700 кг/м 3, укрывали полиэтиленовой пленкой. Через три месяца емкость вскрывали и общепринятыми методами определяли качество полученного силоса. Использование предлагаемого консорциума штаммов молочнокислых бактерий позволило получить силос, соответствующий первому классу качества 10. При последующей аэробной экспозиции силоса (в течение 120 ч) основные параметры силоса изменились незначительно, содержание дрожжей и мицелиальных грибов в силосе повысилось не более чем в 10 раз, что свидетельствует о высокой аэробной стабильности силоса, приготовленного с использованием консорциума. Предлагаемый консорциум расширяет арсенал биологических средств, используемых для силосования растительного сырья, и отличается от известного тем, что в состав консорциума включены штаммы молочнокислых бактерий, не подавляющие друг друга, обладающие широким спектром сбраживания углеводов, широким диапазоном температур ироста, консорциум антагонистически активен в отношении широкого спектра плесневых грибов - возбудителей аэробной порчи кормов. Перечисленные свойства консорциума могут быть использованы при силосовании растительного сырья. Источники информации 1.6337068, 1, 2002. 2.6326037, 1, 2001. 3.6054148, , 2000. 4.4528199,1985. 5.4981705, 1991. 6.2243999, 2, 2004. 7.5747020, , 1998. 8.2265655, 2, 2005. 9.,.,// . . Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3