Способ лечения бактериального кератита

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО КЕРАТИТА(71) Заявитель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(72) Автор Волкович Татьяна Казимировна(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(57) Способ лечения бактериального кератита, включающий субконъюнктивальное введение пациенту антибактериального, противовоспалительного и репаративного препаратов,отличающийся тем, что дополнительно субконъюнктивально вводят аутосыворотку, активированную зимозаном, по 200 мкл 5 раз через сутки. Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, а именно,к способу лечения бактериального кератита. В настоящее время известно множество подходов в лечении бактериального кератита. Однако большинство имеет однонаправленное действие антибактериальное, противовоспалительное или репаративное. Известен способ лечения бактериального кератита, заключающийся в однократном субконъюнктивальном введении антибактериального препарата 4 раствора гентамицина и последующей инсталляции 3 мг разведенного 10 каплями дистиллированной воды аминопептидного комплекса Биолан (по 2 капли с интервалом 20 мин в течение суток) 1. Недостатками данного способа лечения является то, что микрофлора, определяемая при бактериальных кератитах, развившихся на фоне заболеваний глаз (дистрофия роговицы,глаукома) или соматической патологии (ревматоидный артрит, сахарный диабет), имеющих хроническое, нередко рецидивирующее течение, зачастую бывает умерено устойчива или устойчива к антибактериальному препарату гентамицина. Кроме того, аминопептидный комплекс Биолан необходимо применять с осторожностью у пацинтов с инсулинозависимой формой сахарного диабета под контролем гликемии. Анализ представленных клинических случаев позволяет предположить, что данный метод лечения наиболее эффективен в отношении небольших (1-3 мм) дефектов роговицы. 16684 1 2012.12.30 Задачей изобретения является разработка консервативного способа лечения бактериального кератита, активирующего процессы фагоцитоза, пролиферации и регенерации. Сущность предполагаемого изобретения состоит в том, что применение аутосыворотки, активированной зимозаном стимулирует фагоцитоз, активирует процессы пролиферации и регенерации в поврежденной роговице. Зимозан - сложный полимер полисахаридной природы, выделенный из оболочки дрожжейи применяемый в клинической практике в качестве неспецифического стимулятора реактивности организма. Было установлено, что Зимозан запускает альтернативный путь активации системы комплемента 2, 3. Применение аутологичной сыворотки, активированной Зимозаном, способствует усилению фагоцитоза за счет увеличения числа, размеров макрофагов, внутримакрофагальной бактерицидной активности, цитотоксичности макрофагов, а также ингибированию миграции макрофагов,пролиферации, активации - и -киллеров, -хелперов, развитию реакции гиперчувствительности замедленного типа, увеличению числа антителообразующих клеток, стимуляции эндо- или экзогенного колониеобразования в костном мозге или в селезенке, эффекту кооперации - и -лимфоцитов 2, 3. Способ осуществляется следующим образом. Сыворотку крови получают в первые сутки наблюдения, расфасовывают в эппендорфы по 0,2 мл и хранят при 20 . Аутологичную сыворотку активируют Зимозаном следующим образом. К 50 мг Зимозана добавлялют 2 мл дистиллированной воды и кипятят на водяной бане в течение 30 минут. Далее Зимозан отмывают стерильным физиологическим раствором, центрифугируя 3 раза в режиме 200 по 5 минут. Полученный осадок Зимозана суспензируют в 10 мл физиологического раствора и по 1 мл суспензии Зимозана вносят в стерильные центрифужные пробирки. После чего центрифугируют в режиме 2005 минут, надосадочную жидкость удаляют. Готовая суспензия Зимозана может храниться до 2 недель при температуре 3-4 . Далее к осадку Зимозана добавляют 0,2 мл сыворотки пациента. После ресуспензирования пробирки инкубируют при 37 С в течение 30 минут. За это время в сыворотке активируется комплемент. После инкубации пробирки центрифугируют в режиме 400 в течение 20 минут. Надосадочную жидкость (аутосыворотка,активированная Зимозаном) собирают инсулиновым шприцем, вводят субконъюнктивально по 200 мкл через день в количестве 5 инъекций. Экспериментальное исследование на 95 кроликах по изучению влияния аутосыворотки, активированной Зимозаном, на течение воспалительного процесса при бактериальном кератите показало, что ее применение способствовало очищению язвенно-воспалительной зоны за счет усиления фагоцитоза в результате увеличения числа макрофагов, увеличения их внутримакрофагальной бактерицидной активности и повышению репаративной способности эпителия роговицы. На основании данных экспериментального исследования аутосыворотка, активированная Зимозаном, была применена для лечения 15 пациентов с бактериальным кератитом средней и тяжелой степеней тяжести. Показанием к применению аутосыворотки, активированной Зимозаном, явилось наличие бактериального кератита средней и тяжелой степеней тяжести. Аутосыворотку, активированную Зимозаном, вводили субконъюнктивально по 200 мкл через сутки в количестве 5 инъекций. Лечебную эффективность оценивали по срокам начала и продолжительности эпителизации роговицы, данным импрессионной цитологии сравнивали с показателями группы пациентов, получающих традиционное лечение согласно протоколам диагностики и лечения взрослого населения с болезнями глаза и его придаточного аппарата, утвержденным Министерством здравоохранения Республики Беларусь (таблица). 16684 1 2012.12.30 Сроки начала и продолжительности эпителизации роговицы в исследуемых группах Комплексное лечение с применеСтатистический Традиционное Признак нием аутосыворотки, активиропоказатель лечение ванной зимозаном Медиана 3 6 Начало эпители 25 процентиль 3 3 зации роговицы 75 процентиль 4 7 Медиана 15 19 Продолжительность эпителиза- 25 процентиль 14 15 ции роговицы 75 процентиль 16 28 Из таблицы видно, что в группе пациентов, получавших в своем лечении аутосыворотку, активированную зимозаном, наблюдались более ранняя клинически видимая эпителизация язвенно-воспалительного дефекта (0,05) и сокращение сроков эпителизации роговицы в среднем на 4 суток (0,05) по сравнению с пациентами, получавшими традиционное лечение. Клинические примеры. 1. Пациент К. 1972 г.р. поступил в отделение микрохирургии глаза с диагнозом бактериальный кератит правого глаза, стадия изъязвления. Острота зрения - правильная светопроекция. Клиническая картина выраженная смешанная гиперемия конъюнктивы,выраженный отек роговицы, в параоптической зоне язвенный дефект с подрытыми краями, рыхлым дном, глубиной до 1/3 толщины стромы, влага передней камеры мутная, гипопион 3 мм, радужка отечна, гиперемирована. Анализ клеточных образцов, полученных методом импрессионной цитологии, данных сроков наблюдения выявил выраженные некротические и некробиотические изменения эпителия роговицы с явлениями кариорексиса, кариолизиса и цитолизиса перифокальной и паралимбальной зон. Центр язвенновоспалительной зоны формировал детрит, вокруг него определялась выраженная нейтрофильная инфильтрация, обнаруживались единичные макрофаги. Пациенту была назначена традиционная терапия бактериального кератита (антибактериальные, противовоспалительные и репаративные препараты) и аутосыворотка, активированная зимозаном, по 200 мкл субконъюнктивально через сутки в количестве 5 инъекций. Уже на 3-и сутки наблюдения определялись признаки краевой эпителизации язвенновоспалительного дефекта. Цитологически наблюдалось уменьшение нейтрофильной инфильтрации и рост числа макрофагов в язвенно-воспалительной зоне, увеличение количества фибробластов по направлению к паралимбальной зоне, а также эпителиальных клеток, находящихся в состоянии митоза. На 7-е сутки исследования клинически наблюдалось угасание воспалительной реакции (уменьшение гиперемии конъюнктивы, перикорнеальной инъекции, отека роговицы),уменьшение размеров воспалительного очага, рассасывание гипопиона. Цитологическими проявлениями явились нарастание пролиферативных и репаративных изменений. На 14-е сутки наблюдалось дальнейшее угасание воспалительной реакции и продолжалась эпителизация язвенного дефекта. Цитологическая картина характеризовалась выраженными репаративными изменениями увеличением количества эпителиальных клеток, находящихся в состоянии митоза. На 21-е сутки наблюдалась полная эпителизация роговицы с формированием облаковидного помутнения. Острота зрения при выписке 0,6. 2. Больной Ш. 1956 г.р. поступил в отделение микрохирургии глаза с диагнозом бактериальный кератит, вторичная офтальмогипертензия левого глаза. Острота зрения 0,09,внутриглазное давление 29 мм. Клиническая картина умеренная гиперемия конъюнктивы, умеренный отек роговицы, более выраженный в оптической зоне в оптической зоне рыхлый инфильтрат 34 мм влага передней камеры опалесцирует радужка отечна, выраженная гиперемия ее сосудов. Цитологически центр язвенно-воспалительной зоны фор 3 16684 1 2012.12.30 мировало небольшое количество детрита. Вокруг наблюдалась выраженная нейтрофильная инфильтрация. В перифокальной и паралимбальной зонах наблюдались некротические и некробиотические изменения эпителиальных клеток, встречались единичные фибробласты. Пациенту была назначена традиционная терапия бактериального кератита(антибактериальные, противовоспалительные и репаративные препараты) и аутосыворотка, активированная зимозаном, по 200 мкл субконъюнктивально через сутки в количестве 5 инъекций. Рассасывание инфильтрата и признаки эпителизации роговицы наблюдались уже на 2-е сутки. К 3-им суткам наблюдения нормализовалось внутриглазное давление, влага передней камеры стала прозрачной, радужка стала спокойной. Цитологически данные сроки характеризовались увеличением числа макрофагов и значительным уменьшением нейтрофильной инфильтрации в язвенно-воспалительной зоне. Во всех исследуемых зонах определялись фибробласты, а также единичные эпителиальные клетки в состоянии митоза. На 11-е сутки наблюдалась полная эпителизация роговицы с прозрачным заживлением. Таким образом, полученные в эксперименте и клинике результаты свидетельствуют о том, что применение аутосыворотки, активированной Зимозаном, в комплексном лечении бактериального кератита способствует подавлению воспалительной реакции за счет усиления фагоцитоза в результате увеличения числа макрофагов, активации пролиферативных процессов за счет увеличения количества фибробластов и эпителиальных клеток,находящихся в состоянии митоза. Применение в клинической практике аутосыворотки, активированной зимозаном, способствует существенному улучшению результатов лечения больных с бактериальным кератитом. Данные исследования свидетельствуют о необходимости применения в комплексном лечении бактериального кератита аутосыворотки, активированной зимозаном, с целью усиления фагоцитоза, активизации пролиферативных и регенераторных процессов в роговице. Источники информации 1. Патент РФ 2189207, МПК 61 9/00, 2002. 2. Басс-Шадхан Х.Ф. Зимозан методы получения. Биохимическая характеристика и перспективы применения. - Рига, 1970. - С. 313. 3. Закенфельд Г.К. Иммунологический механизм действия полисахаридов дрожжевых клеток. - Рига, 1990. - С. 152. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4