Способ повышения секреторной активности клеток паращитовидной железы в культуре ткани

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ СЕКРЕТОРНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК ПАРАЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ В КУЛЬТУРЕ ТКАНИ(71) Заявитель Учреждение образования Полесский государственный университет Национального банка Республики Беларусь(72) Авторы Жук Ольга Николаевна Никандров Виталий Николаевич Полукошко Елена Федоровна(73) Патентообладатель Учреждение образования Полесский государственный университет Национального банка Республики Беларусь(57) Способ повышения секреторной активности клеток паращитовидной железы в культуре ткани, заключающийся в том, что фрагменты паращитовидной железы культивируют сначала в течение шести суток на синтетической питательной средес добавлением 10 телячьей эмбриональной сыворотки, а затем вводят в среду плазминоген до концентрации 10-7-10-5 и культивируют еще в течение суток. Изобретение относится к биологии и медицине, в частности к культивированию клеток паращитовидной железы, пригодных для трансплантации. Заявителю не известен способ культивирования клеток паращитовидной железы, позволяющий нарабатывать пригодные к трансплантации клетки и при этом повысить их секреторную активность, в связи с чем не может быть указан наиболее близкий аналог заявляемого способа. Задачей заявляемого изобретения является создание способа повышения секреторной активности клеток паращитовидной железы, пригодных для транслантации, в культуре ткани. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ повышения секреторной активности клеток паращитовидной железы в культуре ткани, заключающийся в том, что фрагменты паращитовидной железы культивируют сначала в течение шести суток на синтетической питательной средес добавлением 10 телячьей сыворотки, а затем вводят в среду плазминоген в концентрации 10-7-10-5 М и культивируют еще в течение суток. Плазминоген представляет собой гликопротеин молекулярной массой 85 кДа. Наиболее известна его функция в процессе фибринолиза. Плазминоген также обнаружен в нерв 18345 1 2014.06.30 ной ткани, где показан его синтез клетками микроглии и отдельными группами нейронов 1. Добавление его в питательную среду позволяет ускорить развитие культуры нервной ткани 2. Введение плазминогена в концентрации 10-7-10-5 М позволяет повысить секреторную активность культур клеток паращитовидной железы, пригодных для трансплантации. Пример 1. Обработанные 0,25 трипсином фрагменты паращитовидной железы быка размером не более 3 мм 3 располагают на пластиковые чашки Петри и культивируют их в синтетической питательной среде , содержащей 10 телячьей эмбриональной сыворотки, в течение 7 суток. Готовят 5 опытных образцов культуры ткани, в которые вносят раствор плазминогена до конечной концентрации 10-7 М, и 5 контрольных образцов, в которые добавляют эквивалентное количество изотонического раствора хлорида натрия. С помощью электронного микроскопа через 7 суток культивирования во всех опытных и контрольных образцах культуры ткани паращитовидной железы учитывают секреторную активность главных клеток паратироцитов, подсчитывают на полученных при одинаковом увеличении электронограммах количество секреторных гранул (содержат паратгормон) в зоне аппарата Гольджи главных клеток. При этом используют компьютерную версию программы 1000,, версия 1.38. Концентрация секреторных гранул в клетках контрольной культуры равна 74 на 1 клетку, а в присутствии плазминогена (опытная культура) - 163 на 1 клетку, т.е. прирост секреторной активности составляет 128 . Пример 2. Обработанные 0,25 трипсином фрагменты паращитовидной железы быка размером не более 3 мм 3 располагают на пластиковые чашки Петри и культивируют их в синтетической питательной среде , содержащей 10 телячьей эмбриональной сыворотки, в течение 7 суток. Готовят 5 опытных образцов культуры ткани, в которые вносят раствор плазминогена до конечной концентрации 10-5 М, и 5 контрольных образцов, в которые добавляют эквивалентное количество изотонического раствора хлорида натрия. С помощью электронного микроскопа через 7 суток культивирования во всех опытных и контрольных образцах культуры ткани паращитовидной железы учитывают секреторную активность главных клеток паратироцитов, подсчитывают на полученных при одинаковом увеличении электронограммах количество секреторных гранул (содержат паратгормон) в зоне аппарата Гольджи главных клеток. При этом используют компьютерную версию программы 1000,, версия 1.38. Концентрация секреторных гранул в клетках контрольной культуры равна 73 на 1 клетку, а в присутствии плазминогена (опытная культура) - 184 на 1 клетку, т.е. прирост секреторной активности составляет 157 . Таким образом, достигаемый технический результат заключается в том, что способ позволяет повысить секреторную активность (накопление образовавшегося паратгормона в секреторных гранулах главных клеток) культур ткани паращитовидной железы. Данный способ может найти широкое применение в экспериментальной биологии и медицине. Источники информации..,.,.,.,.//. - 1992. - . 308. - . 179-182. 2. Патент РБ 8301, МПК 7 С 125/06, 2003. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 2