Способ получения производного [3Н]-имидазо-[5,1-а]-1,2,3,5-тетразин-4-она

Изобретение относится к способу получения нового производного 3 НИмидазо-51 а 12,3,5 тетразин-доиа общей формулыгде вы представляет собой метнльную 2-хлорэтильиую или 2-бромэтильную группу, а Е представляет собой карбамоильную, метилкарбамоильную или днметилкарбамоильную группу, обладаюшвго противоопухолевой активностью.Цепь изобретения получение новых производны тетраэина, обладающих новым спектром биологических свойств.4(5)-Диаэоимидазол(25-карбоксимнд (500 мг) суспендируют вметилнзовнанате (ЗО мл) и перемешивают в темноте при температуре окружающей среды в течение 21 дня. Затем реакционную смесь разбавляют безводным диэтиловым эфиром и отфильтровывают.. Остаток быстро промывают безводыыметанолом затем безводнм диэтиловым эфиром н высушивают на воздухе,в темноте прндкомнатной температуре с получением 8-карбамоил-3-метнлЗН-имидазо 51-1,2,З,5-тетразин 4-она в виде светло-коричневого микрокристаллического твердого вещества (198 мг) с т.пл. 210 С (с выделением газа и потемнением в диапазоне темератур 16021 ОС).РЕЗКЦИОННУЪО СМЕСЬ ПЕРВМЕШИВЗЮТЖЗ ТЕМноте при комнатной температуре в течение 30 дн. Полученную таким образом суспензию кремового цвета отфильтровывают, остаток промыаютбезводным диэтиловым эфиром и высушивают на воздухе в темноте с получением Вкарбамоил-3-(2-Хпорэтнл)ЗЪП-шндэзо-Б, 1 а-1,2,3,5-тетраэинд-она (д 8 З мг) в виде порошка кремового цвета с т.пл. 158 С (с сильны разложением). Элементный анализ.Повторением указанной методики получают также 8-карбамоил-3-(2 хлорэтнл)33-имидазо-г 5,1-а-1,2,3,3-тетразин-дон в другой полнморф ной форме с т.пл. 1 б 4165 С (С раз ложением). П р н м е р 3. Соединение А.Суспензию 4(5)-диазоимидазол-5(4)карбоксамида (1,37 г) н этилацетате (20 мл) обрабатьшают метилнзоциапатом (7,0 г) и перемешивают в закрыГОМ СОСУДе в темноте при комнатной температуре в течение 3 нед. Полу ченное твердое вещество отфилътровы-. ватт и промывают диэтиловым эфиромс получением 0-карбамонл-3-метип 3 Нт имидазо- Б , 1-821-1, 2, 3, З-тетраэин-д она (1,9 г) ввиде твердогоавещества кремового цвета с т.пл. 212.С (с га зовыделением).Это вещество перекрнсталлиэовыаютиз растворителей трех систем с получением трех различных продуктов, каждый из которых имеет слабое отличиев ИК-спектрах. Вероятно все три продукта были полиморфными формами 8 карбамоил-3-метип-ЭЙ-имндаэо-5,1(1) Бесцветные иглы получены из смеси ацетон - вода (31 по объему), 3419, 3205, 17 зо 1753 н 1678 см, т.пл. 212 С (с газовыделением).(11) Белые микрокристаллы получены из смеси ацетон - вода (13 по объе-А му),9 дд,с 3430, 3200, 1740 и 1675 см,т.пл. 210 С (с газовыделением).(111) Гранулированное твердое веществополучено из горячей воды дс 345 П 3380, 3200, 1742, 1688 и 16 д 0 см, т.пл. 215 С (с газовыделением, потемнение при 210 С).(30 мл) обрабатывают 2-хлорэтилнзоцианатом (3,3 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 дн. Затем реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают с получением 8-карбамоил-3 2-хлорэтил-ЭЙ-имидазо 5 я 112,З,5-тетраэнн-4-она (16 г) в виде 10 бесцветного твердого вещества с,т.пл. 164-16500 (с разложением).- карбоксамида (5 О г) в смеси дихлор метана (158 мл) и Ы-метилпирролнд 2 она (8 З мл) обрабатыают 2-хлорэтнли смесь перемешивают в темноте при комнатной У температуре в течение 14 дн. Затем реакционную смесь разбавляют безводным диэтиловым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровывают и промывают диэтиловым эфиром сполучением Зткарбамоил-3-(2-хлорэтил)- . ЗН-имидазо 5,Г-а-,2,З 5-тетраэин 4-она(б,3 г) В виде твердого вещества пурпурного оттенка с т.пл,1 б 9-Ч 35 165 С (с разложением). Элементнъшд аналнаД - Найдено, 2 С 34,7 Ы 34,5-С 1 1 д 4. СтН 7 С 15 О 1 . Вычислено, С 34,65 Н 2,91 Ы Зд,65 С 1 14,61. р П р и м е р 6. Соединена С. Суспензию 4(5)-диаеонндаэол-5(4)карбоксамида (145 г) В этилацетата(2175 мл) обрабатывают 2-хлорэтилизоцианатом (478,5 мл) и перемешивают при З 0 С в темноте в те чение 2 дн. Затем смесь отфильтъ ровывают с получением 8-карбамоил-3(2-хлорэтил)-3 Н-имидазо 5,Т-аП,235-тетразин-4-она (250 Г) В иде твердого вещества персикового цвета с т.пл. 1 ббС.и Ыметилпирролид-2-она (3,5 мл) обрабатывают метилизоцнанатом (7,0 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 нед. Смесь разбавляют диэтиловым эфиром н получающееся твердое вещество отфильтровыъают с получением 8-карбамоил-3-метил-3 Нимндазо 5,--12,3,5 тетразин-Ьона (2 З 8 г) в виде твердого вещества бледно-пурпурного цвета с т.пл. 20220 ЗС (с разложением). Элементнй анализ,Найдено, Х С 368)Н 29 д П 43,10. сдавив о Вычислено, С 37,11 Н 3,14 Ы 43,3 ь Полиорфная форма 8-кар 5 амоил-3 метил- ЕЗТ-Чпгпчидазо- ЕБ , 1- а -1 2 , 3 5 тетразин- -она получена путем растворения его в ацетонтриле, фильтрованна, концентрирования фильтрата досуха И растирании полученного ост татка с диэтиловым эфиром. Продукт получают в виде твердого вещества ораневой окраски с т.пл. 2 О 0 С(с разложением). Элементный анализ. Найдено, С 37.4 И 3,26 Н 43,5. - р д Спектр ЯМ этого соединения в диметилсульфоксиде-В 6 идентичен спектру указанного бледно-пурпурного твердого вещества, нодего ИК-спектр (квг диск) показал некоторое различие. П-р И м е р 8. Соединение П. Перемешиваемый раствор нитрата,. натрня(О,6 А г) в воде (д 6 мл) охла ждают до 5-1 ОС и при этой температ туре по каплям обрабатывают раствором 5-амина-4-метилкарбамонлимидаэо ла (1 О 0 г) в водном растворе уксус ной кислоты (1 М 1 д 33 Мл) в течение 5 мин. Перемешивание продолжают при5-1 ОС в течение 5 мин, Затем темно красный раствор экстрагируют этилацетатом (4 к 35 мл) и объединенные экстракты высушивают надсульФат 0 Н Маг ня. получающийся раствор содержит сырой 4(5)-диазо-5(4)-метнлкарбамоилимидаэол , который нестабилен н сразу же использованна следующей стадии без дополнтельной очисткиРаствор 4(5)-диазо-5(д)метнлкаР бамонлмидаэола в этилацетата, полученный как описано выше, обрабатывают 2-хлорэтнлизоцианатом (д,3 мл)иие 1 дня. Затем раствор выпаривают при дОС/10 мм рт.ст. и остаток перетирают с петролейнм эфиром(т.кип. 40-БООС) с получением орань женой смолы (д,23 г). Эту смолу обрабатьшают этилацетатом (50 мл) и Ьтфильтровышают фильтрат.вьшаривают при д 0 С/10 мм рт.ст. с получением оранжевой смолы (2,94 г). Эту смолу 10 очищают колоночной хроматографией при среднем давлении на силикагеле,элюируя смесью этилацетата и ацетонитрила (д 1 по объему) с получением 3-(2 дхлорэтил)-Вметилкарбамоил 3 Нт 55 имндазо 51-1,2 З,5 тетравиндона(081 г) в виде твердого вещества пурпурного цвета с т.пл. 120122 Стывают 2-хлорэтилизоцианатом(б,36. и перемешивают при комнатной темпера туре в темноте в течение 2 д ч. Затем раствор выаривают в вакууме при 35 С и н коне при.01 мм рт.ст. для удаления избытка 2 хлорэтилизоцнаиата. остаточную жидкость очищают колоночной хроматографией при среднем давлени на силикагеле, элюируя смесью этилацетатацетонитригг (д 1 по объему) с получением 3-( 2 гхлорэтил)8- 40 диметилкарбамоил 3 Нимидазо 51 1 т 1235 тетраэиндона (О 82 г)в виде бесцветных кристаллов с(4 мл) обрабатывают 2 бромэтилизоциа натом (д,5 мл) и смесь перемешивают в темноте при комнатной температуре в течение 2 дн. Реакционную смесьзатем разбавляют безводным днэтилон вым эфиром и получающееся твердое вещество отфильтровьшают и промывают безводным диэтиловым эфиром с получением.3-(2 бромэтил)-8 карбамоил 3 Н имидазо 5,-а 1,235 тетраэинЦ- она (1,17 г) в видебесцветноЕо тверт(1) однородную смесь 5-нитроимида зол 4 карбоновой кислоты (2,0 г) и пентахлорида фосфора (2,67 г) перемешивают и нагревают на масляной бас не при 2 ОС в течение Е ч. Попучающуюся желтую суспензию выша ривают при 60 С/0,1 мм рт.ст. в течение ЗО мин с получением ,6 диннт роБН, 10 Ндиимидазо (1,5 а 1,5 д)пиразин-5,0 диона (1,9 О г) в виде желтого твердого вещества с т.пл. 249-25106 Сс разложением). дмддс (КВ диск) 750 см ш/е 278 (М 5. (11) Водный раствор диетиламина(25 мас. 60 мл) охлаждают до От 5 С и обрабатывают порциями при перемешивании 1,6-динитрог 5 Н 10 Н-диимидаво (15 а 1, 5 о)пнразин-5, 0 дио ном (6,О г) при той же температуре,получающийся пурпурный раствор пере мешивают в течение 2 ч. Раствор выпаривают при 50 С/10 мм рт.ст. и затем подкисляют обработкой концентрироч ванной соляной кислотой с полученем оранжевого раствора. Этот раствор экс трагируют этилацетатом (7200 мл), объединенные экстракты сушат над сульфатом магния и выпаривают с получением твердого вещества желтого цвета(б 6 г). Это твердое вещество перетн рают с толуолом (50 мл) и затем перекристаллизовывают из этилацетата ссухом днметилформамиде (32 мл) обрабатывают окисът платины (0,32 г)н встряхивают в атмосфере водорода при атмосферном давлении и комнатной температуре. После 3 ч поглощение вот дорода завершено (710 мл). Смесь обрабатывают активированным углем и отфильтровывают через диатомит. Теми иокоричневый фильтрат вьшариваютпри 50 С/0,1 мм рт.ст. и получающийся остаток перетирают с диэтиловьш эфицром с получением сырого 5(д)амино 14(5)диметилкарбамоилимндазола(,75 г) в виде темнокоричневого кристаллического вещества с т.пльты при 3,2 и 7,05, которое еще сот держит примесь колпоидальной плати ны и которое используют в следующей стадии дополнительной очистки..(П) Перемешиаемый раствор нитрата 25 натрии (0,79) в воде (5,7 мл) онла ждают до-5 т 10 С и обрабатьшают, по каплям, при этой температуре раствор ром 5(д)аминод(5)диметилкарбамоилт имидааола (,75 г) в водной уксусной 301 5 мины Получаюшийся раствор экстрагируют этилацетатом (дддо мл), объег диневные экстракты высушивают над сульфатом магния и выпаривают при 3 ОС/10 мм рт.ст. с получением 4(5)диазо 5(д)дметилкарбамоилимит дазола (159 г) в виде ораневых кристаллов с т.пл. 30110 ЗС (с раз ложением). ы д ц 40 Элементный анализ. Найдено, 2 С д 2,6 Н 4,17 ы цьц. СБН,Ы 50(А, 1, С, В, Н) против лимфомы типа ЩЪХ 5, нплантированной на мышах,иллюстрируется табл..50 где К, ИМЕЕТ указанные ЗНЗЧВЪШЯ ВКлетки 109 опухоли вида Ь 1210 имплантировали внутрибрюшинно в мышей ВВР, в 0 день. Мышейобрабатышали в первый день внутрнбрюшинны введет инем соединения С, растворенного в 1 О 2 ном дннетилсульфонсиде в арахисовон масле (О,1 мл), а затем как указано в таБл.2.Клетки 10 опухоли вида Р 388 имплаитировали внутрибрюшнно в мыей ВНЕ, в-О день. Затем мышей обрабатывали соединением С по указанной методике.Ф 0 р М у л а и э о б р е т е н и н Способ полученя производного 3 Нтимидазоч 5,1-а-1,2,35 тетрасоединение общей формулы ъйдыгде Ед имеет указание значении,подвергают взаимодействию при темературе от комнатной до 3 ОС н вотсутъ ствии света с изоцианатом общей