Производные 7-азаиндола, их применение в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы 4 и способ их получения

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ПРОИЗВОДНЫЕ 7-АЗАИНДОЛА, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ФОСФОДИЭСТЕРАЗЫ 4 И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ(73) Патентообладатель ЭЛБИОН АГ гдеозначает целое число 1 или 2,1 обозначает С 2-С 10-алкенил, одно- или многократно ненасыщенный, неразветвленный или разветвленный С 1-С 10-алкил, неразветвленный или разветвленный, незамещенный или однократно замещенный С 1-С 6-алкокси, нафтилом, пиридинилом, С 3-С 6-циклоалкилом или фенилом, необязательно замещенным С 1-С 6-алкилом, галогеном, С 1-С 6-алкокси, гидроксигруппой или радикалом иодинаковые при условии, что одновременно не означают водород, или разные и означают водород или С 1-С 5-алкил, незамещенный или однократно замещенный группой С 1-С 6-алкил фенил, незамещенный или дважды замещенный -, -, -, С 1-С 6-алкилом или однократно замещенный -СООН или С 1-С 3-алкилом пиридил, незамещенный или дважды замещенный -С или -В 3 , при условии, что, если 1, одновременно не означают 1 - С 1-С 6-алкил,2 -или С 1-С 6-алкил и 3 - пиридил, дважды замещенный -С или -В,или их физиологически совместимые соли. 2. Соединения общей формулы 1 по п. 1, отличающиеся тем, что представляют собой физиологически совместимые соли, полученные посредством нейтрализации оснований неорганическими или органическими кислотами, или посредством нейтрализации кислот неорганическими или органическими основаниями, или посредством кватернизации третичных аминов до четвертичных аммониевых солей. 3. Соединения общей формулы 1 по п. 1 или 2, отличающиеся тем, что представляют собой соединения с асимметрическим атомом углерода в -форме, -форме или в форме, -смесей, или, в случае нескольких асимметрических атомов углерода, в диастереомерных формах. 4. Соединение общей формулы 1 по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что выбрано из группы, включающей амид -(4-пиридилметил)-1-циклопропилметил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-изобутил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-гексил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-циклопропилметил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(4-пиридилметил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридил-4-ил)-1-(4-метоксибензил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(4-пиридилметил)-1-(4-хлорбензил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,морфолид 1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты,амид -(2,6-дихлорфенил)-1-(2-метилпропен-3-ил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты и амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-пиридилметил)-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты. 2 11200 1 2008.10.30 5. Соединение общей формулы 1 по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что оно выбрано из группы, включающей амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(3-метоксибензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид гидрохлорид -(4-пиридил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид гидрохлорид -(4-пиридил)-1-(4-хлорбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-хлорбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-метоксибензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(2,6-дихлорфенил)-1-(4-хлорбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(4-карбоксифенил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(4-этоксикарбонилфенил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид -(3,4-диметоксифенил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты,амид 11200 1 2008.10.30 амид -(1,2,4-4 Н-триазол-3-ил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты. 6. Соединение общей формулы 1 по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что представляет собой амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты. 7. Способ получения соединений общей формулы 1, где 1, по любому из пп. 1-4,заключающийся в том, что 7-азаиндол-3-карбоновую кислоту общей формулы 2 гдеимеет указанные в п. 1 значения,с помощью хлорангидридов карбоновых кислот переводят в соответствующие хлорангидриды 7-азаиндол-3-карбоновой кислоты и подвергают взаимодействию с первичными или вторичными аминами. 8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что в качестве хлорангидридов карбоновых кислот используют тионилхлорид или хлорангидрид щавелевой кислоты. 9. Способ по п. 7 или 8, отличающийся тем, что взаимодействие хлорангидридов 7 азаиндол-3-карбоновых кислот с первичными или вторичными аминами осуществляют в присутствии вспомогательного основания, предпочтительно в присутствии избытка используемого при взаимодействии в качестве реагента третичного амина, в частности пиридина или триэтиламина, или в присутствии неорганических оснований,предпочтительно гидроксидов щелочных металлов или гидридов щелочных металлов. 10. Способ получения соединений общей формулы 1, где 2, по любому из пп. 1-3 или 5, заключающийся в том, что производные 7-азаиндола общей формулы 4 гдеимеет указанные в п. 1 значения,с помощью хлорангидрида щавелевой кислоты переводят в соответствующие хлорангидриды 7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты и подвергают взаимодействию с первичными или вторичными аминами. 11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что взаимодействие хлорангидридов 7 азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты с первичными или вторичными аминами осуществляют в присутствии вспомогательного основания, предпочтительно в присутствии избытка используемого при взаимодействии в качестве реагента третичного амина, в частности пиридина или триэтиламина, или в присутствии неорганических оснований, предпочтительно гидроксидов щелочных металлов или гидридов щелочных металлов. 12. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 в качестве терапевтических биологически активных веществ для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, при которых необходимо подавление высвобожденияиз воспаленных клеток. 13. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 в качестве терапевтических биологически активных веществ для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, при которых необходимо подавление фосфодиэстеразы 4. 14. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 в качестве терапевтических биологически активных веществ для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, которые связаны с действием эозинофилов. 4 11200 1 2008.10.30 15. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 в качестве терапевтических биологически активных веществ для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, которые связаны с действием легочных нейтрофилов. 16. Применение соединений по любому из пп. 1-5 в качестве биологически активных веществ для получения лекарственного средства для лечения и профилактики заболеваний, при которых необходимо ингибирование , в особенности воспаления суставов,артрита, ревматоидного артрита, артритных заболеваний, ревматоидного спондилеза, остеоартрита, остеопороза, сепсиса, септического шока, грамотрицательного сепсиса, токсического синдрома шока, синдрома удушья, астмы, хронических легочных заболеваний,болезней резорбции костей, реакций отторжения трансплантата, аутоиммунных заболеваний, красной волчанки, рассеянного склероза, гломерулонефрита, увеита, инсулинозависимого сахарного диабета, хронической демиелинизации, вирусных заболеваний,вирусных инфекций, паразитарных инфекций, малярии, лейшманиоза, лихорадки, вызванной инфекцией, инфекционной миалгии, СПИДа, кахексии, заболеваний, которые можно лечить ингибированием фосфодиэстеразы 4, астмы, заболеваний, при которых играют роль эозинофилы бронхиальной астмы, аллергического ринита, аллергического конъюнктивита, атопического дерматита, экземы, аллергического ангиита, воспалений,обусловленных эозинофилами эозинофильного фасцита, эозинофильной пневмонии, РЕсиндрома, крапивницы, язвенного колита, болезни Крона, пролиферативных заболеваний кожи, псориаза, кератоза, хронических обструктивных легочных заболеваний, заболеваний, которые можно лечить нейрозащитным действием старческого слабоумия, болезни Альцгеймера, потери памяти, болезни Паркинсона, депрессий, инсульта, интермиттирующей хромоты, болезней простаты доброкачественной гиперплазии простаты, поллакиурии, ноктурии, недержания, колик, колик, вызванных мочевыми камнями, мужских или женских сексуальных дисфункций. 17. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 в качестве бронходилататоров. 18. Применение соединений общей формулы 1 по любому из пп. 1-5 для ингибирования возникновения лекарственной зависимости и уменьшения развития толерантности. 19. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении фосфодиэстеразы 4, содержащая одно или несколько соединений по любому из пп. 1-5 наряду с обычными физиологически приемлемыми носителями и/или разбавителями или вспомогательными веществами. Изобретение касается замещенных 7-азаиндолов общей формулы 1 2 3 способа их получения, фармацевтических композиций, содержащих эти соединения, а также фармацевтического применения этих соединений, являющихся ингибиторами фосфодиэстеразы 4, в качестве биологически активных веществ для лечения заболеваний, которые зависят от подавления активности фосфодиэстеразы 4 в ответственных за иммунитет клетках (например, макрофагах и лимфоцитах) посредством соединений согласно изобретению. 5 11200 1 2008.10.30 Активация рецепторов оболочки клетки посредством передатчика приводит к активации системы повторного сигнала ( -). Аденилатциклаза синтезирует из(аденозин-3,5-монофосфата) и(гуанозин-3,5-монофосфата) активный циклическийили циклический. Они приводят, например, в гладких мышечных клетках к расслаблению или в воспаленных клетках к подавлению высвобождения или синтеза медиатора. Разрушение повторного сигнала сАМР ипроисходит посредством фосфодиэстераз . До сих пор известно 11 семейств ферментов( 1-11), которые различаются своей специфичностью к субстрату (, или обоим) и зависимостью от других субстратов (например, кальмодулина). Эти изоферменты обладают различными функциями в организме и по-разному проявляются в отдельных видах клеток ( ,.. . . 1994, 46 399-405, . . . . 1993, 35 1-7). Посредством подавления различных типов изоферментовэто приводит к накоплению сАМР илив клетках, что может быть использовано в лечебных целях ( ,, ,1993, 6 203-214). В клетках, ответственных за аллергические воспаления (лимфоцитах, тучных клетках,эозинофильных гранулоцитах, макрофагах), преобладающим является ферменттипа 4 (, . Т., В. ..1991, 46 512-523). Подавление 4 посредством пригодных ингибиторов до сих пор рассматривается как важный подход к лечению большого количества заболеваний, обусловленных аллергией ( .,.,К.,1996). Важным свойством ингибиторов фосфодиэстеразы 4 является подавление высвобождения фактора некроза опухолииз воспаленных клеток.является известным провоспалительным цитокином, который влияет на большое число биологических процессов.высвобождается, например, из активированных макрофагов, активированных Т-лимфоцитов, тучных клеток, базофилов, фибробластов, клеток эндотелия и астроцитов в головном мозге. Это само по себе способствует активированию нейтрофилов,эозинофилов, фибробластов и клеток эндотелия, вследствие чего высвобождаются различные медиаторы, разрушающие ткани. В моноцитах, макрофагах и Т-лимфоцитахвызывает повышенное продуцирование следующих провоспалительных цитокинов, как- (фактор, стимулирующий колонию гранулоцитных макрофагов) или интерлейкин-8. Вследствие своего вызывающего воспаление и катаболического действия,играет основную роль в случае многих заболеваний, как воспаления дыхательных путей,воспаления суставов, эндотоксический шок, отторжение тканей, СПИД и другие многочисленные иммунологические заболевания. Таким образом, для лечения таких заболеваний, связанных с , также пригодно ингибирование фосфодиэстеразы 4. Хронические обструктивные заболевания легкихшироко распространены среди населения и имеют также большое экономическое значение. Так, заболевания, вызванные , составляют около 10-15 всех расходов, связанных с заболеваниями в развитых странах, и являются причиной около 25 смертельных случаев в США (.,. 11(7), 431437, 1998), правда, большинству умерших пациентов было более 55 лет ( .-. .-. 20(5), 260-267, 1994). По оценке ВОЗ,в течение ближайших 20 лет будут на третьем месте среди причин смертности. Под клинической картиной хронических обструктивных заболеваний легкихпонимают различные картины болезни хронических бронхитов с симптомами кашля и мокроты, а также прогрессирующее и необратимое ухудшение функции легких (особенно 6 11200 1 2008.10.30 это касается выдоха). Течение заболевания сопровождается приступами и часто осложняется бактериальными инфекциями ( . ., ,. , 113 (4) ., 235-241, 1998). В ходе заболевания функция легких неуклонно сужается, легкое становится все более эмфизематозным, и одышка пациентов становится очевидной. Это заболевание явно причиняет вред качеству жизни пациентов (одышка, малая выносливость) и значительно сокращает продолжительность жизни. Главным фактором риска помимо факторов окружающей среды является курение ( .. .-. 20 (5), 299-302,1994. ., ,. , 113 (4) ., 235-241, 1998), и поэтому мужчины заболевают намного чаще, чем женщины. Однако из-за изменения жизненных привычек и роста числа курильщиц эта картина в будущем изменится. Современная терапия направлена только на смягчение симптомов, не вмешиваясь в причины развития заболевания. Использование длительно действующих бета 2-агонистов(например, сальметерола), возможно, в комбинации с мускариновыми антагонистами (например, ипратропиумом) улучшает функцию легких посредством расширения бронхов и широко применяется ( .,. 11 (7), 431-437, 1998). Большую роль при приступахиграют бактериальные инфекции, которые должны лечиться антибиотиками ( ., , 113 (4) ., 242-248, 1998. .. , 113 (4)., 249-255, 1998). Лечение этого заболевания до сих пор еще неудовлетворительно,особенно с точки зрения постоянного ухудшения функции легких. Новые принципы лечения, атакующие медиаторы воспаления, протеазы или молекулы сцепления, могут быть очень перспективными (,10 (19), 415-423, 1998). Независимо от бактериальных инфекций, усложняющих заболевание, в бронхах находят хроническое воспаление, которое доминирует посредством нейтрофильных гранулоцитов. Для наблюдаемых структурных изменений в дыхательных путях (эмфизема) среди прочих ответственными являются медиаторы и ферменты, высвобождаемые посредством нейтрофильных гранулоцитов. Подавление активности нейтрофильных гранулоцитов, таким образом, является рациональной основой, чтобы воспрепятствовать развитию(ухудшению параметров функции легких) или замедлить его. Важным стимулом для активации гранулоцитов является провоспалительный цитокин(фактор некроза опухоли). Так, известно, чтостимулирует образование кислородных радикалов посредством нейтрофильных гранулоцитов (, Н.Р.А. , .-,, 4, 1744-1747, 1998). Ингибиторы 4 могут очень эффективно подавлять высвобождениеиз большого числа клеток и тем самым подавлять активность нейтрофильных гранулоцитов. Неспецифический ингибиторпентоксифиллин в состоянии подавлять как образование кислородных радикалов, так и фагоцитозную способность нейтрофильных гранулоцитов (, С -, К. , В.., .., 13(2) 99-104, 1997). Уже известны различные ингибиторы 4. Преимущественно при этом речь идет о производных ксантина, аналогах ролипрама или производных нитракуазона (обзор в.-.,.4, . ..1997, 7 989-1003). Ни одно из этих соединений до сих пор не было доведено до клинического использования. Было определенно установлено, что известные ингибиторы 4 также характеризуются различными побочными действиями, как тошнота и рвота, которые до сих пор не могли быть устранены в достаточной мере. Поэтому сущест 7 11200 1 2008.10.30 вует потребность в открытии новых ингибиторов 4 с лучшим терапевтическим спектром действия. Применение 7-азаиндолов для получения новых биологически активных веществ для различного назначения определений до сих пор описано только в относительно малых случаях. В японском патенте 10120681 (., .) заявлены 5- и 7-азаиндолы общей формулы 2 2 1 3 причем 1 обозначает водород или низшие алкильные группы, 2 может обозначать водород, галоген, короткие алкильные группы, циклоалкильные группы, алкилкарбонильные группы или алканоильные группы, 3 обозначает алканоильные группы, защищенные карбоксильные группы, циано-группу или замещенные карбамоильные группы.обозначает низший алкиленовый мостик.обозначает замещенные ароматические или гетероциклы. А 1 и А 2 обозначают один - , а другой - СН. Эти соединения отличаются от соединений согласно изобретению особенно в отношении заместителей 2 и 3, частично 1 и А 2. Описанные соединения заявлены в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы( 5), специфичной . В качестве областей применения называются различные сердечно-сосудистые заболевания, бронхит, астма, ринит, импотенция, диабетические осложнения и глаукома. , , ., .-. . 8 (11), 1974,5-9, описали синтезы различных 3-аминоалкил-4-азаиндолов и 3-аминоалкил-7 азаиндолов. Для 3-(2-аминоэтил)-7-азаиндолов описано депрессивное или антидепрессивное действие. Для 3-аминометил-7-азаиндолов установлено действие, понижающее кровяное давление. с антималярийным действием. В патенте 650223 (.) описан синтез различных 2-(имидазолин-2 ил)-алкил-7-азаиндолов или 3-(имидазолин-2-ил)-алкил-7-азаиндолов из соответствующих 2- или 3-цианоалкил-7-азаиндолов, и для этих соединений указано применение в качестве сосудосуживающих средств. До сих пор действие 7-азаиндолов в качестве ингибиторов 4 полностью неизвестно. Изобретение касается замещенных 7-азаиндолов общей формулы 1 8 гдеможет быть равно 1 или 2, и 1 обозначает-1-С 10-алкил, неразветвленный или разветвленный, в случае необходимости, одноили многократно замещенный группами -ОН, -, -2, 1-6-алкил, -(1-6 алкил)2, 6-14-арил, -(6-14-арил)2, -(1-6-алкил) (6-14-арил), -2, -, -, , -, -, 1-6-алкил, -О-6-14-арил, 1-6-алкил, 6-14-арил, -3, -О 2-16-алкил, -2-6-14-арил, -2-1-6-алкил, -2-6-14-арил, -, 1-5 алкил, с моно-, би- или трициклическими насыщенными или одно- или многократно ненасыщенными карбоциклами с 3-14 членами в кольце, с моно-, би- или трициклическими насыщенными или одно- или многократно ненасыщенными гетероциклами с 5-15 членами в кольце и 1-6 гетероатомами, предпочтительно , О и ,причем 1-6-арильные группы и карбоциклические и гетероциклические заместители, со своей стороны, в случае необходимости одно- или многократно могут быть замещены 4,-2-10-алкенил, одно- или многократно ненасыщенный, неразветвленный или разветвленный, в случае необходимости одно- или многократно замещенный группами -, , -2, 1-6-алкил, -(1-6-алкил)2, 6-14-арил, -(6-14-арил)2, -(16-алкил)(6-14-арил), -2, -, -, -, -, -, 1-6-алкил, 6-14-арил, 16-алкил, 6-14-арил, -3, -2-1-6-алкил, -2-6-14-арил, -2-1-6-алкил,-2-6-14-арил, -, 1-5-алкил, с моно-, би- или трициклическими насыщенными или одно- или многократно ненасыщенными карбоциклами с 3-14 членами в кольце, с моно-, би- или трициклическими насыщенными или одно- или многократно ненасыщенными гетероциклами с 5-15 членами в кольце и 1-6 гетероатомами, предпочтительно , О и ,причем 6-14-арильные группы и карбоциклические и гетероциклические заместители, со своей стороны, в случае необходимости одно- или многократно могут быть замещены 4. 2 и 3 могут быть одинаковыми или разными, причем только один из них может быть водородом. Далее, 2 и 3 могут обозначать-1-5-алкил, в случае необходимости одно- или многократно замещенный группами-, -, -2, 1-6-алкил, -(1-6-алкил)2, -2, -, -, -, -, -, -О-1-6 алкил, 1-6-алкил, -фенил, -пиридил, -фенил, в случае необходимости одно- или многократно замещенный группами -, -, -2, 1-3-алкил, -(1-3-алкил)2, -2,-, -, 1-3-алкил, -, -, -, 1-3-алкил, 1-3-алкил, -пиридил, в случае необходимости одно- или многократно замещенный группами -2, -, -,1-3-алкил, -, -, 1-3-алкил, 1-3-алкил, а также-, -, -, -2, 1-6-алкил, -(1-6-алкил)2, 6-14-арил, -(6-14 арил)2, -(1-6-алкил)(6-14-арил), 1-6-алкил, -2, -, -, 16-алкил, 1-6-алкил, 1-6-алкил, -, -, -, -, 1-6-алкил, 6-14 арил, 1-6-алкил, 6-14-арил, 1-6-алкил, -2-1-6-алкил. В 7-азаиндолах формулы 1 согласно изобретению остаток 1 предпочтительно является 1-10-алкильным остатком. Такой алкильный остаток может быть линейным,разветвленным или циклическим и предпочтительно является линейным. Особенно предпочтительны алкильные остатки с 1 до 6, еще более предпочтительны алкильные остатки с 1 до 4 атомов углерода. В следующей предпочтительной форме выполнения 1 обозначает 2-10, в особенности 2-6 и наиболее предпочтительно -2-4-алкильный остаток. Алкенильный остаток может быть одно- или многократно, например дву- или трехкратно, ненасыщенным. В случае алкенильного остатка речь может идти о неразветвленном, разветвленном или циклическом углеводородном остатке. Особенно предпочтительными являются остатки 1, в которых алкильный или алкенильный остаток одно- или многократно, например двукратно, трехкратно, четырехкратно или пятикратно, замещены. Особенно предпочтителен остаток 1, замещенный 1-алкильным (например, метильным) остатком. Из вышеназванных заместителей для алкильной или алкенильной группы остатка 1 особенно предпочтительными заместителями являются -, -, -, -, -, -1-4 алкоксигруппа. Далее, предпочтительны заместители, в которых, в случае необходимости,имеющийся алкильный остаток содержит 1 до 4 атомов углерода, и, в случае необходимости, имеющийся арильный остаток содержит 6 до 10 атомов углерода. Из карбоциклов предпочтительным является фенильный остаток, в особенности замещенный фенильный остаток, предпочтительно замещенный -, -, -, -, -1-6-алкокси- или гидроксигруппой. Из гетероциклов предпочтительны такие, которые характеризуются по крайней мере одним гетероатомом, выбранным из группы ,или . Особенно предпочтительным у гетероциклов является пиридильный остаток, а также изоксазольный остаток, особенно 3,5-диметилизоксазольный остаток. Примером конденсированных карбоциклических заместителей является нафтильный остаток. Особенно предпочтительно 1 обозначает группу, включающую циклический углеводородный остаток, как, например, циклопропилметил-, линейный углеводород, как, например, н-гексил-, линейный углеводород, замещенный алкоксильным остатком, как,например, 2-метоксиэтил-, разветвленный углеводородный остаток, как, например, изобутил-, ненасыщенный углеводородный остаток, как, например, 2-метилпропен-3-ил-, или углеводородный остаток, содержащий ароматическую группу, которая, в случае необходимости, может быть замещена, как, например, 4-фторбензил-, 3-метоксибензил-, 4-метоксибензил-, 4-хлорбензил-, 4-метилбензил-, 3-гидроксибензил- или 4-гидроксибензил,группу, содержащую гетероароматический углеводородный остаток, как, например,4-пиридилметил- или 3,5-диметилизоксазол-4-метил-, или группу, содержащую конденсированный ароматический углеводород, как, например, 1-нафтилметил. Заместители у атома азота, 2 и 3, в предпочтительной форме выполнения могут представлять собой, в случае необходимости, замещенный 1-5, в особенности 1-3 и особенно предпочтительно 1 (соответственно метильный) алкильный остаток. Один из остатков 2 или/и 3 предпочтительно обозначает остаток, включающий гетероароматический углеводород, как, например, 4-пиридилметил-, причем гетероароматический углеводород может быть замещен предпочтительно галогеном, как, например,10 11200 1 2008.10.30 3,5-дихлор-4-пиридил-. В следующей предпочтительной форме выполнения для остатков 2 или/и 3 речь идет о морфолиноостатках. Далее, предпочтительными являются остатки 2 и 3, включающие ароматический углеводород, предпочтительно замещенный, в особенности галогеном или карбоксигруппой, как, например, 2,6-дихлорфенил-, 4-карбоксифенил-, 4-этоксикарбонилфенил-, 3,4-диметоксифенил-. Далее, как 2, так и 3 предпочтительно обозначают метоксиэтил-. В следующей предпочтительной форме выполнения 2 или 3 обозначает остаток или вместе группа Далее изобретение касается физиологически совместимых солей соединений согласно формуле 1. Физиологически совместимые соли получают обычным способом посредством нейтрализации оснований неорганическими или органическими кислотами или посредством нейтрализации кислот неорганическими или органическими основаниями. В качестве неорганических кислот имеют в виду, например, соляную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту или бромистоводородную кислоту, в качестве органических кислот,например, карбоновые, сульфо- или сульфоновые кислоты, также как уксусная кислота,винная кислота, молочная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, дубильная кислота, сукциновая кислота,альгининовая кислота, бензойная кислота, 2-феноксибензойная кислота, 2-ацетоксибензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, салициловая кислота, 3-аминосалициловая кислота, аскорбиновая кислота, эмбоновая кислота, никотиновая кислота, изоникотиновая кислота, щавелевая кислота, аминокислоты, метансульфокислота, этансульфокислота, 2-гидроксиэтансульфокислота, этан 1,2-дисульфокислота, бензолсульфокислота, 4-метилбензолсульфокислота или нафталин 2-сульфокислота. В качестве неорганических оснований имеют в виду, например, гидроксид натрия, гидроксид калия, аммиак, а также в качестве органических оснований амины,однако предпочтительно третичные амины, как триметиламин, триэтиламин, пиридин-диметиланилин, хинолин, изохинолин, -пиколин, -пиколин, -пиколин, хинальдин или пиримидин. Далее, физиологически совместимые соли соединений согласно формуле 1 могли быть получены благодаря тому, что производные, имеющие третичные аминогруппы, переводятся в соответствующие четвертичные аммониевые соли известным образом с помощью кватернизирующего средства. Под кватернизирующим средством имеют в виду, например, алкилгалогениды, как метилиодид, этилбромид и н-пропилхлорид, а также арилалкилгалогениды, как бензилхлорид или 2-фенилэтилбромид. Далее, изобретение касается соединений формулы 1, содержащих асимметрический атом углерода, -формы, -формы и , -смесей, а также, в случае нескольких асимметрических атомов углерода, - диастереомерных форм. Соединения формулы 1, которые содержат асимметрические атомы углерода и, как правило, образуются в виде рацематов,могут быть разделены на оптически активные изомеры известным образом, например, оп 11 11200 1 2008.10.30 тически активной кислотой. Возможно также с самого начала использовать оптически активное исходное вещество, причем в таком случае в качестве конечного продукта получается соответствующее оптически активное или диастереомерное соединение. Для соединений согласно изобретению были обнаружены фармакологически значимые свойства, которые могут быть терапевтически использованы. Соединения согласно изобретению являются ингибиторами высвобождения . Поэтому соединения могут быть использованы для подавления высвобождения . Итак, объектом данного изобретения являются соединения согласно формуле 1 и их соли, а также фармацевтические композиции, содержащие эти соединения или их соли,которые могут быть использованы для лечения заболеваний, при которых необходимо ингибирование . К этим заболеваниям относятся, например, воспаления суставов,включая артрит и ревматоидный артрит, а также другие артритные заболевания, как ревматоидный спондилез и остеоартрит. Следующей возможностью использования является лечение пациентов, которые больны остеопорозом, сепсисом, септическим шоком, грамотрицательным сепсисом, токсическим синдромом шока, синдромом удушья, астмой или другими хроническими легочными заболеваниями, болезнями резорбции костей или реакциями отторжения трансплантата, или другими аутоиммунными заболеваниями, как красная волчанка, рассеянный склероз, гломерулонефрит и увеит, инсулинозависимый сахарный диабет, а также хроническая демиелинизация. Кроме того, соединения согласно изобретению также могут быть использованы для лечения инфекций, как вирусные инфекции и паразитарные инфекции, например, для лечения малярии, лейшманиоза, лихорадки, вызванной инфекцией, инфекционной миалгии,СПИДа и кахексии. Соединения согласно изобретению являются ингибиторами фосфодиэстеразы 4. Поэтому соединения согласно изобретению могут быть использованы для подавления фосфодиэстеразы 4. Итак, объектом этого изобретения являются соединения согласно формуле 1 и их соли, а также фармацевтические препараты, содержащие эти соединения или их соли, которые могут быть использованы для лечения заболеваний, при которых необходимо ингибирование фосфодиэстеразы 4. Так, соединения согласно изобретению могут быть использованы в качестве бронходилататоров и для профилактики астмы. Далее, соединения формулы 1 являются ингибиторами накопления эозинофилов и их активности. Вследствие этого соединения согласно изобретению могут быть использованы также при заболеваниях, при которых играют роль эозинофилы. К этим заболеваниям относятся, например, воспалительные заболевания дыхательных путей, как бронхиальная астма, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, атопический дерматит, экзема, аллергический ангиит, воспаления, которым способствуют эозинофилы, как эозинофильный фасцит, эозинофильная пневмония и синдром (легочная эозинофильная инфильтрация), крапивница, язвенный колит, болезнь Крона и пролиферативные заболевания кожи, как псориаз или кератоз. Объектом данного изобретения является также способность соединений согласно формуле 1 и их солей ингибировать как высвобождение, так и индуцированную(липополисахаридами) легочную нейтрофильную инфильтрацию у крыс. Совокупность этих обнаруженных фармакологически важных свойств обосновывает то, что соединения согласно формуле 1 и их соли, а также фармацевтические препараты, содержащие эти соединения или их соли, могут быть терапевтически использованы для лечения хронически обструктивных легочных заболеваний. Далее, соединения согласно изобретению обладают нейрозащитными свойствами и могут использоваться для лечения заболеваний, при которых требуется нейрозащитное действие. Такими заболеваниями являются, например, старческое слабоумие (болезнь Альцгеймера),потеря памяти, болезнь Паркинсона, депрессии, инсульт и интермиттирующая хромота. 12 11200 1 2008.10.30 Следующей возможностью использования соединений согласно изобретению является профилактика и лечение болезней простаты, как, например, доброкачественная гиперплазия простаты, поллакиурия, ноктурия , а также лечение недержания, колик, вызванных мочевыми камнями и мужских и женских сексуальных дисфункций. В заключение, соединения согласно изобретению также могут быть использованы для ингибирования возникновения лекарственной зависимости при неоднократном приеме анальгетиков, как, например, морфий, а также для уменьшения развития толерантности при неоднократном приеме этих анальгетиков. Для получения лекарственных средств, наряду с обычными вспомогательными веществами, носителями и добавками, используют эффективную дозу соединений согласно изобретению или их солей. Дозировка биологически активных веществ может варьироваться в зависимости от способа приема, возраста, веса пациента, вида и тяжести заболевания, подвергаемого лечению, и подобных факторов. Дневная доза может вводиться в виде разовой дозы, принимаемой однократно, или разделенной на 2 или несколько дневных доз и составляет, как правило, 0,001-100 мг. Под формами введения имеют в виду оральные, парентеральные, внутривенные, подкожные, локальные, ингаляционные и интраназальные композиции. Для применения используют обычные галеновые препаративные готовые формы, как таблетки, драже, капсулы, диспергируемые порошки, грануляты, водные растворы, водные или масляные суспензии, сиропы, соки или капли. Твердые лекарственные формы могут содержать инертные ингредиенты и носители,как, например, карбонат кальция, фосфат кальция, фосфат натрия, лактоза, крахмал, маннит, альгинат, желатина, гуаран, стеарат магния или стеарат алюминия, метилцеллюлоза,тальк, высокодисперсные кремневые кислоты, силиконовое масло, высокомолекулярные жирные кислоты (как стеариновая кислота), желатина, агар-агар или растительные или животные жиры и масла, твердые высокомолекулярные полимеры (как полиэтиленгликоль) оральные препаративные готовые формы могут содержать, при желании, дополнительные придающие вкус вещества и/или подсластители. Жидкие лекарственные формы могут быть стерилизованы и/или, в случае необходимости, содержать вспомогательные вещества, как консерванты, стабилизаторы, смачивающие средства, пенетрационные средства, эмульгаторы, разбрызгивающие средства,агенты растворения, соли, сахара или спирты сахаров для регулирования осмотического давления или для буферности и/или регуляторы вязкости. Такого рода добавками являются, например, тартратный или цитратный буфер, этанол, комплексообразователь (как этилендиамин-тетрауксусная кислота и ее нетоксичные соли). Для регулирования вязкости используют высокомолекулярные полимеры, как, например, жидкий полиэтиленоксид, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, декстран или желатина. Твердыми носителями являются,например, крахмал, лактоза, маннит, метилцеллюлоза, тальк, высокодисперсная кремневая кислота, высокомолекулярные жирные кислоты (как стеариновая кислота), желатина,агар-агар, фосфат кальция, стеарат магния, животные и растительные жиры, твердые высокомолекулярные полимеры, как полиэтиленгликоль. Масляные суспензии для парентерального или локального применения могут быть растительными, синтетическими или полусинтетическими маслами, как, например, жидкие сложные эфиры жирных кислот, при необходимости, с 8 до 22 С-атомами в цепи жирных кислот, например пальмитиновой, лауриновой, тридециловой, маргариновой,стеариновой, арахиновой, миристиновой, бегеновой, пентадециловой, линолевой, элаидиновой, брассидиновой, эруковой или олеиновой кислот, которые этерифицицированы одно- до трехатомными спиртами с 1 до 6 С-атомами, как, например, метанол, этанол,пропанол, бутанол, пентанол или их изомеры, гликоль или глицерин. Подобными эфирами 13 11200 1 2008.10.30 жирных кислот являются, например, коммерчески доступные миглиоль, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, изопропилстеарат, эфир полиэтиленгликоля (ПЭГ) и 6-каприновой кислоты, сложные эфиры каприл/каприновой кислоты и насыщенных жирных спиртов, полиоксиэтиленглицеринтриолеаты, этилолеат, воскоподобные сложные эфиры жирных кислот, как искусственный жир уточной крестцовой железы, изопропиловый эфир кислот кокосового масла, олеиловый эфир олеиновой кислоты, дециловый эфир олеиновой кислоты, этиловый эфир молочной кислоты, дибутилфталат, диизопропиловый эфир адипиновой кислоты, полиоловые эфиры жирных кислот и другие. Также пригодны силиконовые масла различной вязкости или жирные спирты, как изотридециловый спирт,2-октилдодеканол, цетилстеариловый спирт или олеиловый спирт, жирные кислоты, как,например, олеиновая кислота. Далее, могут применяться растительные масла, как касторовое масло, миндальное масло, оливковое масло, кунжутное масло, хлопковое масло,арахисовое масло или соевое масло. Под растворителем, гелеобразователем и агентом растворения имеют в виду воду или смешивающиеся с водой растворители. Пригодными являются, например, спирты, как,например, этанол или изопропиловый спирт, бензиловый спирт, 2-октилдодеканол, полиэтиленгликоли, фталаты, адипаты, пропиленгликоль, глицерин, ди- или трипропиленгликоль, воски, мелилцеллозольв, целлозольв, сложные эфиры, морфолин, диоксан,диметилсульфоксид, диметилформамид, тетрагидрофуран, циклогексанон и т.д. В качестве пленкообразователя могут применяться простые эфиры целлюлозы, которые могут растворяться или набухать как в воде, так и в органических растворителях, как,например, гидроксипропилметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, этилцеллюлоза или растворимые крахмалы. Также вполне возможны смешанные формы между геле- и пленкообразователями. Здесь прежде всего подходят для использования ионные макромолекулы, как, например,натрийкарбоксиметилцеллюлоза, полиакриловая кислота, полиметакриловая кислота и их соли, амилопектинсемигликолят натрия, альгиновая кислота или пропиленгликольальгинат в виде натриевой соли, гуммиарабик, ксантановая резина, гуаран или карраген. В качестве дальнейших вспомогательных средств для препаративных готовых форм могут быть введены глицерин, парафины различной вязкости, триэтаноламин, коллаген,аллантоин, новантисоловая кислота. Также для препаративных готовых форм может быть необходимо применение тензидов, эмульгаторов или смачивающих агентов, как,например, лаурилсульфат натрия, сульфаты простых эфиров жирных спиртов, дилаурилиминодипропионат, полиоксиэтилированное касторовое масло или сорбитанмоноолеат, сорбитан-моностеарат, полисорбаты (например, ), цетиловый спирт,лецитин, глицеринмоностеарат, полиоксиэтиленстеарат, алкилфеноловые эфиры полигликолей, цетилтриметиламмоний хлорид или соли моноэтаноламина и эфира моно-/ диалкилполигликоля и ортофосфорной кислоты. Также в случае необходимости для композиций желаемых препаративных форм могут требоваться стабилизаторы, как монтмориллонит или коллоидные кремневые кислоты для стабилизации эмульсий, или активные вещества для предотвращения разложения, как антиоксиданты, например,токоферол или бутилгидроксианизол, или консерванты, как сложный эфир п-гидроксибензойной кислоты. Препараты для парентерального введения могут находиться в отдельных дозированных единичных формах, как, например, ампулы или флаконы. Преимущественно используют растворы биологически активных веществ, предпочтительно водные растворы и прежде всего изотонические растворы, а также суспензии. Эти формы инъекций могут использоваться в виде готового препарата или приготовлены только непосредственно перед использованием посредством смешивания активного соединения, например лиофилизата,в случае необходимости, с другим твердым носителем, с желаемым растворителем или суспендирующим агентом. 14 11200 1 2008.10.30 Интраназальные препараты могут находиться в виде водных или масляных растворов или в виде водных или масляных суспензий. Они также могут находиться в виде лиофилизатов, которые перед использованием смешиваются с пригодным растворителем или суспендирующим агентом. Получение, фасовка и закупоривание препаратов происходит в общепринятых антимикробных и асептических условиях. Далее, изобретение касается способа получения соединений согласно изобретению. Согласно изобретению, получают соединения общей формулы 1 с приведенными ранее значениями 1, 2, 3 и 1 2 3 самим по себе известным способом посредством хлорангидридов кислот, предпочтительно тионилхлоридом или хлорангидридом щавелевой кислоты, прежде всего переводят в аналогичные хлорангидриды 7-азаиндол-3-карбоновых кислот формулы 3 Из выделенных хлорангидридов 7-азаиндол-3-карбоновых кислот формулы 3 затем посредством взаимодействия с первичным или вторичным амином получаются соединения согласно изобретению общей формулы 1, с приведенными ранее значениями 1, 2,3 и 1. Реакция предпочтительно проходит в присутствии вспомогательного основания. В качестве вспомогательных оснований могут быть использованы избыток амина,использованного при реакции в качестве реагента, третичный амин, предпочтительно пиридин или триэтиламин, а также неорганические основания, предпочтительно гидроксиды щелочных металлов или гидриды щелочных металлов. Согласно изобретению, соединения общей формулы 1 с приведенными ранее значениями 1, 2, 3 и 2 самим по себе известным способом посредством ацилирования хлорангидридом щавелевой кислоты прежде всего переводят в аналогичные хлорангидриды 7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты формулы 5 Из выделенных хлорангидридов 7-азаиндол-3-ил-глиоксиловой кислоты формулы 5 затем посредством взаимодействия с первичным или вторичным амином получают соединения согласно изобретению общей формулы 1 с приведенными ранее значениями 1, 2,3 и 2. Реакция предпочтительно проходит в присутствии вспомогательного основания. В качестве вспомогательных оснований могут быть использованы избыток амина,использованного при взаимодействии в качестве реагента, третичный амин, предпочтительно пиридин или триэтиламин, а также неорганические основания, предпочтительно гидроксиды щелочных металлов или гидриды щелочных металлов. Примеры выполнения. Вариант способа получения соединений согласно изобретению формулы 1, где 1. Пример 1. Амид -(4-пиридилметил)-1-циклопропилметил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты 1,87 г 1-циклопропилметил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты (8,6 ммоль) суспендируют в 15 мл дихлорметана. При охлаждении водой добавляют 1,8 мл хлорангидрида щавелевой кислоты (17,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 8 часов. При этом выкристаллизовывается хлорангидрид 1-циклопропилметил-7-азаиндол-3-карбоновой кислоты. Его выделяют и растворяют в 18 мл тетрагидрофурана (ТГФ). 1,14 г гидрида натрия (60 -ного) суспендируют в 21 мл ТГФ. При перемешивании при температуре около 10 С прикапывают раствор 0,93 г 4-аминометилпиридина(8,6 ммоль) в 21 мл ТГФ. Приблизительно через 15 минут к реакционной смеси прикапывают ранее полученный раствор хлорангидрида 1-циклопропилметил-7-азаиндол-3 карбоновой кислоты. После этого всю смесь кипятят с обратным холодильником 3 часа. После охлаждения к реакционной смеси прибавляют 36 мл этилового эфира уксусной кислоты и 36 мл воды. Фазы разделяют и органическую фазу промывают водой. Растворитель отгоняют и осадок перекристаллизовывают из этанола. Выход 1,3 г (50 от теории). 16 11200 1 2008.10.30 Температура плавления 187-189 С. При использовании данного способа получения может быть получено большое число других соединений формулы 1, где 1, примеры которых приведены далее 2 3 Вариант способа получения соединений согласно изобретению формулы 1, где 2. Пример 12. Амид -(3,5-дихлорпиридин-4-ил)-1-(3-метоксибензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты. 3,57 г 1-(3-метоксибензил)-7-азаиндола (15 ммоль) растворяют в 50 мл трет-бутилметилового эфира. При 0 С при перемешивании прикапывают раствор 1,54 мл хлорангидрида щавелевой кислоты (18 ммоль) в 10 мл трет-бутилметилового эфира. После этого смесь кипятят 2 часа с обратным холодильником. Затем растворитель отгоняют под вакуумом. Образующийся хлорангидрид 1-(3-метоксибензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты получают в виде твердого осадка, который суспендируют в 50 мл тетрагидрофурана (ТГФ). К суспензии 2 г гидрида натрия в 20 мл ТГФ при -5 С прикапывают раствор 2,4 г 4-амино-3,5-дихлорпиридина (15 ммоль) в 30 мл ТГФ. При перемешивании смесь в течение 1 часа термостатируют при 20 С. Затем при температуре около 0 С прикапывают ранее полученную суспензию хлорангидрида 1-(3-метоксибензил)-7-азаиндол-3-илглиоксиловой кислоты. В заключение реакционную смесь кипятят 4 часа с обратным холодильником. Растворитель отгоняют под вакуумом. Осадок смешивают с 50 мл этилового эфира уксусной кислоты и 50 мл воды. Фазы разделяют. Органическую фазу промывают водой. Растворитель отгоняют под вакуумом. Осадок перекристаллизовывают из изопропанола. Выход 3,5 г (51,5 от теории). Температура плавления 165-167 С. При использовании данного способа получения может быть получено большое число других соединений формулы 1, где 2, примеры которых приведены далее 17 4-фторбензил Продолжение таблицы Температура плавления,С Соединения согласно изобретению являются сильными ингибиторами фосфодиэстеразы 4 и высвобождения . Их терапевтический потенциал подтверждается, например, посредством подавления астматической реакции поздней фазы (эозинофилии), а также посредством влияния сосудистой проницаемости, индуцированной аллергеном, у активно сенсибилизированных крыс -. Ингибирование фосфодиэстеразы. Активность 4 определяют при препарировании ферментов из человеческих полиморфноядерных лимфоцитов , активность 2, 3 и 5 сиз человеческих тромбоцитов. Человеческую кровь стабилизировали против коагуляции цитратом. Посредством центрифугирования при 700 в течение 20 минут при комнатной температуре обогащенную тромбоцитами плазму в надосадочной жидкости отделяют от эритроцитов и лейкоцитов. Тромбоциты посредством ультразвука подвергают лизису и используют в анализе 3 и . 5. Для определения активности 2 очищают цитозольную фракцию тромбоцитов с помощью анионообменной колонки посредством градиентаи получают пик 2 для анализа.для определения 4 выделяют посредством последующей седиментации декстрана и последующего градиентного центрифугирования с конволютом с фиколом (-). После двукратной промывки клеток еще содержащиеся эритроциты подвергают лизису посредством добавления 10 мл гипотонического буфера (155 мМ 4, 10 мМ 3, 0,1 мМ ,7,4) в течение 6 минут при 4 С. Пока еще неповрежденныееще 2 раза промываюти подвергают лизису посредством ультразвука. Надосадочная жидкость после часового центрифугирования при 4 С при 48000 содержит цитозольную фракцию 4 и используется для определения 4. Активность фосфодиэстеразы определяют с некоторыми модификациями по методу Томпсона и др. (, , ,. . . . . 1979,10, 69-92). Реакционные смеси содержат 50 мМ - ( 7,4), 5 мМ 2, ингибиторы в варьирующихся концентрациях, соответствующие ферменты, подвергнутые препарирова 19 11200 1 2008.10.30 нию, а также другие компоненты, необходимые для учета отдельных изоферментов (смотри ниже). Посредством добавления субстрата 0,5 мкМ 3 Н-сАМР или 3 Н- (около 6000 /тест) начинают реакцию. Конечный объем составляет 100 мл. Тестируемые вещества используют в качестве маточных растворов в ДМСО. Концентрация ДМСО в реакционной смеси составляет 1 об./об. При этой концентрации ДМСО не оказывает влияния на активность . После начала реакции посредством добавления субстрата образцы инкубируют в течение 30 минут при 37 С. Посредством нагревания тестируемых пробирок в течение 2 минут при 110 С реакцию останавливают. Образцы на следующие 10 минут оставляют на льду. После добавления 30 мкл 5-нуклеотидазы (1 мг/мл, из суспензии змеиного яда) следует инкубация в течение 10 минут при 37 С. Процесс в образцах прекращают на льду, по мере надобности добавляют 400 мкл смеси -вода-этанол (111), хорошо перемешивают и вновь 15 минут инкубируют на льду. Реакционные сосуды центрифугируют 20 минут при 3000. 200 мкл аликвоты надосадочной жидкости переводят непосредственно в сцинтилляционный сосуд. После добавления 3 мл сцинтиллятора измеряют образцы в бета-сцинтилляционном счетчике. Для определения активности 4, 3 и 2 в качестве субстрата используют 3 Н-сАМР,для определения активности 5 используют 3-. Неспецифические активности ферментов, по мере надобности, определяют в присутствии 100 мкМдля 4 и в присутствии 100 мкМдля определения 3 и 5 и вычитают из тестируемых величин. Исходные смеси для инкубации анализируемой 3 содержат 10 мкМ ,чтобы подавить возможные загрязнения посредством 4.2 тестируют посредством анализафирмы . Анализ проводят в присутствии активатора 2(5 мкМ ). Для соединений согласно изобретению относительно ингибирования фосфодиэстеразы 4 было определено значение 50 в области от 10-9 до 10-5 М. Селективность по отношению ктипов 2, 3 и 5 имела фактор 100-10000. Результаты подавления 4 для выбранных примеров выполнения обобщены в следующей таблице. Пример 1 2 12 13 14 15 16 17 18 22 23 24 25 26 27 28 32 37 Подавление высвобожденияиз клеток носовых полипов 20 11200 1 2008.10.30 Последовательность опыта в основном соответствует методу, описанному и. (-1-. . .., 1993, 101,308-310). Исходный материал представлял собой носовые полипы (ОР-материал) пациентов, подвергавшихся хирургическому лечению. Ткань промывали 1640 и затем обрабатывали протеазой (2,0 мг/мл), коллагеназой (1,5 мг/мл), гиалуронидазой (0,75 мг/мл) и зой (0,05 мг/мл) через 2 часа при 37 С(1 г ткани в 4 мл 1640 с ферментом). Полученные клетки, смесь из клеток эпителия,моноцитов, макрофагов, лимфоцитов, фибробластов и гранулоцитов, фильтруют и посредством повторяющегося центрифугирования промывают питательным раствором, пассивно сенсибилизируют добавлением человеческогои суспензию клеток используют в концентрации 2 млн. клеток/мл в 1640 (добавляя антибиотики, 10 плодной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина и 25 мМ ). Эту суспензию распределяют в 6-луночном планшете для клеточных культур (1 мл на лунку). Клетки предварительно инкубируют с испытуемыми веществами в различных конечных концентрациях 30 минут и затем стимулируют добавлением анти- (7,2 мкг/мл) для высвобождения . Максимальное высвобождение происходит в питательной среде приблизительно через 18 часов. В этот период клетки инкубируют при 37 и 52. Питательную среду (надосадочную жидкость) получают посредством центрифугирования (5 мин, 4000 об/мин) и хранят при -70 С вплоть до определения цитокинов. Определениепроисходит в надосадочной жидкости с так называемыми сэндвичевыми структурами(), с которыми могут быть обнаружены концентрации цитокина в области от 301000 пг/мл. Клетки, не стимулированные анти-, едва продуцируют , стимулированные клетки напротив продуцируют большие количества , что, например, может быть уменьшено посредством ингибиторов 4 в зависимости от дозы. Из процентного подавления (высвобождениеклеток, стимулированных анти-,100 ) испытуемыми веществами при различных концентрациях рассчитывают 50 (концентрацию 50 -ного ингибирования). Для соединений согласно изобретению было определено значение 50 в области от 10-7 до 10-5 М. Результаты подавления высвобождениядля выбранных примеров выполнения обобщены в следующей таблице. Пример 14 16 17 27 Подавление поздней фазы эозинофилии через 48 часов после ингаляционного овальбуминового вызова у активно сенсибилизированных крыс -. Подавление легочной эозинофильной инфильтрации с помощью веществ согласно изобретению испытывают на активно сенсибилизированных против овальбуминамужских особях крыс - (200-250 г). Сенсибилизация происходит посредством подкожных инъекций суспензии 10 мкгвместе с 20 мг гидроксида алюминия в качестве вспомогательного средства в 0,5 мл физиологического раствора поваренной соли на животное в 1, 14 и 21 день. Дополнительно к этому животным вводили через одинаковые периоды времени вакцинус разбавлением на животное 0,25 мл внутрибрюшинно. На 28 день эксперимента в открытые плексигласовые боксы объемом 1 л по отдельности помещаются животные, у которых голова и нос закрыты специальны 21 11200 1 2008.10.30 ми устройствами . Животных подвергают воздействию аэрозоля из 1,0 -ной овальбуминовой суспензии (аллергический вызов). Овальбуминовый аэрозоль образуется посредством распылителя (,, ), действующим с помощью сжатого воздуха (0,2 МПа). Время выдержки составляет 1 час, причем контрольные животные опрыскиваются аэрозолем из 0,9 -ного раствора поваренной соли также в течение 1 часа. Через 48 часов аллергеновый вызов приводит к массовому внедрению эозинофильных гранулоцитов в легкие животных. К этому периоду животным вводили сверхдозу наркотического средства этилуретана (1,5 г/кг веса тела внутрибрюшинно) и проводили бронхоальвеолярное промываниес 34 мл балансового раствора Хэнкса. Общее число клеток и некоторое количество эозинофильных гранулоцитов промывной жидкости послезатем определяют с помощью автоматического прибора дифференцирования клеток. Для каждого животного рассчитывают эозинофилы/животное. В каждом тесте имеется 2 контрольные группы (опрыскивание физиологическим раствором поваренной соли и опрыскивание раствором овальбумина). Процентное подавление эозинофилов в группе, подвергнутой лечению веществами,рассчитывают по следующей формуле-)-(-/(-) 100 подавления(контрольная группа, обработанная индифферентной основой лекарственного препарата и 0,9 -ным раствором поваренной соликонтрольная группа, обработанная индифферентной основой лекарственного препарата и 1 -ной суспензией овальбуминаиспытуемая группа, подвергнутая лечению активным веществом и обработанная 1 -ной суспензией овальбумина). Тестируемые вещества применяют внутрибрюшинно или орально в виде суспензии в 10 -ном полиэтиленгликоле 300 и 0,5 -ной 5-гидроксиэтилцеллюлозе за 2 часа перед вводом аллергена. Контрольные группы лечат соответственно форме применения тестируемого вещества индифферентной основой лекарственного препарата. Соединения согласно изобретению подавляют позднюю фазу эозинофилии после внутрибрюшинного введения от 10 мг/кг на 30 до 100 и после орального приема 30 мг/кг на 30 до 75 . Таким образом, соединения согласно изобретению особенно пригодны для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с действием эозинофилов. Результаты подавления эозинофилии для выбранных примеров выполнения обобщены в следующей таблице. Пример 14 16 17 27 11200 1 2008.10.30 Подавление легочной нейтрофильной инфильтрации посредством веществ согласно изобретению испытывают на мужских особях крыс(200-250 г). В день эксперимента в открытые плексигласовые боксы объемом 1 л по отдельности помещаются животные,у которых голова и нос закрыты специальными устройствами. Животных подвергают воздействию аэрозоля из липополисахаридной суспензии (100 мкг /мл 0,1 раствора гидроксиламина) в(провокация ). Аэрозоль /гидроксиламин образуется посредством распылителя (,, ), действующего с помощью сжатого воздуха (0,2 МПа). Время выдержки составляет 40 минут, причем контрольные животные опрыскиваются аэрозолем из 0,1 -ного раствора гидроксиламина втакже в течение 40 минут. Через 6 часов провокацияприводит к максимальному массовому внедрению нейтрофильных гранулоцитов в легкие животных. К этому периоду животным вводят сверхдозу наркотического средства этилуретана (1,5 г/кг веса тела внутрибрюшинно) и проводят бронхоальвеолярное промываниес 34 мл балансового раствора Хэнкса. Общее число клеток и некоторое количество нейтрофильных гранулоцитов промывной жидкостизатем определяют с помощью автоматического прибора дифференцирования клеток (1). Для каждого животного рассчитывают нейтрофилывв млн./животное/мклрегенерированное(мл)/животное. В каждом тесте имеется 2 контрольные группы (опрыскивание 0,1 -ного раствором гидроксиламина ви опрыскивание 100 мкг /мл 0,1 -ного раствора гидроксиламина в ). Процентное подавление нейтрофилов в экспериментальной группе, подвергнутой лечению веществами, рассчитывают по следующей формуле(контрольная группа, обработанная индифферентной основой лекарственного препарата и 0,1 -ным раствором гидроксиламинаконтрольная группа, обработанная индифферентной основой лекарственного препарата и(100 мкг/мл 0,1 раствора гидроксиламина)испытуемая группа, подвергнутая лечению активным веществом и обработанная(100 мкг/мл 0,1 раствора гидроксиламина). Тестируемые вещества применяют орально в виде суспензии в 10 полиэтиленгликоле 300 и 0,5 -ной 5-гидроксиэтилцеллюлозе за 2 часа перед провокацией . Контрольные группы лечат соответственно форме применения тестируемого вещества индифферентной основой лекарственного препарата. Соединения согласно изобретению подавляют нейтрофилию после орального приема 1 мг/кг на 40 до 90 и, таким образом, особенно пригодны для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с действием нейтрофилов. Результаты подавления нейтрофилии для выбранных примеров выполнения обобщены в следующей таблице. Пример 14 22 27 Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 23