Способ получения замещенных андроста-1,4-диен-3,17-дионов

-. одукт подвергают хроматографии на цд. ликагеле, используя смесь гексан/Изобретение относится к способу получения новых замещенных андростангде К 4 т водород или СтС алкил, 4 Предлагаемые соединения проявляют сильное ингибирующее действие на 201 ффективиостью действия в вином организме благодаря своей более высокой метаболической стабилъности по срав 25 нению с известным соединениям ана 13-логичной структуры, , П р и м е р 1. 0,50 г 6 метиленендростаденЗ 17 диона и 0,57 г. А дихлорцианобенаоиинона (ДЦХ) подвер- 30 гают дефпегмации в 20 мл безводного диоксана в течение примерно 15-ч, Для того чтобы уделить ДДХ,суспензнюгфильтруют через окись алюминии. Пос-5 ле выпариввния растворителя остаток 35В соответствии с описанной процегл дурой были получеиыТследующие соеди нения. 1 1 Метил 6 метиленандроста 1 Бддиен 3,17 цион, т.пл. 178-180 С.П р и м е р 2. Смесь 6 дметнленандроста-4 ен-3,17 тдиона (О,50 г), двуокиси селена (О,50 г) и трет 6 у 5 типового спирта (200 мл)-нагревают до температуры дефлетмацни в атмос фере азота в течение примерно 30 ч Охлаиденный раствор фильтруют, а затем выпаривают до сухого состояния при пониженном давлении Остаток пе реносят в этил ацетат (100 мл), обграбатывают древесным утлен и промы.вают последовательно водой, раство ром сульфида аммония, холодны 172раствором гидрата аммония, холодной разбавленной хлористоводородной кисалотой. водой, сушат с сульфатом нате рия н.наконец выпаривают до сухогоЫсостояння. неочищенный продукт под- т вергеют хронатографим в соответствии с описанием, приведенным в приере 1, в результате чего получают 0,20 г чистого 6 иетнленандроста 14 днен 3,17 диона температура тпл. 188191 С. . т Следуя той жепроцедуре получалилития меди получают в атмосфере 1830 та при помощи добавления 1,6 М раст вора о простом эфире метил лития в-шлам иодида одновалентной меди в безводном простом эфире при 0 С. Раствор перемешивают при 0 С в течедобавляют 5-аидрост-1-ен-3,17 пнон в безводном тетрагидрофуране и перемешивают еще в течение.30 нмн. Смесь сливают в насьщюнный водный раствор хлорида аммония, затем добавляют бензол и полученную в результате смесь быстро фильтруют черезгиатомр вую землю. Органический слой промы вают водным раствором хлорида аммония, водой, сушат над сульфатом магния и выпаривают до сухого состоявив. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, ислольеуя смесь гексанзтил вцетат 1 О 20, В Реэульт тате чего получают 1 р-метил 5 анд роста 3,17 дНон.В раствор 1 рпметнл 5 Ыандроста 3,17 диона (3,025 г 10 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (100 мл) по каплям при 2025 С при энергичном леремешивани добавляют раствор брома (160 г, 10 мысль) в.ледяной укч сусной кислоте (30 мл), содержащей,одну каплю 472 раствора Нвг. Бром расходуется в течение 20 минПолученный раствор сливают в воду и полученный в результате осадок собирают, тщательно промываютводой н сушат под вакуумом, в резуль тате чего получают 3,82 г (1002) неочищенного 4-бром-1 рметил 5- 1 андроста 3,17 диона. ИК (КВт) 1740 см (3 оксо,17 оксо). . Раствор.неочищеиного соединении брома, полученного в соответствии с описанием, в диметилформаммде0,24 моль), фосфорил хлорида (33 мд,. 0,04 моль) и 1 рметил-андрост 4 ен-7 3,17 диона (0811 г, 2,7 моль) перемешивают при температуре дефлегмацин в течение примерно-7 ч, т.е.до тек пор, пока не исчезнет исход НЫЙ материал. СУСПВНЗИИ дают ВОЗМОЖность охладиться и при энергичном перемешивании по каплям добавляют наЬд сыщенный раствор карбоната натрия до тех пор, пока рН водного слояне станет щелочным (примерно 1 ч). 0 руа нический слой отделнютнейтралнэуют водой 5 и сушат при помощи сульфата натрия После концентрации при пониженном давлении маслянистый остаток подвергают кроматографин на силикаГЕПЕ ИСПОЛЬЗУЯ СМЕСЬ ГЕКСЗН-этил ацетат в качестве элюента. Таким 1 образом получают чистый Зр-метил-64нагревают ДО КНПЕНИЯ И В НПЯЩНЙПОСЛЕ ОХЛДЖДЕНИЯ РЗСТВОР СЛНВЗЮТ Вводу и полученный в результате маслянистый продукт экстрагируют с ис попьзованнем простого эфира. Орга гический слой промывают 104 ным .хроматографии на силикагеле, исполв-1 зуя смесь гексанэтил ацетат 10 З 02, в результате чего получают 2,4 гв третбутаноле. Затем медленно добавляют метил хлорид в третдбута-цбт ноле. Раствор охлаждают, подкислпют концентрированной хлористоводородной кислотой и разбавляют водой. Избыток третбутанола удаляют подйвакуумом Л и водный слой экстрагируют этил д ацетатомч Соединенные экстракты про. мывают водойсушат над сульфатомОстаток-подвергают хроматографии на силикагеле и элюируютсмесью гек санэтилацетат. Эюент выпаривают иостаток кристалливуют из простого эфира, в результате чего получают 4 метиландростд-енЗ,17 дион. . ИК (КВт) 1735 (17 оксо), 1660В качестве альтернативы смесъ. андростден 317 диона, тиофенола, 402 ного водного раствора формаль дегида, триэтиламина и этанола наг ревают до температуры дифлегмацинЛИРУШТ при ПОМОЩИ экстрагирования5 промывают водой н сушат над сульфатом магния. Полученный в результате ОСТЗТОК РЗСТНРЗЮТ С ГЕКСЗНОМ С ТЕМ,чтобы удалить любые побочные продукты конденсациидобразовавшиеся из тиофенолаъаформальдегида.дФенил тиометиландрост-ден 317-диод, Пог лученный таким образом, подвергают десульфуриэации при помощи раствоп рения в ацетоне и добавления в суспензию Никеля Ренея вклпящем ацетоне. Смесь подвергают лефлегмации в течение примерно 5 ч при перемешивании. Горячий раствор фильтруютГи катализатор промывают кипящим зтат нолом и водой. Соединенные фильтры подвергают коицентрнровааию под вакуумом при. этом продукт отделяют в видетвердой массы. В результате рекристаллизации из смеси ацетон(т-океан получают ъ-метипев-дрост-д ен 3,17 дион. Смесъ ацетата натрия (1 г) аб ацеталь формальдегида (30 мл, О,2 д моль), фосфорил хлорида (38 мл,0,04 моль) н 4-метиландростд-ен 3,17-диона (081 г 2,7 ммоль) подт вергают дефлегмацин в течение примерно 7 ч, т.е. до тово момента, пока не прореагируетвесэ исходный матернал.-Суспензии давали возможность окладнтьсн и при энергичном перемеши Двании по каплям добавляют насыеннЫй раствор карбоната натрия до тех пор,пока рн водногослоя не станет щелочным (примерно 1 ч). Органический слой отделяют, нейтрализуют водой ,и сушат над сульфатом натрия. В реъзультате тсонцентрирования. при пони женном давлении получают маслянистый остаток, который подвергают хроматог 1 рафнинапсилкагеле-используя-смесьПеремешивают 6 метиленадроста 1,4 диен 43,17-дион, лактозу и половину количества кукурузного крахмала, затем смесь просеивают через сито с размером отверстий 0,5 мм. Кукуруз ный крахмал (ТО г) суспендируют в теплую воду (90 мл) -и полученную в результате пасту используют для гранупированин порошка. Гранулят сушат,просеивают через сито с размером отверстий 1 дд Ем, затем добавляют остаточное количество крахмала тальк и ртеарат магния, все это тщательно перемешивают и прессуют в таблетки.П Р и м е р 6. Капсулы каждая из которых содержит дозу 0,200 г и 20 мг активного материала, получают следующим образом.Эту композицию помещают в желатнч-новые капсулы, состоящие из двух половин каждая капсула содержит дозу в 0,200 г.Ингибирование-аронатазм при помоД щи предлагаемым соединений (испты 7 валось как 1 п уйгго (ароматаза плаценты человека) так и пу 1 уоГЕКСНЗТИЛ ацетата качестве ЗШЕНТЗ. 45 СрЗВННВШПГ С ЗКТНВНОСТЬЮ ХОРОШО ИЗ Таким образом получают чистый 4 метнл 6-метиленандрост 4-ен-3,17 дион с выходом 60. твестных ингибиторов ароматаэы 4-оксиандрост-4 ен 317 диона (д 0 НА) д- тестолопактона и андростат 1,4 диен-3,17-диона. 6 Метнлен-андрост 4 ен 3,17-диона бьш предложен В качестве эффективного промежуточного соединения при получении ценного с терапевтической точки зрения БЫ-метилового стероидного гормона однако какойлнбо терапевтической ценности самого соеди-. нения не было отмечено. А. Ингибирование ароматазы в лабораторным Условиях 1 п уйсго.Через 15 мин инкрбацни реакцию пречдФерментную систему изолировали нэ микросомальной фракции ткани человеческой плаценты в соответствии со р.стандартным приемом. Использовали анелитический метод Томпсона и Синтерн.(с тем, чтобы определть скорость ароматизации, в соответствии с кото-0 рым определяют высвобождение. 3 П 1 О из А-(1 р 2 д-дн) андростен-3,17- 10-диона. Все стадии инкубации осущест влили в водяной бане при встрнхивании и 37 С на воздухев буфере 10 мы фос 1 фата калия, рН 7,5, которы содержал 1 О 0-нм КС 1 1 мм ЭДК и 1 мн дитио- 5 трейтопа. - - Экспериментыпроводили в 1 мл объема нниубеции, содержащем 50 нмцентрацим ингибиторов, 100 нМсН АДРВ 20 и 0,05 мг микросомальных протеинов кращали при понощи.добавпенняхлородЦ форма (5 мл). После-центрифУгированин.1 со сиоростью 1500 3 в течение 5 ММн 25 отдельные 7 порции (05 мл) извлекалн из водной фазы с целью определения 1 концентрации-образовавшейся 3 Н 1 ПгВзрослх самок крысы дважды обра-батывали подкожным способом при помо- щи 100 м.е. гонадотропного гормонасыворотки беременных пошедей (ГСБЛ 3-57никовв соответствиис процедурой, . описаннойА.М.Г.Броди н др., ЬегочгЬ 1 аз. Д д Через 3 дня после второй обработнипри помощи ГСБЛ группам по 6 животным 55в каждой давали стоматическин спосотръ бон растворитель (0,52 нетосеп) ил ингибитор в концентраци 30 мг/кг.Животных усыпляли спустя 24 Ч, никеросоны извлекали из яичников и их активность ароматазы определялис использованием приема, аналогичного ТОМУ, что был описан в А. Инкубацию осуществляли в течение 30 мНнв 2 мл объема инкубации, содержащем 0,1 мг микросомальных протеннов, 100 нн 4-(дн) андростенднона.аронатаоы-рассчитывали на основе полученных данных согласно таблице.Новые соединения под кодом д 1 СЕ 2 д 3 Од и РСЕ 25027 являются очень д сипьныиитингибиторамиароматавы. 1 В оральным испытаниях йп чйчор.новыг соединения были очень -эффддд 25-тивньшш, что являлось следствиемгъ но апатического обмена веществ-нто2 ишак определенная в результетеб Тразового приенениявозрастзфщшх .д вдов и измеренная на.седьмой день посчле прииеиения оказаласн преиебрежи. (но иелой. Например, значение Дд 5 РУЕМОЙ аррматазы На 502 иЖ 5 ъ)0 Р Тдля Предлагаемый соединены РСЕф о р м у д 3 - и 3 о б р е т е Н и 1 1. Способ получения замещенныхгде В, иеет указанные значения, с помощью агента дегидрогенизации Й в оргацниеском растворителе ПРИ ТРМ 5 пературе кипения с обратны холодильнном.