Способ определения фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФРУКТОЗЫ В САХАРИСТЫХ КОНДИТЕРСКИХ ИЗДЕЛИЯХ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(72) Авторы Шуляковская Ольга Васильевна Филонов Валерий Петрович Белышева Людмила Леонидовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр гигиены(56) Определение содержания фруктозы в виноградных винах, виноматериалах и ликерах. Методика выполнения измерений. МВИ.МН 2738-2007. ГОСТ 31083-2002. Соки фруктовые и овощные. Метод определения -глюкозы и -фруктозы.. . . .. 1993. - . 41. - . 9. - . 1939-1943... - 2004. - . 117. . 3. - . 339-345.. . . 2000. - . 72. - . 16. - . 3902-3907. ГАВРИЛЕНКО Н.В. и др. МатериалыРеспубликанской научно-практической конференции Молекулярнобиологические и физико-химические методы идентификации биологических объектов и материалов различного происхождения. -Минск, 2004. С. 18-23.(57) Способ определения фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях, при котором осуществляют экстракцию фруктозы из исследуемого образца дистиллированной водой в ультразвуковой бане в течение 15 минут при температуре 50-60 С, экстракт фильтруют,определяют количественное содержание фруктозы в фильтрате методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием рефрактометрического детектора и рассчитывают массовую концентрацию фруктозы в исследуемом образце. Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики, а также к пищевой промышленности. В настоящее время ассортимент сахаристых кондитерских изделий постоянно расширяется, увеличивается количество ингредиентов в рецептуре, в том числе сахаров, как за счет отдельно вносимых, так и в смеси с джемами и другими наполнителями. В связи с этим возникает необходимость в проведении анализа такой продукции. В доступной научно-технической и патентной литературе заявителем ближайший аналог заявляемого способа не выявлен. 14241 1 2011.04.30 Задачей заявляемого изобретения является создание экспресс-способа определения фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях с высокой точностью. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ определения фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях, при котором осуществляют экстракцию фруктозы из исследуемого образца дистиллированной водой в ультразвуковой бане в течение 15 мин при температуре 50-60 С, экстракт фильтруют, определяют количественное содержание фруктозы в фильтрате методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием рефрактометрического детектора и рассчитывают массовую концентрацию фруктозы в исследуемом образце. Предлагаемые нами условия экстракции позволяют достичь максимального извлечения фруктозы из сахаристых кондитерских изделий. Пример. Определение фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях. 1. Экстракция. Навеску продукта массой 5-10 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 см 3,добавляют 60-70 см 3 дистиллированной воды, помещают в ультразвуковую баню на 15 мин при температуре 50-60 С. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры и доводят общий объем до метки дистиллированной водой, содержимое колбы тщательно перемешивают, фильтруют через складчатый фильтр. Перед вводом в хроматограф фильтрат пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Полученный таким образом фильтрат в количестве 0,005 см 3 вводят в хроматограф. 2. Приготовление растворов. 2.1. Приготовление элюирующего раствора. Смешивают ацетонитрил для ВЭЖХ и дистиллированную воду в объемном соотношении 8020. Перед применением элюирующий раствор фильтруют через мембранный тефлоновый фильтр. 2.2. Приготовление градуировочных растворов. 2.2.1. Приготовление основного градуировочного раствора фруктозы с массовой концентрацией 50 г/дм 3. Навеску фруктозы массой (5,00,01) г взвешивают с точностью до 0,0001 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см 3, добавляют 60-80 см 3 дистиллированной воды. Раствор перемешивают до полного растворения фруктозы, доводят объем до метки дистиллированной водой при температуре (202) С. Точную концентрацию фруктозы в растворе рассчитывают с учетом содержания основного вещества по формуле 10 , где- массовая концентрация фруктозы в основном градуировочном растворе, г/дм 3- масса навески фруктозы, г- содержание основного вещества фруктозы,- объем мерной колбы, см 3. Основной раствор хранят в холодильнике при (42) С в течение 7 суток. 2.2.2. Приготовление рабочих градуировочных растворов фруктозы. Для приготовления рабочих градуировочных растворов фруктозы с концентрацией 0,5 1,0 10,0 25,0 50,0 г/дм 3 берут 0,5 1,0 10,0 25,0 50 см 3 основного градуировочного раствора фруктозы в мерную колбу вместимостью 50 см 3 и доводят объем до метки дистиллированной водой при температуре (202) С. Точное значение концентрации фруктозы в рабочих градуировочных растворах рассчитывают с учетом точного значения концентрации фруктозы в основном градуировочном растворе. Для приготовления градуировки используют свежеприготовленные растворы. 3. Установление времени удерживания фруктозы. 2 14241 1 2011.04.30 Для определения времени удерживания фруктозы 0,005 см 3 основного градуировочного раствора фруктозы с концентрацией 50 г/дм 3 хроматографируют не менее 5 раз. Вычисляют среднее арифметическое из величин времени удерживания фруктозы. В табл. 1 представлены условия хроматографирования фруктозы и время удерживания. Таблица 1 Условия хроматографирования и время удерживания фруктозы Наименование параметра Количественное значение параметра Скорость потока элюента 0,8 см 3/мин Хроматографическая колонка 4,6150 мм, 5 мкм Температура термостата колонки(400,1) С Температура термостата ячейки детектора(200,1) С Объем вводимой пробы 0,005 см 3 Время удерживания(8,60,5) мин 4. Установление градуировочной характеристики. Для определения рабочего диапазона концентраций и линейности функции градуировки выполняют начальную градуировку хроматографа. Ее проводят по рабочим градуировочным растворам фруктозы, хроматографируя каждый раствор не менее двух раз. Зависимость площади хроматографического пика от концентрации фруктозы должна иметь вид. Параметры градуировочной зависимости рассчитывают путем анализа линейной регрессии скорректированных площадей пиков. 5. Выполнение измерений. Анализ полученного фильтрата по п. 1 проводят на жидкостном хроматографе с рефрактометрическим детектором. Условия хроматографирования такие же, как и при построении градуировочного графика по п. 4. Проводят анализ двух параллельных проб исследуемого образца. Каждая параллельная проба хроматографируется не менее двух раз. Если рассчитанная массовая концентрация фруктозы в пробе превышает градуировочный диапазон, пробу разбавляют элюирующим раствором, подбирая коэффициент разбавления таким образом, чтобы полученное значение концентрации фруктозы попадало в диапазон градуировки, и повторяют измерение. 6. Обработка результатов измерений. Массовую концентрацию фруктозы в пробе (г/кг) рассчитывают по формуле 10 3, где- массовая концентрация фруктозы в хроматографируемой пробе, полученная по градуировочному графику, г/дм 3- объем, в котором растворена навеска, см 3- масса навески, г 10-3 - коэффициент пересчета в г/кг. Расчет массовой концентрации фруктозы проводят до третьего десятичного знака с последующим округлением до второго десятичного знака. За результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных измерений. Результаты определения содержания фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях представлены в табл. 2. Достигаемый технический результат заявляемого способа заключается в том, что способ является экспресс-методом и позволяет определить фруктозу в сахаристых кондитерских изделиях с высокой точностью за 40 мин. 14241 1 2011.04.30 Таблица 2 Определяемое содержание фруктозы в сахаристых кондитерских изделиях по предлагаемому способу Содержание, г/кг Температура Время эксНаименование Извлечение,экстракции, тракции, Расчетные Внесенное Опред-е продукта 40 Конфеты Грыльяж дыябетычны з арахсам Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4