Способ определения внесенного изомальта в кондитерских изделиях

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВНЕСЕННОГО ИЗОМАЛЬТА В КОНДИТЕРСКИХ ИЗДЕЛИЯХ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(72) Авторы Шуляковская Ольга Васильевна Застенская Ирина Алексеевна Белышева Людмила Леонидовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр гигиены(56) - 15086-2006. -, , . Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. Р 4.1.167203.(57) Способ определения внесенного изомальта в кондитерских изделиях, при котором осуществляют экстракцию изомальта из исследуемого образца дистиллированной водой в ультразвуковой бане в течение 15 минут при температуре 50-60 С, экстракт фильтруют,определяют количественное содержание изомальта в фильтрате методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием рефрактометрического детектора и рассчитывают массовую концентрацию изомальта в исследуемом образце. Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики, а также к пищевой промышленности. Кондитерские изделия пользуются широкой популярностью среди взрослого и детского населения. Однако они являются в основном источником углеводов, поскольку одним из компонентов рецептуры при их производстве является сахар, который образует структуру и придает вкус изделиям. С другой стороны, сахароза имеет высокую калорийность,а также противопоказана лицам, страдающим сахарным диабетом. Поэтому кондитеры в настоящее время стали производить функциональные продукты питания, в которых сахарозу заменяют заменителем сахара, одним из которых является изомальт. Изомальт получают из свекловичного сахара. Сладость изомальта составляет 45-60 сладости сахарозы. Употребление изомальта не приводит к увеличению инсулина и глюкозы в крови человека, поэтому он является заменителем сахара в диете лиц, страдающих диабетом. В связи с этим налажен выпуск большого количества мучных кондитерских изделий с изомальтом и необходим анализ такой продукции по содержанию изомальта. В доступной научно-технической и патентной литературе заявителем ближайший аналог заявляемого способа не выявлен. Задачей заявляемого изобретения является создание экспресс-способа определения внесенного изомальта в кондитерских изделиях с высокой точностью. 14243 1 2011.04.30 Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ определения внесенного изомальта в кондитерских изделиях, при котором осуществляют экстракцию изомальта из исследуемого образца дистиллированной водой в ультразвуковой бане в течение 15 мин при температуре 50-60 С, экстракт фильтруют, определяют количественное содержание изомальта в фильтрате методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием спектрофотометрического детектора и рассчитывают массовую концентрацию изомальта в исследуемом образце. Предлагаемые нами условия экстракции позволяют достичь максимального извлечения изомальта из кондитерских изделий. Пример. Определение внесенного изомальта в кондитерских изделиях. 1. Экстракция. Навеску продукта массой 5-10 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 см 3,добавляют 60-70 см 3 дистиллированной воды, помещают в ультразвуковую баню на 15 мин при температуре 50-60 С. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры и доводят общий объем до метки дистиллированной водой, содержимое колбы тщательно перемешивают, фильтруют через складчатый фильтр. Перед вводом в хроматограф фильтрат пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Полученный таким образом фильтрат в количестве 0,005 см 3 вводят в хроматограф. 2. Приготовление растворов. 2.1. Приготовление элюирующего раствора. Смешивают ацетонитрил для ВЭЖХ и дистиллированную воду в объемном соотношении 8020. Перед применением элюирующий раствор фильтруют через мембранный тефлоновый фильтр. 2.2. Приготовление градуировочных растворов. 2.2.1. Приготовление основного градуировочного раствора изомальта с массовой концентрацией 50 г/дм 3. Навеску изомальта массой (5,00,01) г взвешивают с точностью до 0,0001 г, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см 3, добавляют 60-80 см 3 дистиллированной воды. Раствор перемешивают до полного растворения изомальта, доводят объем до метки дистиллированной водой при температуре (202) С. Точную концентрацию изомальта в растворе рассчитывают с учетом содержания основного вещества по формуле 10 , где- массовая концентрация изомальта в основном градуировочном растворе, г/дм 3- масса навески изомальта, г- содержание основного вещества изомальта,- объем мерной колбы, см 3. Основной раствор хранят в холодильнике при (42) С в течение 7 суток. 2.2.2. Приготовление рабочих градуировочных растворов изомальта. Для приготовления рабочих градуировочных растворов изомальта с концентрацией 0,5 1,0 10,0 25,0 50,0 г/дм 3 берут 0,5 1,0 10,0 25,0 50 см 3 основного градуировочного раствора изомальта в мерную колбу вместимостью 50 см 3 и доводят объем до метки дистиллированной водой при температуре (202) С. Точное значение концентрации изомальта в рабочих градуировочных растворах рассчитывают с учетом точного значения концентрации изомальта в основном градуировочном растворе. Для приготовления градуировки используют свежеприготовленные растворы. 3. Установление времени удерживания изомальта. 14243 1 2011.04.30 Для определения времени удерживания изомальта 0,005 см 3 основного градуировочного раствора изомальта с концентрацией 50 г/дм 3 хроматографируют не менее 5 раз. Вычисляют среднее арифметическое из величин времени удерживания изомальта. В табл. 1 представлены условия хроматографирования изомальта и время удерживания. Таблица 1 Условия хроматографирования и время удерживания изомальта Наименование параметра Количественное значение параметра Скорость потока элюента 0,8 см 3/мин Хроматографическая колонка 4,6150 мм, 5 мкм Температура термостата колонки(400,1) С Температура термостата ячейки детектора(200,1) С Объем вводимой пробы 0,005 см 3 Время удерживания(10,10,3) мин 4. Установление градуировочной характеристики. Для определения рабочего диапазона концентраций и линейности функции градуировки выполняют начальную градуировку хроматографа. Ее проводят по рабочим градуировочным растворам изомальта, хроматографируя каждый раствор не менее двух раз. Зависимость площади хроматографического пика от концентрации изомальта должна иметь вид. Параметры градуировочной зависимости рассчитывают путем анализа линейной регрессии скорректированных площадей пиков. 5. Выполнение измерений. Анализ полученного фильтрата по п. 1 проводят на жидкостном хроматографе с рефрактометрическим детектором. Условия хроматографирования такие же, как и при построении градуировочного графика по п. 4. Проводят анализ двух параллельных проб исследуемого образца. Каждая параллельная проба хроматографируется не менее двух раз. Если рассчитанная массовая концентрация изомальта в пробе превышает градуировочный диапазон, пробу разбавляют элюирующим раствором, подбирая коэффициент разбавления таким образом, чтобы полученное значение концентрации изомальта попадало в диапазон градуировки, и повторяют измерение. 6. Обработка результатов измерений. Массовую концентрацию изомальта в пробе (г/кг) рассчитывают по формуле 10 3, где- массовая концентрация изомальта в хроматографируемой пробе, полученная по градуировочному графику, г/дм 3- объем, в котором растворена навеска, см 3- масса навески, г 10-3 - коэффициент пересчета в г/кг. Расчет массовой концентрации изомальта проводят до третьего десятичного знака с последующим округлением до второго десятичного знака. За результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных измерений. Результаты определения содержания изомальта в кондитерских изделиях представлены в табл. 2. Достигаемый технический результат заявляемого способа заключается в том, что способ является экспресс-методом и позволяет определить внесенный изомальт в кондитерских изделиях с высокой точностью за 40 мин. 14243 1 2011.04.30 Таблица 2 Определяемое содержание внесенного изомальта в кондитерских изделиях по предлагаемому способу Содержание, г/кг Температура Время эксНаименование Опред-е по Извлечение,экстракции, тракции, Расчетные Внесенное продукта Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4