Способ получения экстракта зверобоя

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА ЗВЕРОБОЯ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физикоорганической химии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Агабалаев Александр Андреевич Каранкевич Елена Григорьевна Куваева Зоя Ивановна Попова Ольга Павловна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси(56)1385412 , 2002. БАЯНДИНА И.И. и др. Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья. МатериалыВсероссийской конференции. Кн. 2. Барнаул Издательство Алтайского государственного университета, 2009. С. 266-267.1247071 , 2000.101224225 , 2008.2067452 1, 1996.8087 1, 2006.(57) Способ получения экстракта зверобоя, включающий обработку измельченной травы зверобоя экстрагентом и фильтрацию, отличающийся тем, что в качестве экстрагента используют 10-92 -ный водный раствор этанола, содержащий 0,001-1,0 моль/л щелочи. Изобретение относится к медицинской промышленности и касается способа получения экстракта зверобоя. Известен способ получения экстракта зверобоя, содержащий гиперицин, описанный в патенте 1. Согласно данному способу, измельченная трава зверобоя обрабатывается водно-этанольным раствором с содержанием спирта 50 об.до полного смачивания растительного сырья, затем систему нагревают до 60 С и проводят непрерывную экстракцию при нагревании 60 С и давлении около 1,5 бар в течение 16 ч. Полученный экстракт содержит сумму гиперицинов в концентрации 0,25 мг/мл. Экстракт далее высушивают на роторном испарителе. Также известен способ получения экстракта зверобоя горячим щелочным раствором 2. Траву зверобоя двукратно кипятят с водным раствором гидроксида натрия (концентрация 0,01-1 ), затем полученные экстракты объединяют, регулируютраствором соляной кислоты и промывают спиртом до обесцвечивания. Данный метод позволяет минимизировать использование органических растворителей. Недостатком этих способов является невозможность избирательной экстракции гиперицина. В траве зверобоя всегда присутствует гидроксипроизводное гиперицина - псевдогиперицин, содержание которого существенно выше. Псевдогиперицин обладает наряду со сходной физиологической активностью намного большим клиренсом (вымыванием из 17972 1 2014.02.28 организма) по сравнению с гиперицином, что делает затруднительным создание постоянного терапевтического эффекта введением экстракта травы зверобоя, содержащего как гиперицин, так и псевдогиперицин 3. Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является способ получения экстракта зверобоя, описанный в 4. Экстракт получают обработкой измельченной травы зверобоя кипящим водным раствором щелочи с дальнейшей фильтрацией и промывкой растворами спиртов. Недостатком способа прототипа является невозможность избирательной экстракции гиперицина по отношению к псевдогиперицину. Задачей изобретения является разработка способа получения экстракта зверобоя с повышенным отношением содержания гиперицина к псевдогиперицину. Поставленная задача достигается способом, включающим обработку измельченной травы зверобоя экстрагентом и фильтрацию, в котором в качестве экстрагента используют 10-92 -ный водный раствор этанола, содержащий 0,001-1,0 моль/л щелочи. При этом гиперицин переходит в фазу экстрагента без заметного уменьшения достигаемой концентрации, псевдогиперицин переходит в экстракт в значительно меньшем количестве, что демонстрируют хроматограммы, приведенные на фигуре. Анализ экстракта проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с помощью флюоресцентного детектора на хроматографе 1100. Использовали обращенно-фазовую колонку-, 2,1200 мм, зерно 5 мкм. Длина волны экстинкции - 315 нм, эмиссии - 590 нм. Режим изократический, мобильная фаза этилацетат раствор натрия дигидрофосфата (15,6 г/л) метанол 3941160. Скорость потока - 0,6 мл/мин. Инжекционный объем - 5 мкл, температура колонки 20 С. Полученные данные сравнивали со стандартными образцами гиперицина(уд 2,4 мин). Количество гиперицина в образце было рассчитано с использованием внешнего стандарта по калибровке в области концентраций 0,1-6 мг/л (0,9972). Идентификация псевдогиперицина (уд 1,22 мин) была осуществлена по литературным данным 5. Все растворители и стандарт гиперицина были хроматографической чистоты. На фигуре приведены две хроматограммы экстрактов, полученных при экстрагировании в СВЧ печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания экстрагента из 1,000 г измельченной травы зверобоя разными экстрагентами а) 40 мл 70 -го раствора этанола в воде,б) 40 мл 70 -го раствора этанола в воде, содержащего 0,01 моль/л гидроксида натрия. Полученные экстракты отфильтровывали от растительного сырья через бумажный фильтр. Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами. Пример 1. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 110-4 моль . Система перемешивается в течение 90 минут при 20 С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,025 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,55. Пример 2. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 110-4 моль . Система перемешивается в течение 90 мин при 60 С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,028 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,59. Пример 3. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль . Система перемешивается в течение 120 мин при 2 17972 1 2014.02.28 20 С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,006 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 4,78. Пример 4. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 10 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль . Система перемешивается в течение 120 мин при 20 С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,002 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,32. Пример 5. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 92 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль . Система перемешивается в течение 120 мин при 20 С. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,004 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 4,66. Пример 6. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль КОН. Система нагревается в микроволновой печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,002 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,48. Пример 7. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль КОН. Система нагревается в микроволновой печи (частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,003 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 3,66. Пример 8. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 10 мл 70 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль . Система нагревается в микроволновой печи(частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,023 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 0,56. Пример 9. К 1,000 г измельченной травы зверобоя добавляют 50 мл 50 -го водного раствора этанола, содержащего 510-4 моль . Система нагревается в микроволновой печи(частота 2450 МГц, мощность 700 Вт) до закипания. Далее раствор фильтруют через бумажный фильтр. Полученный экстракт содержит 0,006 мг/мл гиперицина, на хроматограмме соотношение площадей пиков гиперицина и псевдогиперицина 26,88. Использование при получении экстракта зверобоя в качестве экстрагента щелочного раствора в водно-этанольной смеси позволяет снизить концентрацию псевдогиперицина в экстракте и увеличить отношение содержания гиперицина к псевдогиперицину. Источники информации 1.3935772, 1991. 2.1247071, 2000. 3..,.,В.,.,. // Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4