Питательная среда для культивирования молочнокислых, пропионовокислых или бифидобактерий

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МОЛОЧНОКИСЛЫХ, ПРОПИОНОВОКИСЛЫХ ИЛИ БИФИДОБАКТЕРИЙ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Найденко Инна Александровна Астапович Наталия Ивановна Новик Галина Ивановна Каврус Михаил Аркадьевич Денисенко Вера Витальевна Самарцев Андрей Анатольевич Рябая Наталья Евгеньевна Сафонова Марина Евгеньевна Цырыбко Михаил Михайлович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт микробиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Питательная среда для культивирования молочнокислых, пропионовокислых или бифидобактерий, содержащая отход производства лейцина Аминобактерин-Л, лактозу, натрий фосфорнокислый однозамещенный и двузамещенный при следующем соотношении компонентов, мас.Аминобактерин-Л лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный вода Изобретение относится к биотехнологии, может быть использовано для производства бактериальных препаратов для животноводства на основе молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий. Известны разные питательные среды для культивирования молочнокислых, бифидо- и пропионовокислых бактерий, такие как , Блаурокка, казеиново-дрожжевая, гидролизатно-молочная и др. 1-3. Наиболее близкой по технической сущности к изобретению является питательная среда на основе гидролизата гороха для наращивания биомассы лактобактерий и бифидобактерий 4. Задачей данного изобретения является разработка малокомпонентной универсальной дешевой питательной среды для культивирования молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий, позволяющей получить высокий титр жизнеспособных клеток бактерий. 9599 1 2007.08.30 Задача решается путем использования питательной среды для культивирования молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий, содержащей в качестве питательной основы Аминобактерин-Л - отход производства лейцина, при следующем соотношении компонентов, мас.Аминобактерин-Л лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный вода Аминобактерин-Л - жидкий отход микробиологического производства аминокислоты лейцина на РУП Гродненский завод медицинских препаратов (ТУ РБ 20129890,001-01-2201) 5. Предлагаемая питательная среда является дешевой и малокомпонентной, поскольку в качестве питательной основы содержит Аминобактерин-Л - отход производства лейцина,взамен дорогостоящих компонентов (пептона, дрожжевого экстракта, солодового экстракта, мясного экстракта и др.). Предлагаемая среда является универсальной, поскольку пригодна для выращивания культур молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий. Изобретение поясняется следующими примерами. Пример 1 При реализации предлагаемого способа используются штаммы молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий, являющиеся собственностью коллекции чистых культур молочнокислых бактерий лаборатории молочнокислых и бифидобактерий Института микробиологии НАН Беларуси, а также депонированные в коллекции культур непатогенных микроорганизмов Института микробиологии НАН Беларуси. Молочнокислые бактерии 1,. 3,-133,-1012 культивируют при 28-30 С в течение 2024 ч в предлагаемой среде с Аминобактерином-Л следующего состава, мас.лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный Аминобактерин-Л вода Пропионовокислые бактерии. 1,. 4 культивируют при 28-30 С в течение 48 ч в предлагаемой питательной среде с АминобактериномЛ следующего состава, мас.Лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный Аминобактерин-Л вода Бифидобактерии 94-БИМ культивируют при 37 С в течение 20-24 ч в предложенной питательной среде с Аминобактерином-Л следующего состава,мас.2 9599 1 2007.08.30 лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный Аминобактерин-Л вода Для сравнения молочнокислые, пропионовокислые и бифидобактерии параллельно культивируют в соответствующих условиях на стандартных для каждой группы микроорганизмов полусинтетических типовых питательных средах, в состав которых входят от 6 до 10 ингредиентов, в том числе дрожжевой экстракт, мясной экстракт, пептон и др. Инокулят молочнокислых и пропионовокислых бактерий вносили в количестве 0,1 об. , бифидобактерии - 5,0 об. . Сравнительные показатели роста и кислотообразования микроорганизмов представлены в табл. 1. Таблица 1 Показатели роста и кислотообразования молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий на разных питательных средах Предлагаемая среда Среда сравнения Штамм рН КОЕ/мл рН КОЕ/мл 1 4,2 4,2 8,6109 8,5109. 3 4,0 4,0 7,5109 1,11010-1012 5,7 5,8 8,0109 8,4109-133 5,8 5,8 7,9108 6,0108 9. 1 3,8 4,1 6,210 4,5109. 4 3,8 4,0 2,9109 2,2109 4,8 4,794-БИМ 9,3109 8,4109 Приведенный пример показывает, что при культивировании разных видов молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий на предлагаемой среде показатели роста(количество жизнеспособных клеток) и кислотообразования у всех штаммов были не ниже, чем при культивировании на оптимальных для роста соответствующих микроорганизмов дорогостоящих средах сравнения. Пример 2 При реализации предлагаемого способа используется штамм молочнокислых бактерий, являющийся собственностью коллекции чистых культур молочнокислых бактерий лаборатории молочнокислых и бифидобактерий Института микробиологии НАН Беларуси. Молочнокислые бактерии 1 культивируют при 28-30 С в течение 20-24 ч в предлагаемой среде с Аминобактерином-Л при концентрации Аминобактерина 2,05,010,0 при следующем соотношении компонентов, мас.лактоза натрий фосфорнокислый однозамещенный натрий фосфорнокислый двузамещенный Аминобактерин-Л вода Сравнительные показатели роста и кислотообразования молочнокислых бактерий представлены в табл. 2. 9599 1 2007.08.30 Таблица 2 Показатели роста и кислотообразования молочнокислых бактерий на предложенной питательной среде с Аминобактерином-Л при разных концентрациях Аминобактерина Содержание Аминобактерина-Л, мас.Штамм 2,0 5,0 10,0 рН КОЕ/мл Н КОЕ/мл Н КОЕ/мл 9 91 4,2 4,2 4,3 2,110 5,010 3,0109 Приведенный пример показывает, что при культивировании молочнокислых бактерий на предлагаемой среде с Аминобактерином-Л в разных концентрациях показатели роста(количество жизнеспособных клеток) и кислотообразования были выше при концентрации Аминобактерина-Л 5,0 . Использование питательных сред с Аминобактерином-Л в концентрациях 2,0 и 10,0 также дает хорошие результаты. Использование предлагаемой питательной среды для культивирования молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий позволяет получить высокий титр молочнокислых, пропионовокислых и бифидобактерий в культуральной жидкости (108-109 КОЕ/мл) при внесении инокулята в количестве 0,1 об.для молочнокислых и пропионовокислых и 5,0 об.для бифидобактерий удешевить среду культивирования за счет исключения из ее состава пептона, дрожжевого экстракта и др., уменьшения в ней количества ингредиентов использовать универсальную среду одного состава для культивирования разных видов молочнокислых, пропионовокислых, бифидобактерий утилизировать отход производства аминокислот на РУП Гродненский завод медицинских препаратов. Источники информации. 1.,.,// . . - 1987. . 51,3. - . 699-705. 3..// . . . ., . - 1939. - . . 144. - . 75-79. 4.2061037 1, 1996. 5. ТУ РБ 20129890, 001-01-2201. Аминобактерин-Л жидкий отход производства лейцина. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4