Способ приготовления питательной среды, ускоряющей рост микобактерий туберкулеза

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ,(54) УСКОРЯЮЩЕИ РОСТ МИКОБАКТЕРИИ ТУБЕРКУЛЕЗА(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет (ВУ)(72) Авторы Кузнецов Олег Евгеньевич Гельберг Илья Самуилович (ВУ)(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университетСпособ приготовления питательной среды, ускоряющей рост микобактерий туберкулеза, заключающийся в том, что среду Левенщтейна-Йенсена перед посевом микобактерий замораживают и оттаивают.Изобретение относится к области медицины, а именно к фтизиатрии, и может использоваться для ускорения роста микобактерий туберкулеза.Существующие методы лабораторной диагностики туберкулеза позволяют получить надежный ответ лищь после длительного инкубирования исследуемого материала. Поиск путей ускорения роста МБТ и привел к созданию изобретения.При просмотре доступных литературных источников нам не удалось обнаружить техническое рещение, которое можно было бы считать прототипом предлагаемого изобретения.Задача изобретения - ускорить процесс роста микобактерий туберкулеза.Поставленная задача рещается путем замораживания и оттаивания среды Левенщтейна-Йенсена перед посевом МБТ.Способ осуществляют следующим образом. Разлитую по пробиркам и свернутую среду Левенщтейна-Йенсена замораживают в морозильной камере бытового холодильника при температуре минус 10-12 С в течение 16-20 часов. Полноту замораживания среды контролируют визуально. Затем среду оттаивают при комнатной температуре в течение 22,5 часов до полного оттаивания, после чего сразу производят посев исследуемого материала.Время замораживания 16-20 часов обосновано тем, что за меньщее время не достигается полное замораживание среды.Для контрольных исследований использовали не подвергавшуюся замораживанию среду Левенщтейна-Йенсена той же серии приготовления.Мокроту, собранную от пациента, до посева обрабатывали трехзамеЩеннь 1 м фосфорнокисль 1 м натрием для разжижения и подавления роста неспецифической микрофлоры. Посев производили одновременно в 2 пробирки с опытной и 2 пробирки с контрольной средой. Контроль посевов осуществляли ежедневно. Массивность роста оценивали по 3-х бальной системе (в плюсах). До 20 колоний МБТ на поверхности среды , выраженный рост МБТ , сплошной рост по поверхности питательной среды . Выращивание МБТ вели в термостате при г 37 градусов до 2,5 месяцев. При отсутствии роста К этому времени посев считали отрицательным, и пробирки удаляли. Посев мокроты от 104 бактериовь 1 делителей производился на предлагаемую среду (опытная пробирка) и в контрольную пробирку. Полученные результаты отражены в табл. 1-3.В табл. 1 показана частота и сроки выделения МБТ на контрольной и опытной (предварительно замороженной и оттаянной) среде Левенштейна-Йенсена.Из таблицы видно, что выделение культуры в срок до 10 дней произошло в 8 случаях(87 ) в опытной группе и не выявлено в контрольной группе (РО,О 5). До 20 дней 73,9 и 57,1 соответственно (РО,О 5). Из 104 посевов рост культуры в опытной группе получили в 92 случаях, в контрольной - в 84. Таким образом, предварительное замораживание и оттаивание среды Левенштейна-Йенсена способствовало более раннему росту МБТ в срок до 20 дней.В табл. 2 отражена скорость появления роста МБТ на контрольной и опытной (предварительно замороженной и оттаянной) среде Левенштейна-Йенсена.Таблица 2 Среда Левенштейна-Йенсена Число исследованных проб Срок появления роста МБТ, сут. Опытная 92 15,52 1 0,63 (8-30 сутки) Контрольная 84 22,7 0,68 (14-43 сутки) В таблице 3 показана массивность роста МБТ в сравниваемых средах. Таблица 3 Среда Левенштейна-Йенсена До 10 дней До 20 дней До 30 дней До 45 дней Опытная Контрольная По данным табл. 3 можно сделать вывод о более интенсивном росте МБТ на опытной среде.Таким образом, предлагаемый способ действительно позволяет ускорить рост МБТ,что приведет к повышению эффективности бактериологической диагностики туберкулеза.Способ прост в исполнении, эффективен и может быть использован в любой фтизиатрической клинике.Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.