Способ получения препарата молочнокислых бактерий БАКТОЛАКТ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ БАКТОЛАКТ(71) Заявитель Открытое акционерное общество Белмедпрепараты(73) Патентообладатель Открытое акционерное общество Белмедпрепараты(57) Способ получения препарата молочнокислых культур, предусматривающий приготовление питательной среды на основе обезжиренного молока, ее стерилизацию, охлаждение до температуры засева, засев, сквашивание и сублимационную сушку, отличающийся тем, что в качестве питательной среды используют обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 8-10 мас. , засев осуществляют 2-10 мас.инокулята,приготовленного из культуры 95/25, сквашивание ведут при температуре 26-40 С в течение 3-6 ч, затем снижают температуру до 18-20 С и выдерживают 12-16 ч, после чего проводят лиофильную сушку в среде культивирования. Изобретение относится к биотехнологии и предназначено для изготовления бактериального лечебнопрофилактического препарата для коррекции микрофлоры желудочно-кишечного тракта (условное название БАКТОЛАКТ). Бактериальные препараты представляют собой микробную массу живых бактерий, лиофилизированную в среде культивирования с добавлением защитной среды. Процесс получения препаратов молочнокислых бактерий состоит из выращивания культур родана стерильной питательной среде, сквашивания, смешивания с защитной средой и сублимационной сушки. Известен способ, по которому в обезжиренное или цельное молоко вносят белковый концентрат или сухое молоко, увеличивая содержание сухих веществ на 2-3 , затем проводят пастеризацию, гомогенизацию,охлаждение до температуры сквашивания, сквашивание консорциумом-92. Закваску нейтрализуют стерильным 5 -м раствором аммиака, перемешивают, смешивают со стерильной сахарожелатиновой средой, разливают во флаконы и сушат сублимацией 1. Наиболее близким к предлагаемому способу по технической сущности является способ (прототип), по которому в качестве питательной среды используют обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 1618 ма.и лимоннокислый натрий в количестве 0,6-0,8 мас. , полученную смесь выдерживают в течение 2-3 ч для набухания белков, заквашивание осуществляют закваской, приготовленной на консорциуме молочнокислых культурВКПМ В-6007, сквашивание ведут до кислотности 60-80 Тернера, а в качестве защитной среды используют биомассу кефирных грибков, прогретую при (74-82) С в течение 15-20 мин и охлажденную до (37-38) С в количестве 100-200 мл на 1 л биомассы. Микробные полисахариды биомассы кефирных грибков обеспечивают высокую сохранность живых культури являются фактором, повышающим иммунитет организма 2. Способ требует высокого содержания сухих веществ в питательной среде и дополнительных стадий подготовки биомассы кефирных грибков. Задача, решаемая данным изобретением, - создание экономичного малостадийного способа получения высокоэффективного бактериального препарата, обладающего широким спектром антагонистической активности и выраженной интерфероногенной активностью. 4652 1 Заявляемый способ отличается от прототипа тем, что в качестве питательной среды используют обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 8-10 ма. , засев осуществляют 2-10 мас.инокулята,приготовленного из культуры, штамм 95/25, сквашивание ведут в течение 3-6 ч при температуре (26-40) , затем продукт фасуют, снижают температуру до (18-20)и выдерживают во флаконах в течение 12-16 ч. Лиофильную сушку препарата ведут в среде культивирования. Получаемый препарат БАКТОЛАКТ обладает иммуномодулирующим действием и является эффективным средством при лечении желудочно-кишечных инфекций, дисбактериозов кишечника различной этиологии, воспалительных процессов в легких, мочеполовых путях. Штамм 95/25 характеризуется широким спектром антагонистической активности по отношению к патогенным и условно-патогенным культурам кишечной группы,,е,,,,,,. Штамм обладает выраженной устойчивостью к оксациллину и цефалоклору, а также ограниченной устойчивостью к хлорамфениколу, колистину и полимиксину. Развитие культуры в молоке носит двухфазный характер в первые 3-6 ч при температуре от 26 до 40 С формируется микробная масса с содержанием живых клеток в 1 мл среды от 1010 до 1012 и кислотностью не ниже 100 по Тернеру. В последующие 12-16 ч при температуре 18-20 С наблюдается активный синтез и накопление микробных полисахаридов (до 10 мг/мл), что придает сгустку слизистую консистенцию. В связи с высокой вязкостью получаемого продукта фасовку во флаконы ведут после первой фазы. Микробные полисахариды, синтезированные штаммом 95/25, обусловливают интерфероногенную активность БАКТОЛАКТА и являются естественной защитной средой для бактериальных клеток при лиофильной сушке. Изобретение поясняется примерами. Пример 1. Обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 10 стерилизуют при температуре 115 в течение 10 мин, охлаждают до 40 , засевают инокулятом (2 мас. ), приготовленным на культуре 95/25 и ведут процесс сквашивания при 40 в течение трех часов, после чего кисломолочный продукт стерильно разливают во флаконы по 5 мл (5 доз), снижают температуру до 19 и продолжают ферментацию еще 12 ч. Продукт замораживают в морозильной камере до -25 С, выдерживают 4 ч, а затем сушат в лиофильной сушилке по стандартной программе в течение 32 ч. Получают препарат с кислотностью 105 по Тернеру, содержащий в одной дозе 1012 живых лактобактерий и 7 мг микробного полисахарида. Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что используют обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 8 ,засев осуществляют инокулятом в количестве 5 мас. , процесс сквашивания ведут при 26 С в течение 6 ч,после чего выдерживают 14 ч при 20 С. Получают препарат с кислотностью 110 по Тернеру, содержанием в одной дозе 1011 живых лактобактерий и 8,5 мг микробного полисахарида. Пример 3. Отличается от примера 1 тем, что засев осуществляют инокулятом в количестве 10 мас. , процесс сквашивания ведут при 32 в течение 4-х ч, после чего выдерживают при 18 С 16 ч. Получают препарат с кислотностью 100 по Тернеру, содержанием в одной дозе 1010 живых лактобактерий и 10 мг микробного полисахарида. Источники информации 1. Патент 2067994, 1993. 2. Патент 2001580, 1992. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.