Антрациклиновые гликозиды, способ их получения, промежуточное дииод-соединение и способ его получения

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ(71) Заявитель ФАРМАЦИЯ энд АПДЖОН С.п.А.(73) Патентообладатель ФАРМАЦИЯ энд АПДЖОН С.п.А.(57) 1. Антрациклиновые гликозиды общей формулы А, в которой Х представляет прямую или разветвленную С 1-6 алкильную группу или бензильную группу и которые имеютиликонфигурацию при 2-углеродном атоме, и их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли. 2. Соединение по п. 1, в котором Х представляет метил. 3. Соединение по п. 1, в котором Х представляет С 2-6 алкил. 4. Соединение по п. 1, которое выбрано из группы, включающей 3-дезамино-3-2-бензилокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,3-дезамино-3-2-этокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,3-дезамино-3-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,3-дезамино-3-2-изопропилокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат и 3-дезамино-3-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат. 5. Способ получения антрациклингликозида формулы А, определенной в п. 1, или его фармацевтически приемлемой соли, отличающийся тем, что осуществляют реакцию доксорубицина или его кислотно-аддитивной соли с дииод-соединением общей формулы С если необходимо, превращение антрациклингликозида формулы А, полученного таким образом, в его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль. 6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что доксорубицин или его хлоргидрат, растворенный в полярном апротонном растворителе, подвергают взаимодействию при комнатной температуре и в присутствии сухого органического основания с дииод-соединением общей формулы С с получением соответствующего морфолинил-доксорубицинового производного формулы А, которое после очистки на силикагельной колонке с использованием в качестве элюирующей системы смеси метиленхлорид-метанол (975 объем/объем) выделяют с помощью обработки метанольным безводным хлористым водородом в виде его хлоргидрата. 7. Дииод-соединение формулы С где Х представляет прямую или разветвленную С 1-6 алкильную группу или бензильную группу. 8. Способ получения дииод-соединения формулы С, определенной в п. 7, отличающийся тем, что осуществляют(а) периодатное окисление соединения формулы 1 в которой Х имеет значения, определенные в п. 1,(в) восстановление полученного таким образом диальдегидного производного формулы 1 где Х имеет значения, определенные выше,(с) сульфонирование полученного таким образом дигидроксипроизводного формулы Е 1 иодирование сульфонированного производного, полученного таким образом. 9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что - или -арабинозу подвергают реакции со спиртом Х-ОН,где Х имеет значения, определенные в п. 1, с получением таким образом соединения формулы 1. 10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что дигидроксипроизводное формулы Е 1 на стадии (с) подвергают реакции с п-толуолсульфонилхлоридом. Приоритет по пунктам формулы изобретения от 1989.12.19 пп. 1, 2 формулы, где Х - метил,п. 4 формулы - соединения 3-дезамино-3-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,3-дезамино-3-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат. пп. 5-9 формулы с учетом значения Х - метил от 1990.04.03 пп. 1, 3 формулы, где Х - прямой или разветвленный С 2-6-алкил или бензил,п. 4 формулы - соединения 3-дезамино-3-2-бензилокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,3-дезамино-3-2-этокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,2 3369 1 3-дезамино-3-2-изопропилокси-4-морфолинил-доксорубицин и его хлоргидрат,пп. 5-9 формулы с учетом значения Х - прямой или разветвленный С 2-6-алкил или бензил. Изобретение относится к антрациклиновым гликозидам, способам их получения и фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения. Изобретение обеспечивает новые антрациклиновые гликозиды общей формулы А, в которой 3-атом азота включен в 2-алкокси-4-морфолиниловое кольцо Х - линейная или разветвленная 1-С 6-алкильную группа или бензильный радикал -СН 2 С 6 Н 5 2- углеродный атом, имеющий - или -конфигурацию, а также фармацевтически приемлемые кислые соли присоединения на их основе. Предпочтительной солью является соль хлористоводородной кислоты- гидрохлорид. Морфолино-антрациклины являются хорошо известными соединениями, проявившими на экспериментальных опухолях мышей обнадеживающую противоопухолевую активность ( . . 1988, т. 6. - С. 55-101). Среди них - 2-метокси-4-морфолинилантрациклины(ХОСН 3) уже были заявлены (Патент США А-4, 672057, МПК А 6131/70). Эти соединения были получены согласно способу восстановительного алкилирования с использованием хирального диальдегида. Согласно способу настоящего изобретения, замещенные морфолиниловые кольца получают путем бисалкилирования 3-аминогруппы антрациклинов новыми хиральными 1,5-дииодо-2-алкокси- или бензилоксипроизводными, включенными в рамки изобретения. Предпочтительные антрациклиновые гликозиды общей формулы А включают А 1-3-деамино-3-(2)(ХСН 2 С 6 Н 5) А 2-3-деамино-3(2)-(этокси-4 морфолинил)-доксорубицин (ХС 2 Н 5) А 3-3-деамино-3-(2)-(изопропилокси-4-морфолинил) доксорубицин (ХСН(СН 3)2) А 4-3-деамино-3-(2)-(метокси-4-морфолинил)доксорубицин (ХСН 3) А 53-деамино-3-(2)(- метокси-4-морфолинил)-доксорубицин (ХСН 3) и хлористоводородные соли на их основе. Соединения могут иметьиликонфигурацию у атома углерода С-2 морфолинового кольца. Новые антибиотики на основе антрациклиновых гликозидов настоящего изобретения, т.е. те, которые представлены общей формулой А, получают путем создания замещенного морфолинилового кольца на сахарной группировке антрациклинового гликозида доксорубицина общей формулы (В) 3369 1 Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает способ получения антрациклинового гликозида формулы (А) или фармацевтически приемлемой кислой соли присоединения на его основе, который включает следующие стадиивзаимодействие доксорубицина или кислой соли присоединения на его основе, например гидрохлорида с дииодосодержащим соединением общей формулы (С),в которой Х определен выше и , если в этом есть необходимость, превращение антрациклинового гликозида формулы (А) в фармацевтически приемлемую кислую соль присоединения на его основе. Алкилирование С-3-аминогруппы доксорубицина или соли доксорубицина обычно проводят в стадиив полярном апротонном растворителе и в присутствии сухого органического основания, такого, как триэтиламин. Реакцию обычно проводят при комнатной температуре в течение 8-24 ч. Атом углерода С-2, несущий ОХ-группу, в дииодосодержащем соединении может иметь - или -конфигурацию. В предпочтительном варианте доксорубицин или гидрохлорид доксорубицина, растворенный в полярном апротонном растворителе, взаимодействует при комнатной температуре и в присутствии сухого органического основания с дииодосодержащим соединением общей формулы (С), образуя соответствующее морфолинилдоксорубициновое производное формулы (А). После очистки на колонке из силикагеля с использованием в качестве элюирующего растворителя смеси метиленхлорид-метанол, взятой в объемном соотношении 975, его выделяют в виде гидрохлорида, обработав метанольным раствором сухого хлористого водорода. Чистый 2//-(1 С 6)алкокси или бензилокси-антрациклиновый гликозид формулы (А) либо его соль, или чистый 2//-(С 1 С 6)алкокси или бензилокси-антрациклиновый гликозид формулы (А) либо его соль могут быть обеспечены таким образом согласно способу настоящего изобретения. Изобретение также обеспечивает способ получения оптически чистого дииодосодержащего соединения формулы (С), исходя из предшественника сахара общей формулы , полученного из -арабинозы,в которой Х имеет значения, определенные выше. Этот способ включает (а) периодатное окисление соединения формулы в которой Х определен вышевосстановление полученного таким образом соединения формулы в которой Х определен выше (с) сульфирование полученного таким образом дигидроксипроизводного формулы (Е) в которой Х определен выше, ииодирование сульфированного производного, полученного таким образом. Для получения дииодосодержащих соединений формулы (С) 1-замещенные сахара , полученные в соответствии со стандартными методиками (. . . Т. 1. 1962), сначала преобразуются в диальдегидные производные . Обычно в качестве исходного материала используют арабинозу. Она подвергается взаимодействию со спиртом Х-ОН, образуя при этом соединение формулыдиальдегид-производные могут быть получены путем периодатного окисления водных растворов с последующим восстановлением в 1,5-дигидрокси-2-алкокси-или бензилокси-3-оксапентан Е 1, используя в качестве восстановителя такие вещества, как борогидрид натрия или цианоборогидрид натрия, при рН 6,5 и проводя восстановление в смеси воды и метанола. Полученные в результате дигидросоединения Е 1 сульфируют в положении 1- и 5-гидроксильных групп,используя для этих целей обычно применяемый раствор пара-толуолсульфохлорида в пиридине, сульфирование проводят при 4 С, при этом образуются сульфониловые эфиры формулы , из которых получают дииодопроизводные С после обработки йодидом калия или натрия в апротонном растворителе, таком, как 3369 1 метилэтилкетон, при 85 С в течение 1-2 дней. Последовательность этих реакций не влияет на хиральность в положении С-2 дииодопроизводных С, которая совпадает с хиральностью исходных сахаров - . Предпочтительный вариант способа, осуществленного согласно настоящему изобретению, проиллюстрирован реакционной схемой (см. в конце текста). Из соединений, согласно изобретению, могут приготавливаться фармацевтические композиции, включающие фармацевтически приемлемые носители или разбавители и в качестве активного ингредиента - антрациклиновый гликозид формулы (А) либо его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль. Могут быть использованы стандартные носители или разбавители. Композиция может готовиться и вводиться, например внутривенно, согласно традиционным методам. Антрациклиновые гликозиды формулы (А) и фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли являются противоопухолевыми средствами. Они могут быть использованы для лечения больных с опухолями путем введения их терапевтически активного количества. Соединения могут быть использованы для ингибирования роста опухолей, и в терапевтических дозах эти соединения нетоксичны. Пример 1. Получение 1,5-ди(пара-толуолсульфонил) окси-2 -бензилокси-3-окса-пентана (1). -Арабинозу (3 г,0,22 моль) и бензиловый спирт (15 мл) нагревали при перемешивании в присутствии кислой формы 50 х 2 (2 г). Через 4 ч смесь охладили и отфильтровали. Растворитель отгоняли при пониженном давлении,и из ацетона выделили 3,5 г 1-бензиларабино-пиранозида . Провели тонкослойную хроматографию на пластинке из Кизельгура 254 , в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метилен-хлорид (метанол) вода 120/20/2,0,4215 (воды). 1-Бензиларабинопиранозид 1 (3,48 г, 0,0145 моль) растворили в воде (100 мл) и обработали периодатом натрия (5,6 г, 0,026 моль), реакцию проводили при 0 С в течение 2 ч. Затем добавили хлорид бария и добавлением карбоната бария довели рН смеси до 7, отфильтровали и промыли смесь водой. Водную фракцию сконцентрировали при пониженном давлении до сиропообразного состояния и проэкстрагировали ацетонитрилом (50 мл). Органическую фазу разбавили смесью метанола (20 мл) и воды (10 мл), обработали натрий цианоборогидридом (0,3 г), растворенным в воде (5 мл). Через 15 мин рН смеси довели до 7, добавляя 50 х 2, и отфильтровали. Растворители удалили при пониженном давлении и получили 1,5 дигидрокси-2 бензилокси-3-оксапентан Е 1 (2,6 г, выход 85 ). Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура 254 , в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метилен-хлорид/метанол 10/1. 0,28. Соединение Е 1 (2,6 г) растворили в сухом пиридине и добавили пара-толуолсульфохлорид (6,67 г). Смесь оставили на ночь при 0 С, затем вылили в ледяную воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промыли водой, отделили, высушили над безводным сульфатом натрия и отфильтровали. Растворитель отогнали при пониженном давлении и получили в результате 1,5-ди(пара-толуолсульфонил) окси-2 бензилокси-3-окса-пентан 1 (4,3 г, выход 68 ). Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура 254 , в качестве элюирующего растворителя использовали смесь метиленхлорид/ацетон 98/2, 0,55. Параметры ЯМР-спектра (СС 13, 400 мГц)2,42 (, 6 Н, два СН Тс) 3,69, 3,65 (два , 4,7, 11,7 Гц,2 Н, Тс-ОНС 2 СН 2) 3,94 (два, , 5,3, 10 Гц, 2 Н, ОСН-С 2-ОТс) 4,08 (, 4,7 Гц, 2 Н, 22-) 4,46, 4,56 (два , 11,7 Гц, 2 Н, ОСН 2-Фен) 4,72 (, 5,3 Гц, 1, 2-) 7,2-7,8 (, 13, ароматика). Пример 2. Получение 1,5-дийодо-2-бензилокси-3-окса-пентана (С 1). Соединение 1 (4,3 г, 8,3 ммоль), полученного в примере 1, было растворено в метилэтилкетоне (50 мл) с добавлением йодил натрия (7,4 г, 49 ммоль). Смесь выдержали при 95 С в течение 24 ч. После этого растворитель удалили при пониженном давлении, а остаток проэкстрагировали н-гексаном. Органический слой сконцентрировали до сиропообразного состояния и получили соединение С 1 (3,5 г, выход 90 ). Провели тонкослойную хроматографию на пластине из Кизельгура 254 , в качестве элюирующего растворителя использовали смесь н-гексан/этилацетат 10/0,5, 0,34. Параметры ЯМР-спектра (3, 400 Мгц)3,27 (, 6,8 Гц, 2 Н, 2-2-) 3,30 (, 5,5 Гц, 2 Н,2-) 3,84 (, 2 Н, -22) 4,64, 4,74 (два , 11,7 Гц, 2 Н, -СН 2-фен) 4,81 (, 5,5 Гц, 1, -2-) 7,3-7,5 (, 5, ароматика). Пример 3. Получение 3-деамино-32 бензилокси-4-морфолинилдоксорубицина (А 1). К раствору гидрохлорида доксорубицина (0,5 г, 0,86 ммоль) в сухом диметилформамиде (20 мл) добавили 1,5-дийодо-2-бензилокси 3-окса-пентан (С 1) (3,5 г, 7,54 ммоль) и сухой триэтиламин (3,6 мл, 2,6 ммоль). Смесь выдержали при комнатной температуре в течение 36 ч, а затем вылили в воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. После стандартной обработки сырой продукт очистили на колонке из кремневой кислоты, использовав в качестве элюирующего растворителя смесь метиленхлорид/метанол 97/5, получили после обработки безводным хлористым водородом в метаноле 0,3 г (выход 46 ) соединения А 1 в виде хлористоводородной соли. 5 3369 1 Прохроматографировали на пластине из Кизельгура 254 , используя в качестве элюирующей системы смесь метиленхлорид/метанол 10/1, 0,6 ПА-МС м/е 756 (М). Параметры ЯМР-спектра свободного основания (3, 200 МГц)1,37 (, 6,6 Гц, 3 Н, 5 СН 3) 1,76(, 1, 2) 5,28 (, 2,4, 3,8 Гц, 1, 7-) 5,54 (, 1, 1-Н) 7,2-8,1 (, 8 Н, ароматические Н) 13,22 (, 1, 11-) 13,95 (, 1, 6-). Пример 4. Получение 1,5-дийодо-2-этокси-3-окса-пента(С 2). Соединение С 2 получили, использовав в качестве исходного материала 2 г -арабинозы, которую подвергли ряду последовательных операций, описанных в примерах 1 и 2. 1-Этиларабинопиранозид (2) 233,5 (с 1 воды) 1,5-дигидрокси-2-этокси-3 оксапентан(Е 2). Тонкослойная хроматография на пластине из Кизельгура 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 10/1, 0,33. 1,5-Ди-(пара-толуолсульфонил)окси-2-этокси-3-оксапентан(2) ТСХ на пластине из Кизельгура 254, элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 98/2, 0,56. Данные ЯМР-спектра (3, 200 Мгц)1,11 (, 0,7 Гц, 3 Н, ОСН 2 СН 3) 2,43 (, 6 Н, два СН 3-Тс) 3,44,3,58 (два , 7,0, 9,4 Гц, 2 Н, ОСН 2 СН 3) 3,68 (, 2 Н, -СН 2-СН 2-ОТс) 3,89 (, 5,4, 2 Н, 2 Тс) 4,10 (, 4,8 Гц, 2 Н, -2) 4,61 (, 5,4 Гц, 1, 2) 7,3-7,8 (, 8 Н, ароматические Н). 1,5-Дийодо-2-этокси-3-окса-пента (С 2). ТСХ на пластине из Кизельгура 254 , элюирующий растворитель н-гексан/этилацетат 10/0,5,0,37. Параметры ЯМР-спектра (3, 200 МГц)1,24 (, 7,0 Гц, 3 Н, ОСН 2 СН 3) 3,23 (, 5,6 Гц, 2 Н, -2-) 3,27 (, 6,8 Гц, 2 Н, -22-) 3,58, 3,77 (два , 7,0, 9,3 Гц, 2 Н, ОСН 2 СН 3) 3,78, 3,87 (два , 6,8, 10,6 Гц, 2 Н,-2-2-) 4,70 (, 5,6 Гц, 1, 2-). Пример 5. Получение 3-деамино-32-этокси-4-морфолинилдоксорубицина-(А 2). 0,5 г гидрохлорида доксорубицина запустили в реакцию с соединением С 2 (3 г) согласно той же реакционной схеме, которая была представлена в примере 3. В результате получили 0,28 г соединения А 2 в виде хлористоводородной соли. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 10/1, 0,58, ПАМС м/е 694 (М). Параметры ЯМР-спектра свободного основания (13, 200 МГц)1,16 (, 7,0 Гц, 3 Н, ОН 2 СН 3) 1,36 (, 6,4 Гц, 3 Н, 5-СН 3) 1,7-1,8 (, 2 Н, 2-СН 2) 2,16 (, 4 14,7 Гц, 1, 8-) 2,3-2,6 (, 6 Н, 2-2) 8-, 3-Н) 3,02 (, 18,8 Гц, 1, 10-) 3,26 (, 1,9, 18,8 Гц, 1, 10-) 3,46, 3,78 (два ,7,0, 9,8 Гц, 2 Н, ОСН 2 СН 3) 3,53, 3,93 (два , 2 Н, ОСН 2 СН 2) 3,68 (, 1, 4-) 3,93 (, 6,4 Гц, 1, 5-) 4,08 (, 3 Н, ОСН 3) 4,56 (, 2,3, 4,7 Гц, 1, ОСН/ОСН 2 СН 3)СН 2) 4,72 (, 1, 9-) 4,74 (, 2,2) 5,30 (, 1, 7-) 5,55 (, 1, 1-) 7,3-8,1 (, 3, ароматические ) 13,25 (, 1, 11-) 13,97 (, 1, 6-). Пример 6. Получение 1,6-дийодо-2 изопропилокси-3-окса-пента(С 3). Озаглавленное соединение 3 получили, используя в качестве исходного материала 3 г -арабинозы в той же последовательности реакций, которые описаны в примерах 1 и 2. 1-Изопропиларабинопиранозид (3) 225 (вода) 1,5-дигидрокси-2-изопропилокси-3 оксапентан (Е 3). ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 10/1, 0,36. 1,5-Ди-(пара-толуолсульфонил) окси-2-изопропилокси-3-окса-пентан (3). ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 98/2, 0,55. Параметры ЯМР-спектра (СС 3, 200 МГц)1,05, 1,10 (два , 6,2 Гц, 6 Е, СН(СН 3)2) 2,42 (два , 6 Н, СН 3 Тс) 3,64 (два , 2 Н, ТсСН 2 СН 2-) 3,76 (, 1, СН(СН 3)2) 3,84 (, 2 Н, -СН-СН 2-ОТс) 4,08 (, 5,6 Гц, 2 Н,ТсСН 2-СН 2-) 7,3-7,8 (, 8 Н, ароматические Н). 1,5-Дийодо-2 -изопропилокси-3-окса-пентан (С 3). ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - н-гексан/этилацетат 10/0,5, 0,40. Параметры ЯМР-спектра (3, 200 МГц)1,20, 1,22 (два , 6,4 Гц, 6 Н, СН(СН 3)2) 3,24 (, 5,6 Гц,2 Н, О-СН-2-) 3,28 (, 6,7 Гц, 2 Н, -22-) 3,6-3,8 (, 2 Н, -2-2-) 3,94 (, 1, СН(СН 3)2) 4,76 (, 5,6 Гц, 1, 2-). 3369 1 Пример 7. Получение 3-деамино-3-2-изопропилокси-4-морфолинилдоксорубицина А 3. 0,5 г доксорубицина запустили в реакцию с соединением С 3 согласно процедуре, изложенной в примере 3, в результате получили 0,21 г озаглавленного соединения А 3 в виде хлористоводородной соли. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 10/1, 0,55 ПАМС м/е 708 (М). Параметры ЯМР-спектра свободного основания (3, 200 МГц)1,09, 1,016 (два , 6,0 Гц, 6 Н,СН(СН 3)2) 1,36 (, 6,6 Гц, 3 Н, 5-СН 3) 1,86 (, 2 Н, 2-СН 2) 2,15 (, 4,0, 14,9 Гц, 1, 8-) 2,3-2,8 (,6 Н, 22, 8-3-) 2,97 (, 28,8 Гц, 1, 10-) 3,26 (, 18,8 Гц, 1, 10-) 3,54 (, 1, //2) 3,74 (, 1, 4-) 3,81-4,1 (, 3, 2 5-, ОСН(СН 3)2) 4,08 (, 3 Н, ОСН 3) 4,66 (с,1, 9-) 4,68 (, 2 Гц, 4,9 Гц, 1, ОСНОСН(СН 3)2 СН 2) 4,75 (, 2 Н, 2) 5,28 (, 1, 7-) 5,55 (, 1, 1-Н) 7,3-7,8 (, 3 Н, ароматические ) 13,24 (, 1, 11-) 13,97 (, 1, 6-). Пример 8. 1,5-Дигидрокси-2-метокси-3-окса-пентан (Е 4). 1,5-Диоксо-2-метокси-3-окса-пентан(4) (1,5 г, 11 ммоль),полученный согласно методике (. -, 1962, т.1, с. 445), растворили в смеси воды (10 мл) и метанола (10 мл), обработали натрийборогидридом (0,1 г), растворенным в 2 мл воды. Через 20 мин рН раствора довели до рН 7, добавив кислую форму смолы 50 2, отфильтровали и растворитель удалили при пониженном давлении, в результате получили 1,4 г (выход 93 ) озаглавленного соединения. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 101, коричневое пятно при 0,24 после нагревания пластины с хроматограммой, предварительно обработанной (опрысканной) серной кислотой. Параметры ЯМР-спектра (200 МГц, ДМСО-5)3,26 (, 3 Н, ОСН 3) 3,4-3,6 (, 6 Н,-СН 2-СН 2 СН-СН 2-) 4,37 (, 5,4 Гц, 1, О-СН-О) 4,40 (, 2, -2-22-). Пример 9. 1,5-Ди(пара-толуолсульфонил)окси-2-метокси-3-окса-пентан (4). 1,5-Дигидрокси-2-метокси-3 окса-пентан (Е 4) (1,4 г, 10,3 ммоль), полученного в соответствии с описанием примера 8, растворили в сухом пиридине (10 мл) и обработали при 0 С паратолуолсульфонилхлоридом (6,4 г, 0,034 ммоль). Смесь выдержали при 4 С в течение ночи, затем вылили ее в смесь воды и льда и, наконец, проэкстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промыли водой, отделили, высушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали. Растворитель удалили при пониженном давлении. Сырой продукт прохроматографировали на колонке, заполненной кремниевой кислотой, используя метиленхлорид в качестве элюирующего средства,получив 2,8 г (выход 62 ) чистого производного, название которого дано в заголовке. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 955, коричневое пятно при 0,55 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой. Параметры ЯМР-спектра (200 МГц, 13)2,44 (, 6 Н, СН 3-Фен) 3,27 (, 3 Н, ОСН 3) 3,69 (, 2 Н,222) 3,90 (, 2 Н, 22) 4,11 (, 2 Н, 222-) 4,56 (, 5,3 Гц, 1, 2) 7,3-7,8 (, 8, ароматические ). Пример 10. Получение 1,5-дийодо-2-метокси-3-окса-пентана С 4 (1,6 г, 3,6 ммоль). 1,5-Ди (пара-толуолсульфонил)окси-2-метокси-3-окса-пентана 4, полученного в описанном примере 9, растворили в метилэтилкетоне (30 мл) и обработали йодидом натрия (3,04 г, 20,2 ммоль) при 85 С в течение двух дней. После этого растворитель отогнали в вакууме, остаток разбавили н-гексаном (50 мл) и водой. Органический слой отделили,высушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали. Растворитель отогнали при пониженном давлении, в результате получили 1,5-дийодо-2-метокси-3-окса-пентан С 4 (1,2 г, выход 86 ). ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид, коричневое при 0,54,после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно обработанной серной кислотой. Данные ЯМР-спектра (200 МГц, 13)3,15 (, 4 Н, -2-22-) 3,40 (, 3 Н, ОСН 3) 3,80(, 2 Н, -22-), 4,62 (, 5,6 Гц, 1, 2). Пример 11. Получение 3-деамино-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицина А 4. К раствору гидрохлорида доксорубицина (80 мг, 0,138 ммоль) в сухом диметилформамиде (4 мл) добавили 1,5-дийодо-2-метокси-3 оксапентан (С 4, 0,8 г, 2,0 ммоль) и триэтиламин (0,056 мл, 0,388 ммоль). Реакционную смесь выдержали при комнатной температуре при перемешивании в течение 36 ч, затем смесь вылили в воду и проэкстрагировали метиленхлоридом. После стандартной обработки сырой продукт очистили на колонке из кремниевой кислоты,используя в качестве элюирующего растворителя смесь метиленхлорид/метанол 97,5/2,5, в результате получили после обработки метанольным раствором безводного хлористого водорода 40 мг (выход 45 ) озаглавленного соединения в виде хлористо-водородной соли. 3369 1 ТСХ на Кизельгуре 254 , использовав в качестве элюирующей системы метиленхлорид/метанол 19/1, 0,15. Параметры ЯМР-спектра (400 МГц, СС 13) свободного основания 13,98 (, 1, 6-) 13,27 (, 1, 11) 8,03 (, 7,7 Гц, 1, 1-) 7,78 (, 7,7, 8,6 Гц, 1, 2-) 7,39 (, 8,6 Гц, 1, 3-) 5,55 (,1, 1-) 5,30 (, 2 4,1 Гц, 1, 7-) 4,74 (, 4,5, 14-2-) 4,74 (, 1, 9-) 4,49 , 2,6, 4,1 Гц, 1, 2-/3/ 4,08 (, 3 Н, 4-ОСН 3) 3,94 (, 6,6 Гц, 1, 5-) 3,93 , 1, 2// 3,67(, 1, 4-) 3,54 (, 1, 2//) 3,38 (, 3, 2-3) 3,27 (, 19,18,8 Гц, 1, 10) 3,04 (, 18,8 Гц, 1, 10-) 3,00 (, 4,5 Гц, 1, 2) 2,60 (, 4 11,4 Гц, 1, /Н/СНОСН 3) 2,6-2,5 (, 3 Н, /Н/СНОСН 3, 22) 2,4-2,3 (, 2, 8-, 3-) 2,15 (, 4 14,7 Гц, 8-Нах) 1,76 (, 2 Н, 2-СН 2) 1,26 (, 6,6 Гц, 3 Н, 5-СН 3). Пример 12. Получение 1,5-дигидрокси-2-метокси-3-окса-пентата Е 5. Озаглавленное соединение было получено в соответствии с процедурой, описанной в примере 8, с использованием в качестве исходного материала 1,5-диоксо-2 метокси-3-окса-пентана 5, который в свою очередь может быть получен в соответствии с методиками (. - , 1962, т. 1, с. 44). ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол, коричневое пятно при 0,24 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой. Пример 13. Получение 1,5-ди-(пара-толуолсульфонил)окси-2-метокси-3-окса-пентана 5. 1,5-Дигидрокси-2-метокси-3 окса-пентан Е 5, полученный в соответствии с процедурой, описанной в примере 12, был переведен в озаглавленное соединение 5, согласно процедуре, описанной в примере 9. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/ацетон 95/5, коричневое пятно при 0,55 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно обработанной (опрысканной) серной кислотой. Пример 14. Получение 1,5-дийодо-2-метокси-3-окса-пентана С 5. 1,5-Ди(пара-толуолсульфонил)окси-2-метокси-3-оксапентан 5, полученный в соответствии с примером 13, был превращен в дийодопроизводное С 5 в соответствии с процедурой, описанной в примере 10. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид, коричневое пятно при 0,54 после нагревания пластины тонкослойной хроматограммы, предварительно опрысканной серной кислотой. Пример 15. Получение 3-деамино-2-метокси-4-морфолинил-доксорубицина А 5. Озаглавленное соединение было получено путем конденсации гидрохлорида доксорубицина с 1,5-дийодо-2-метокси-3-окса-пентаном С 5, полученным как описано выше в соответствии с процедурой примера 11. ТСХ на Кизельгуре 254 , элюирующий растворитель - метиленхлорид/метанол 19/1, 0,13. Параметры ЯМР-спектра свободного основания (400 МГц 3)13,97 (, 1, 6-ОН) 13,25 (, 1, 11) 8, 03 (, 7,7 Гц, 1, 1-) 7,78 (, 7,6, 7,7 Гц, 1, 2-) 7,39 (, 7,6 Гц, 1, 3-) 5,53 (,3,4 Гц, 1, 1-) 5,29 (, 2,5, 4,1 Гц, 1, 7-) 4,75 (, 2 Н, 14-2) 4,71 (, 1, 9-) 4,46 (,2,6, 4,7 Гц, 1, 2-(3 4,08 (, 3 Н, 4-ОСН 3) 3,93 (, 6,6 Гц, 1, 5-) 3,92 (, 1,2//) 3,70 (, 1, 4-) 3,56 (, 1, 2//) 3,40 (, 3 Н, 2-3) 3,26 (, 19,19,9 Гц, 1, 10-) 3,03 (, 19,9 Гц, 1, 10-) 2,66 (, 2,6, 11,4 Гц, 1, /Н/СНОСН 3) 2,53 (,1, //2) 2,5-2,3 (, 4, //2, /Н/СНОСН 3, 8, 3-) 2,15 (, 4 14,7 Гц, 8 Нах) 1,8-1,7 (, 2 Н, 2-СН 2) 1,36 (, 6,6 Гц, 3 Н, 5-СН 3). Биологическая активность 3-деамино-2 метокси-4-морфолинил доксорубицина А 4 и 3-деамино 2-метокси-4-морфолинил доксорубицина А 5. Эти соединения были исследованы в отдельно взятой экспериментальной системе с целью определения их цитотоксичности и противоопухолевой активности на экспериментальных животных в сравнении с родственным препаратом Доксорубицином. Новые антрациклины оказались более цитотоксичными, чем родственный лекарственный препарат в отношенииидоксорубицин-устойчивых клеточных линий(/) (табл.1) и активныв отношении доксорубицин-устойчивых линий клеток. Первоначальный скринингбыл проведен на мышах 1, пораженных Р 388 Доксорубицинустойчивой лейкемией(388/ 105 клеток/мышь). Лекарство вводили внутривенно в первый день после инокуляции опухоли. Результаты приведены в табл. 2. Оба соединения были активны и более действенны чем Доксорубицин. Соединение А 4 было также проверено на доксорубицин-устойчивых клетках Р 388(табл. 3.) ина мышах (1/105 клеток на мышь). Лечение проводили путем внутривенного введения препарата в первый день после инокуляции опухоли (табл. 4). Наконец, соединение 1-а было изучено на одно 8 3369 1 родной опухоли, такой, как опухоль молочной железы мышей/крыс и карциноме (Мх 1) человека, при пероральном и внутривенном введении препарата (табл. 5 и 6). Таблица 1 Исследование действияв отношениии / устойчивых клеток (4 час. обработки) Соединение ИК 50 нг/мл ИК 50 нг/мл Доксорубицин 48,8 2553 А 4 8,7 31,7 А 5 6,5 40,1 а) С 50 концентрация, ингибирующая рост колонии клеток на 50 . Таблица 2 Действие А 4 и А 5 на Доксорубицин устойчивую Р 388 лейкемиюСоединение) О.Д.Оптимальная доза максимально толерантная доза.) Л/К Среднее время жизни мышей, получавших препарат среднее время жизни мышей в контрольной группе. Таблица 3 Действие А 4 на Доксорубицин чувствительные и доксорубицин устойчивые клетки Р 388 лейкемии) ИК 50 концентрация, ингибирующая выживаемость клеток на 50 . Таблица 4 Действие А 4 на Доксорубицин устойчивые клетки Р 388 лейкемииСоединение Доксорубицин А 4 Действие А 4 на карциному молочной железы мышей/крыс Действие А 4 карциному молочной железы человека (Мх 1)) в/в 7 х 3 введение в/в каждые 7 дней по три раза) п/о 7 х 3 прием каждые 7 дней по три раза. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66. 9