Фармацевтические композиции с антигрибковой активностью, производные дипептида из альфа-аминокислоты или ее производного и циклопентан-бета-аминокислоты или ее производного

61 31/04 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ С АНТИГРИБКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ПРОИЗВОДНЫЕ ДИПЕПТИДА ИЗ АЛЬФААМИНОКИСЛОТЫ ИЛИ ЕЕ ПРОИЗВОДНОГО И ЦИКЛОПЕНТАНБЕТА-АМИНОКИСЛОТЫ ИЛИ ЕЕ ПРОИЗВОДНОГО(72) Авторы Михаэль МАТЦКЕ Ханс-Кристиан МИЛИТЦЕР Йоахим МИТТЕНДОРФ Франц КУНИШ Аксель ШМИДТ Вольфганг ШЕНФЕЛЬД Карль ЦИГЕЛЬБАУЕР(57) 1. Композиция с антигрибковой активностью, содержащая минимум одну циклопентан-бета-аминокислоту и/или ее производное, отличающаяся тем, что в качестве циклопентан-бета-аминокислоты она содержит соединение общей формулы 1 где 1 и 2 вместе означают группуСН 2,6 водород иводород,и дополнительно содержит минимум одну альфа-аминокислоту и/или ее производное общей формулы 3 54 3 гдеозначает линейный или разветвленный С 1-С 8-алкил,4 и 5 - водород,Х - гидроксил,причем альфа-аминокислота и/или ее производное и циклопентан-бета-аминокислота и/или ее производное находятся в молярном соотношении от 11 до 51 в виде физической смеси или их взаимных производных. 6112 1 2. Дипептид, состоящий из остатков альфа-аминокислоты общей формулыили ее производного и циклопентан-бета-аминокислоты общей формулыили ее производного,общей формулы 1 2 где 1 и 2 вместе означают группу СН 2,6 - водород,3 - линейный или разветвленный С 1-С 8-алкил,4 и 5 водород. 3. Фармацевтическая композиция с антигрибковой активностью, которая содержит активное вещество и минимум один нетоксичный фармацевтически инертный носитель, отличающаяся тем, что она в качестве активного вещества содержит минимум один дипептид общей формулыпо п. 2 в эффективном количестве.(56)4302155 1, 1994.2030422 1, 1995. Изобретение относится к композициям с антимикробной активностью, более конкретно к композиции с антигрибковой активностью, а также к новому дипептиду, состоящему из остатков альфа-аминокислоты и/или ее производного и циклопентан-бета-аминокислоты и/или ее производного. Известна фармацевтическая композиция с антимикробной, в частности антигрибковой, активностью, которая в качестве активного вещества содержит циклопентан- и-пентен-бета-аминокислоту (см. выложенную заявку ФРГ 43 02 155, опубл. 1984 г.). Применение известной композиции связано с побочными действиями. Задачей данного изобретения является разработка композиции с противогрибковой активностью, которая при удовлетворительной активности не оказывает побочных действий. Поставленная задача решается предлагаемой композицией с противогрибковой активностью, содержащей минимум одну циклопентан-бета-аминокислоту и/или ее производное общей формулы 1 2 в которой 1 и 2 вместе означают остаток формулы СН 2,6 означает водород,2 6112 1 иозначает водород,и минимум одну альфа-аминокислоту и/или ее производное общей формулы 3 в которой 3 означает линейный или разветвленный алкил, содержащий до 8 атомов углерода,4 и 5 означают атом водорода,иозначает гидроксил,при этом альфа-аминокислота и/или ее производное и циклопентан-бета-аминокислота и/или ее производное находится в молярном соотношении от 11 до 51. Под термином производное понимаются такие соединения, которые являются производными соответствующих соединенийи , обладающими аналогичной активностью, в частности, соответствующие соли. Предпочтительны альфа-аминокислоты общей формулы 3 в которой 3 означает линейный или разветвленный алкил, содержащий до 6 атомов углерода,4 и 5 означают атом водорода, иозначает гидроксил. Особенно предпочтительны альфа-аминокислоты общей формулы 3 в которой 3 означает метил или группу -СН(СН 3)СН 2 СН 3,4 и 5 означают атом водорода, иозначает гидроксил. Примерами подобных альфа-аминокислот являются -изолейцин и -аланин. В качестве примеров циклопентан-бета-аминокислот формулыможно назвать 2 амино-4-метиленциклопентан-1-карбоновую кислоту и 1,2-цис-амино-4-метиленциклопентан-1-карбоновую кислоту. Предпочтительное молярное соотношение альфа-аминокислоты и/или ее производного и циклопентан-бета-аминокислоты и/или ее производного составляет от 11 до 31. Композицию согласно изобретению получают обычным образом путем смешивания отдельных компонентов, предпочтительно в виде тонких порошков. Другим объектом данного изобретения является дипептид, состоящий из альфа-аминокислоты и/или ее производного и циклопентан-бета-аминокислоты и/или ее производного общей формулы 3 в которой 1 и 2 вместе означают остаток формулы СН 2,6 означает водород,3 означает линейный или разветвленный 1-8-алкил,4 и 5 означают водород,который представляет собой активное вещество фармацевтической композиции с антигрибковой активностью, содержащей еще минимум один нетоксичный фармацевтически инертный носитель, которая является дальнейшим объектом изобретения. Дипептид согласно изобретению состоит из остатков циклопентан-бета-аминокислоты вышеуказанной формулыи альфа-аминокислоты вышеуказанной формулы , при этомв формулеив формулеозначают часть ковалентной связи альфа-аминокислоты и циклопентан-бета-аминокислоты. Содержащиеся в композиции согласно изобретению аминокислоты или дипептиды могут представлять собой чистые стереоизомеры или смеси стереоизомеров. Описанные выше альфа-аминокислоты, циклопентан-бета-аминокислоты и состоящие из них дипептиды могут находиться в форме их солей. В общем случае это могут быть соли органических или неорганических оснований или кислот, а также внутренние соли. К таким солям могут относиться преимущественно соли галогеноводородных кислот,таких как хлористоводородная кислота и бромистоводородная кислота, особенно хлористоводородная кислота, а также фосфорная кислота, азотная кислота, серная кислота, моно- и дикарбоновые кислоты и гидроксикарбоновые кислоты, такие как уксусная кислота,малеиновая кислота, малоновая кислота, щавелевая кислота, глюконовая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, салициловая кислота,сорбиновая кислота и молочная кислота, а также сульфокислоты, такие как паратолуолсульфокислота, 1,5-нафталиндисульфокислота или камфарсульфокислота. Физиологически переносимыми солями могут быть также соли металлов и соли аммония соединений согласно изобретению, которые содержат свободные гидроксильные группы. Особенно предпочтительны соли натрия, калия, магния или кальция, а также соли аммония, происходящие от аммиака или от органических аминов, таких как этиламин, диили соотв. триэтиламин, ди- или соотв. триэтаноламин, дициклогексиламин, диметиламиноэтанол, аргинин, лизин, этилендиамин или фенилэтиламин. Содержащиеся в композиции согласно изобретению аминокислоты и дипептиды могут находиться в стереоизомерных формах, например, с прямой и обратной симметрией молекул (энантиомеры), или не обладающих свойствами прямой и обратной симметрии(диастереомеры), преимущественно в виде смеси диастереомеров или как цис- и трансизомеры. В объем изобретения включаются также антиподы, рацематные формы, смеси диастереомеров, а также чистые изомеры. Рацематные формы можно аналогично диастереомерам известным образом разделять на стереомерно единые компоненты. Разделение на стереомерно единые соединения осуществляют, например, путем хроматографического 4 6112 1 разделения рацематов диастереомерных сложных эфиров и амидов или по оптически активным фазам. Кроме того, возможна кристаллизация диастереомерных солей. В объем данного изобретения входят остатки аминокислот, определяемые как остаток(543) в -форме. Дипептиды согласно изобретению можно получать известным способом, согласно которому соединения общей формулы 1 в которой 1 и 2 имеют указанные выше значения,путем взаимодействия с защищенными аминокислотами общей формулы в которой 3 и 4 имеют указанные выше значения,7 означает амино-защитную группу и 8 означает обычную в химии пептидов активирующую защитную группу, предпочтительно остаток сложного эфира имида оксиянтарной кислоты,или 7 и 8 вместе образуют группу сначала переводят в соединения общей формулы 3 7 в которой 1, 2, 3, 4 и 7 имеют указанные выше значения, в среде растворителя и в присутствии основания, и затем отщепляют амино-защитную группу (7), и, при необходимости,разделяют стереоизомеры. При необходимости дипептиды обычными методами переводят в соли. Описанный выше способ можно пояснить, например, следующей схемой Амино-защитные группы (7) в рамках данного изобретения являются обычно применяемыми в химии пептидов амино-защитными группами. К таким защитным группам относятся предпочтительно бензилоксикарбонил, 3,4 диметоксибензилоксикарбонил, 3,5-диметоксибензилоксикарбонил, 2,4-диметоксибензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, 4-нитробензилоксикарбонил, 2-нитробензилоксикарбонил, 2-нитро-4,5-диметоксибензилоксикарбонил, метоксикарбонил, этоксикарбонил, трет.бутоксикарбонил, аллилоксикарбонил, винилоксикарбонил, 3,4,5 триметоксибензилоксикарбонил, фталоил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, 2,2,2-трихлортрет.бутоксикарбонил, ментилоксикарбонил, 4-нитрофеноксикарбонил, флуоренил-9 метоксикарбонил (ФМОК), формил, ацетил, пропионил, пивалоил, 2-хлорацетил, 2 бромацетил, 2,2,2-трифторацетил, 2,2,2-трихлорацетилбензоил, бензил, 4-хлорбензоил, 4 бромбензоил, 4-нитробензоил, фталимидо-группа, изовалероил или бензилоксиметилен, 4 нитробензил, 2,4-динитробензил, 4-нитрофенил или 2-нитрофенилсульфенил. Особенно предпочтительна ФМОК-группа. В качестве активирующих карбонильных остатков (8) пригодны в общем случае аддукты с карбодиимидами, например, ,-диэтил-, ,-диизопропил-, ,-дициклогексилкарбодиимид, -(3-диметиламиноизопропил)этил-карбодиимид-гидрохлорид,-циклогексил(2-морфолиноэтил)-карбодиимид-метопаратолуолсульфонат, или карбонильные соединения, такие как карбонилдиимидазол, или 1,2-оксазолиевые соединения,такие как 2-этил-5-фенил-1,2-оксазолий-3-сульфат или 2-трет.бутил-5-метил-изооксазолий-перхлорат, или ациламино-соединения, такие как 2-этокси-1-этоксикарбонил-1,2 дигидрохинолин, или ангидрид пропанфосфокислоты, или изобутилхлороформат, или бензотриазолилокси-трис(диметиламино)-фосфоний-гексафторфосфат, 1-гидроксибензо 6 6112 1 триазол или сложный эфир имида оксиянтарной кислоты. Далее, можно применять компонент альфа-аминокислоты в виде ангидрида Лейша (7 и 8 в формулеозначают группу Предпочтителен сложный эфир оксиянтарной кислоты. В качестве растворителя пригодны обычные органические растворители, которые не изменяются в условиях реакции. Сюда относятся предпочтительно простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диоксан, тетрагидрофуран, гликольдиметиловый эфир, диметоксиэтан, или углеводороды, такие как бензол, толуол, ксилол, гексан, циклогексан или фракции нефти, или диметилформамид. Точно также можно применять смеси указанных растворителей. Предпочтительны тетрагидрофуран, диэтиловый эфир и диметоксиэтан. Кроме того, можно применять воду или смеси указанных выше растворителей с водой. Кроме того, можно применять, например, карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат или бикарбонат натрия или калия, или органические основания, такие как триалкиламины, например триэтиламин, этилдиизопропиламин, -этилморфолин, -метилпиперидин или -метилморфолин. Предпочтителен -метилморфолин. Вспомогательные вещества и основания берут в количествах от 1,0 моля до 3,0 молей,предпочтительно от 1,0 моля до 1,2 моля, в расчете на 1 моль соединения общей формулы. Реакцию осуществляют при температуре в области от 0 С до 100 С, предпочтительно при температуре от 0 С до 30 С и при нормальном давлении. Реакцию можно проводить как при нормальном давлении, так и под повышенным или пониженным давлением (например 0,5-5 бар), предпочтительно при нормальном давлении. Отщепление амино-защитной группы осуществляют в общем случае по известным методам в кислых или основных условиях, или в условиях восстановления путем каталитического гидрирования, например на / в органическом растворителе, таком как простые эфиры, например тетрагидрофуран или диоксан, или спирты, например метанол, этанол или изопропанол. Гидрирование осуществляют в общем случае при температуре в области от 0 С до 80 С, предпочтительно при температуре от 0 С до 40 С. Гидрируют в общем случае при повышенном давлении от 2 бар до 8 бар, предпочтительно от 3 до 5 бар. Для отщепления амино-защитной группы (7 ФМОК) пригодны основания, такие как, например, пиперидин, морфолин, дициклогексиламин, парадиметил-аминопиридин,диизопропилэтиламин или пиперазин. Предпочтителен пиперидин. Вспомогательные вещества и основания берут в количествах от 1,0 моля до 3,0 молей,предпочтительно от 1,0 моля до 1,2 моля, в расчете на 1 моль соединения общей формулы. Реакцию осуществляют при температуре в области от 0 С до 100 С, предпочтительно при температуре от 0 С до 30 С и при нормальном давлении. Реакцию можно проводить как при нормальном давлении, так и под повышенным или пониженным давлением (например 0,5-5 бар), предпочтительно при нормальном давлении. Соединения общей формулыизвестны. Соединения общей формулычастично известны или их можно получить общеизвестными методами. Описанные выше способы получения даны исключительно для пояснения. Получение заявляемых соединений общих формули , в которыхивместе означают кова 7 6112 1 лентную связь, не ограничивается только этим способом, любая модификация этого способа применима аналогично. Исходным пунктом для создания данного изобретения явилось выяснение следующего механизма. Описанные здесь циклопентан-бета-аминокислоты общей формулыаккумулируются различными видами дрожжей с помощью переносчика аминокислот. Транспортировка бета-аминокислот может подавляться алифатическими аминокислотами, в частности изолейцином, -аланином, -метионином и -валином. Бета-аминокислоты подавляют синтез белков. Это подавление может антагонизироваться одной из алифатических аминокислот, в частности -изолейцином или -аланином. Одновременное введение бетааминокислоты и антагонизирующей натуральной аминокислоты в виде смеси и/или ковалентно связанными в виде дипептида приводит к снижению наблюдающихся у теплокровных побочных действий при одновременном антигрибковом действии. Соединения или композиция согласно изобретению демонстрируют ценный спектр фармакологического действия, который до сих пор нельзя было предсказать. Заявляемые согласно изобретению соединения или композиция из смеси аминокислот общих формулии их кислотно-аддитивные соли обладаютантигрибковым действием. Одновременно их пониженная токсичность обеспечивает улучшенную переносимость. Они обладают широким спектром антигрибкового действия против дерматофитов, таких как трихофитон ( - и), против бластомицетов, таких как,,и против плесневых грибков, таких каки. Перечисление этих микроорганизмов ни в коем случае не представляет собой ограничение микроорганизмов, с которыми борются, оно дается только для пояснения. Заявляемые согласно изобретению соединения и композиция пригодны для лечения дерматомикозов и системных грибковых заболеваний. Испытание на действиеДля испытаний на антигрибковое действиев качестве тест-модели использовали кандидамикоз мышей Самцам мышей линии 1 весом 20 г путем инъекции в хвостовую вену вводили 3105 образующих колонию единиц (ОКЕ) С.на животное. Животные из контрольной партии, которым не вводили лекарственный препарат, погибли полностью через неделю после заражения от генерализированного кандидоза при образовании гранулем на почках. Для испытания на активность препараты, растворенные в 0,2 -ном водном растворе глюкозы-агара, вводили зараженным животным дважды в день орально через желудочный зонд. Дневная доза составляла 225 мг/кг и 250 мг/кг веса, продолжительность лечения составила 5 дней. Процент выживаемости животных, которым вводили препараты, оценивали ежедневно в течение десяти дней после заражения. К этому времени не выжило ни одно животное из тех, кому не вводили препараты. Использовали по 10 животных на каждый препарат и на контрольную группу. Результаты представлены в таблице А. Таблица А ПримерКонтроль 2 2 6112 1 Альтернативно можно также определять активностьна крысах вида Вистар. Им потребовалась бы пониженная дневная доза, указанная в мг/кг веса, чтобы достичь сравнимый результат лечения. Испытания в этом случае проводили следующим образом Самцов крыс вида Вистар в возрасте восемь недель, практически здоровых, весом 200 г заражали 5106 ОКЕв 0,5 -ном фосфатно-солевом буферном растворе путем инъекции в латеральную хвостовую вену. Это приводило к 100 -ной гибели в течение восьми дней. Уже через день после заражения у животных наблюдали кровотечение во внутреннем угле глаза наряду с почками были поражены другие органы, такие как головной мозг, сердце, печень, селезенка, сетчатка и легкие. Испытуемые вещества давали дважды в день через пять дней перорально каждый раз в 1 мл раствора, содержащего 5 глюкозы и 0, 2 агара, начиная со дня заражения. Улучшенная переносимость заявляемых согласно изобретению дипептидов и композиции согласно изобретению была определена следующим образом Крысам вида Вистар вводили ежедневно соответствующие вещества и фиксировали изменение веса. При этом вводили или только бета-аминокислоту, или эквимолярное количество соответствующей смеси, или эквимолярное количество дипептида с альфааминокислотой. После пяти дней лечения живой вес крыс при введении дипептидов или соотв. смесей согласно изобретению оставался одинаковым или слегка повышался, в то время как при употреблении бета-аминокислоты снижался на около 5-10 . Одно или несколько активных соединений могут находиться при необходимости в одном или нескольких указанных выше носителях также и в микрокапсулированном виде. Композиция согласно изобретению может быть представлена предпочтительно в виде таблеток, драже, капсул, пилюль, гранул, свечек, растворов, суспензий и эмульсий, паст,мазей, гелей, кремов, лосьонов, порошков и спреев. Терапевтически активные соединения или соотв. смеси должны находиться в указанных выше фармацевтических препаратах, как правило, в концентрации от около 0,1 до 99,5, предпочтительно от около 0,5 до 95 вес.от общего веса смеси. Охарактеризованные выше фармацевтические препараты могут содержать помимо соединений согласно изобретению также и другие фармацевтически активные вещества. Соединения или препараты можно принимать орально или парентерально. В общем случае как в медицине, так и в ветеринарии оказалось предпочтительным для достижения желаемого результата вводить соединение или соединения согласно изобретению в общем количестве от около 0,5 до около 500, предпочтительно от 5 до 100 мг/кг веса за 24 часа, при необходимости несколькими дозами. Отдельная доза содержит одно или несколько соединений преимущественно в количестве от около 1 до около 80, в частности от 3 до 30 мг/кг веса. В случае лечебных препаратов согласно изобретению обычно речь идет о комплексном препарате для одновременного, раздельного или постадийного во времени применения для лечения болезней. В случае комплексных препаратов для одновременного употребления речь идет об изделии, в котором отдельные компоненты смеси согласно изобретению находятся в виде физической смеси. Здесь можно указать, в частности, таблетки, драже, капсулы, шарики,свечки и ампулы. Также успешно применение таких смесей, как раствор, суспензия или эмульсия. К отдельным компонентам смесей согласно изобретению относятся как альфааминокислоты и/или их производные, далее называемые альфа-аминокислотным компонентом, так и циклопентан-бета-аминокислоты и/или их производные, далее называемые бета-аминокислотным компонентом. В случае комплексных препаратов для раздельного применения речь идет об изделии,в котором отдельные компоненты смеси согласно изобретению находятся пространственно раздельно. Здесь можно указать, в частности, таблетки, драже, капсулы, шарики и свечки, которые соответствуют своему назначению. 9 6112 1 Допустимы также комплексные препараты для постадийного во времени употребления. Такие препараты дают возможность давать отдельные компоненты смесей согласно изобретению в предусмотренной последовательности во времени. При постадийном во времени применении таких комплексных препаратов можно вводить альфа-аминокислотный компонент определенным образом в зависимости от введения бета-аминокислотного компонента. Альфа-аминокислотный компонент можно при этом вводить в такой же или в другой обычной форме употребления, что и бета-аминокислотный компонент, например, можно бета-аминокислотный компонент вводить интравенозно, а альфа-аминокислотный компонент вводить перорально или интравенозно. При постадийном во времени употреблении можно также только часть дозы альфааминокислотного компонента ввести тогда же, когда предписано введение бета-аминокислотного компонента, и остальное количество общей дозы альфа-аминокислотного компонента одной или несколькими дозами вводить в течение определенного периода времени после введения бета-аминокислотного компонента. Ниже приводятся примеры, поясняющие изобретение. Исходные соединения. Пример . К раствору (-)-1,2-цис-2-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновой кислоты (35,1 г,0,198 моля) и бикарбоната натрия (33,36 г, 0,397 моля) в 480 мл воды при комнатной температуре прикапывают раствор сложного эфира -(9-флуоренил-метилоксикарбонил)-изолейцина и имида оксиянтарной кислоты (89,2 г, 0,198 моля) в 600 мл диметоксиэтана. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Затем исходную реакционную смесь подкисляют разбавленной соляной кислотой до рН 2 и несколько раз экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические фазы высушивают над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Продукт кристаллизуют из смеси диэтиловый эфир/петролейный эфир. Выход 70 г (74 от теории). Точка плавления 207 С. 20-24,1 (с 1,15 в хлороформе). 1 Н-ЯМР (250 МГц, 3)0,88 (сим. м, 6 Н) 0,98-1,15 1,40-1,51 1,52-1,80 (3 м,3 Н) 2,40-2,84 (м, 4 Н) 3,12 (сим. м., 1) 4,10-4,48 (м, 4 Н) 4,61 (сим. м, 1) 4,90 (сим. м,2 Н) 5,84 (д, 1) 7,20-7,80 (3 м, 9 Н). 283225(476,6). Пример . 1,2-цис-2-(-(9-флуоренилметилоксикарбонил)аланил)-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновая кислота 10 Указанное выше соединение получают аналогично описанному в примерес использованием (-)-1,2-цис-2-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновой кислоты (2,27 г, 16,1 ммолей), сложного эфира -(9-флуоренил-метилокси-карбонил)аланина и имида оксиянтарной кислоты (7,0 г, 17,2 ммолей) и бикарбоната натрия (1,49 г, 17,7 ммолей). Сырой продукт очищают на хроматографической колонке (толуол/этанол, 91). Выход 5,7 г (81 от теории). 1 Н-ЯМР (500 МГц, 3)1,30 (д, 3 Н) 2,43-2,79 (м, 4 Н) 3,10 (сим. м, 1) 4,12 4,21 4,34 4,50 (4 сим. м, 5 Н) 4,91 (шир. с, 2 Н) 7,39 7,3 7,66 7,79 (4 сим. м, 8 Н). 252625(434,5). Целевые продукты. Пример 1. Раствор соединения из примера 1 (24,0 г, 0,050 моля) в пиперидине (200 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. По окончании реакции пиперидин отгоняют в вакууме. Остаток поглощают водой. После нескольких экстракций диэтиловым эфиром водную фазу концентрируют при добавлении толуола в вакууме. Продукт кристаллизуют из смеси изопропанол/диэтиловый эфир. Выход 8,5 г (67 от теории). Точка плавления 198 С. 2023,9 (с 1,08 в воде). 1 Н-ЯМР (250 МГц, 2)0,70-0,88 (м, 6 Н) 0,91-1,18 1,19-1,43 1,53-1,72 (3 м, 3 Н) 2,23-2,67 (м, 4 Н) 2,88 (сим. м, 1) 3,28 (д, 1) 4,30 (сим. м, 1 Н) 4,85 (сим. м, 2 Н). 132223 (254,3). Пример 2. Указанное выше соединение получают аналогично описанному в примере 1 с использованием соединения из примера(5,7 г, 13,1 ммолей). Продукт очищают на хроматографической колонке, заполненной силикагелем (дихлорметан/метанол, 11) и кристаллизуют из смеси метанол/изопропанол/ацетон. Выход 0,7 г (25 от теории). Точка плавления 218 С а 205,4 (с 0,64 в метаноле). 1 Н-ЯМР (500 МГц. 2)1,49 (д, 3 Н) 2,45 (сим. м, 1) 2,55-2,75 (м, 3 Н) 3,04 (сим. м, 1) 4,01 (кв, 1) 4,49 (сим. м, 1) 5,00 (ушир. д, 2 Н). С 10 Н 162 О 3 (212,3). Пример 3.(-)-(1,2)-2-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновую кислоту (25,0 г, 177 ммолей) и -изолейцин (23,2 г, 177 ммолей) растворяют в воде (250 мл) и этаноле (100 мл) при нагревании до температуры кипения. Затем раствор охлаждают до комнатной температуры и растворитель отгоняют в вакууме при 60 С. Выход 48,2 г (100 от теории). Точка плавления 230 С (разл.). 1 Н-ЯМР (2)0,95 (т, 3 Н) 1,00 (д, 3 Н) 1,18-1,35 1,40-1,56 (2 м, 2 Н) 1,99 (сим. м,1 Н) 2,52-2,67 2,73-2,88 (2 м, 4 Н) 3,09 (сим м, 1) 3,69 (д, 1) 3,88 (сим. м, 1 Н) 5,09(-)-(1,2)-2-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновую кислоту (14,1 г, 100 ммолей) и -изолейцин (26,2 г, 200 ммолей) растирают в тонкий порошок и затем смешивают в виде порошка. Пример 5. Смесь из (-)-(1,2)-2-амино-4-метилен-циклопентан-1-карбоновой кислоты (14,1 г,100 ммолей) и -изолейцина (65,5 г, 500 ммолей) готовят аналогично описанному в примере 4. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.