Бета-глюканаза Talaromyces emersonii

6. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п. 4 или 5.7. Способ получения полипептида по одному из пп. 1-3, включающий культивирование штамма микроорганизма-хозяина, содержащего полинуклеотид по п. 4 или 5, в обеспечивающих экспрессию полипептида условиях.8. Композиция, обладающая активностью В-глюканазьт, содержащая В-глюканазу и наполнитель или разбавитель, отличающаяся тем, что в качестве З-глюканазы содержит полипептид по п. 1.9. Композиция по п. 8, отличающаяся тем, что дополнительно содержит Целлюлазу,эндоарабиназу, рамногалактуроназу или полигалактуроназу.10. Способ разрушения целлюлозы в растительном материале, отличающийся тем,что растительный материал обрабатывают полипептидом по одному из пп. 1-3 или композицией по п. 8.11. Корм для животных, содержащий ингредиенты, выбранные из белков, углеводов,жиров, витаминов и микроэлементов, отличающийся тем, что дополнительно содержит полипептид по одному из пп. 1-3 в количестве от О, 1 до 100 мг/кг.Данное изобретение относится к новым (Вдглюканазам (и, таким образом,также к целлюлазам) из гриба Та 1 агошусез, в частности Та 1 агошусе етегзопйй, и к ихПРИМСНСНИЮ ДЛЯ рЗСЩСПЛВНИЯ глюкана В ЦСЛЛЮЛОЗС.Состав клеточной стенки растений сложен и изменчив. Полисахариды главным образом выявляют в форме длинных цепей целлюлозы (основного структурного компонента клетоъшой стенки растений), гемицелшолозьх (содержащей различные цепи В-ксилана, такие как ксилоглюканы) и пектина.Бета-глюках (или более точно, (1-3) (14) В-В-глюкан), М.м. от 10 до 14 кда,является компонентом гемицеллюпозы растений (М.м. примерно 700 кда) и состоит из основной цепи остатков глюкопиранозы, соединенных В-14 и 1,3-связями. Другим компонентом является ксилан, который состоит из В-14-связанных остатков ксилозы,необязательно замещенных боковыми цепями, такими как остатки арабинозы и/или глюкуроновой кислоты.Основные различия существуют между однодольными (например злаковые и травы) и двудольными (например клевер, рапс и соя) и между семенами и вегетативными частями растения. однодольные характеризуются наличием арабиноксиланового комплекса в качестве основной цепи гемицеллюлозы, а основная структура гемицеллюлозьт у двудольных представляет собой ксилоглюкановый комплекс. У двудольных обнаружены более высокие концентрации пектина, чем у однодольных. В семенах, как правило, высокое содержание пектиновых веществ, но относительно низкое содержание целлюлозного материала.Ферменты, разрушающие целлюлозу, используют для обработки растительного материала в корме, а также в пищевых добавках, или в качестве корма или пищевой добавки благодаря их способности действовать на основные компоненты клеточной стенки растений.Большинство разрушающих целлюлозу ферментов, имеющихся в промьпнленности, по-видимому, являются глюканазами с относительно низкоймолекулярной массой и средней стабильностью при высоких температурах. Однако дляНСКОТОРЫХ применений желательно ИСПОЛЬЗОВЗТЬ глюканазу С ОТНОСИТСЛЬНО ВЫСОКОЙ термостабильностью. В ТОМ СЛУЧЗС, СОЛИ глюканазу НСООХОДИМО ИСПОЛЬЗОВЗТЬ В качестве ПИЩЕВОЙ добавки ДЛЯ ЖИВОТНЬГХ, ТО ВЫСОКЗЯ ТСрМОСТЗбИЛЬНОСТЬ ПрСДПОЧТИТСЛЬНЗ из-за высокотемпературных УСЛОВИЙ, ПРИМВНЯВМЫХ ВО времягранулирования корма ДЛЯ ЖИВОТНЫХ.В данном изобретении представлены новые В-глюканазы (или целлюлазы),которые способны расщеплять В-В-глюкан (или целлюлозу), такой, который присутствует в растительном материале.В самом широком смысле изобретение относится к В-глюканазам (или целлюлазам) из Та 1 аготусе 5, такого как Та 1 агошусез етегзопйй (гриб). Указанные Вглюканазы могут расщеплять В-В-глюкан или целлюлозу, например они являются 31,4-эндоглюканазами, или обладают активностью ЕС 3.2.1.4.а. оптимум рН ниже 7,0 или 5,4, такой как ниже 5,0, например от 4,4 до 5,2 или от 3,0 до 6,0 или 7,0 илиЬ. оптимум температуры, по меньшей мере, 72 С 75 С или даже 81 С, такой как от 78 С до 85 С или от 8 ЗС до 87 С.Более конкретно данное изобретение относится к (выделенному) полипептиду В-глюканазьт, имеющему(1) аминокислотную последовательность ЗЕО Ш НО 2, 4 или 6 или(й) вариант (й), который способен расщеплять З-В-глюкан или(111) фрагмент (1) или (й), который способен расщеплять В-В-глюкан.Согласно другому аспекту изобретение относится к полинуклеотиду, который представляет собой(а) последовательность нуклеиновой кислоты ЗЕО П) МО 1, 3 или 5, илипоследовательность, кодирующую полипептид согласно изобретению(Ъ) последовательность, которая комплементарна, или которая гибридизуется с(с) фрагмент любой последовательности по п.(а) или (Ь)(е) последовательность, которая является вырожденной в результате свойства генетического кода по отношению к любой из последовательностей, которые определены в пп. с (а) по (а).Изобретение также относится к следующему- вектор (например экспрессирующий), который содержит полинуклеотид согласно изобретению и который может обладать способностью экспрессировать полипептид согласно изобретению- линия клеток или штамм, содержащий вектор согласно изобретению- способ получения полипептида согласно изобретению, причем указанный способ включает в себя поддержание линии клеток или штамма согласно изобретению в условиях, подходящих для достижения экспрессии полипептида, и, при необходимости, выделение полипептида- способ расщепления В-В-глюкана, причем указанный способ включает в себя осуществление контакта материала, содержащего В-В-глюкан, с попипептидом согласно изобретению- способ идентификации соединения, которое модулирует активность В-глтоканазы,причем указанный способ включает в себя осуществление контакта полипептида согласно изобретению с тестируемым соединением в присутствии В-П-глюкана и наблюдение или регистрацию любой модуляции активности- способ лечения субъекта с гиперлипидемией, причем указанный способ включает в себя введение субъекту эффективного количества полипептида согласно изобретению и- применение полипептида в производстве лекарственного средства для лечения илиЗЕО П) ЪЮ 1 представляет собой последовательность ДНК первой 3 глюканазы (СЕА) согласно изобретению из Та 1 агошусез ешегзопйЗЕО П) МО 2 является аминокислотной последовательностью первой Вглюканазьт (СЕА)ЗЕО ПЭ МО 3 является последовательностью ДНК второй В-глюканазы (СЕВ) из того же организмаЗЕО 113 МО 4 является аминокислотной последовательностью второй В глюканазы (СЕВ)