Питательная среда для выращивания микроорганизмов и способ ее получения

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ(71) Заявители Учреждение образования Витебская ордена Знак Почета государственная академия ветеринарной медицины Частное производственное унитарное предприятие Витебская биофабрика(72) Авторы Зайцев Владимир Владимирович Максимович Владимир Васильевич Дремач Геннадий Эдуардович Зайцева Алеся Владимировна Кулешова Ирина Петровна Анасковец Василий Михайлович(73) Патентообладатели Учреждение образования Витебская ордена Знак Почета государственная академия ветеринарной медицины Частное производственное унитарное предприятие Витебская биофабрика(57) 1. Питательная среда для выращивания микроорганизмов, содержащая белковую питательную основу, отличающаяся тем, что в качестве белковой питательной основы она содержит водный и 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизаты мясокостной муки и дополнительно - 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови животных в качестве стимулятора роста при следующем соотношении компонентов, об.водный гидролизат мясокостной муки 75-80 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки 15-20 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови 5. 2. Способ получения питательной среды по п. 1, заключающийся в том, что сухую мясокостную муку гидролизуют водой при массовом соотношении 19 в течение 120 минут при температуре 100-120 с получением водного гидролизата, мясокостную муку и фарш свиных желудков гидролизуют водой с рН 2,0 при массовом соотношении ингредиентов 1,00,65,4 в течение 20 часов при температуре 50 с получением кислотноферментативного гидролизата, сыворотку крови животных, разведенную в соотношении 11 щелочно-перекисным раствором, содержащим 0,04 натрия гидроксида и 0,3 перекиси водорода, инкубируют при температуре 100-120 в течение 40-60 минут с получением щелочно-перекисного гидролизата, после чего полученные компоненты смешивают. 3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что водный гидролизат мясокостной муки, кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови смешивают в соотношении 1631. 4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что водный гидролизат мясокостной муки, кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови смешивают в соотношении 1541.(56)1237707 1, 1986.2103345 С 1, 1998.1586180 1, 1994.1402616 1, 1988.1630314 1, 1995.2126042 1, 1999.990810, 1983.1151577 , 1985.49410 3, 1982.11056345 , 1998. Изобретение относится к области микробиологии, в частности, к производству питательных сред для культивирования микроорганизмов. Известны способы приготовления питательных сред для культивирования бактерий на мясной основе 3. Известны питательные основы для выращивания микроорганизмов, содержащие ферментативный гидролизат крови животных 4 и кислотный гидролизат сгустков крови 2. Включение в состав указанных питательных сред большого количества дорогостоящих компонентов, незначительный выход биомассы делают экономически не выгодным их использование для выращивания микроорганизмов. Наиболее близким техническим решением к предлагаемому изобретению является белковая питательная основа, приготовленная из мясокостной муки, субпродуктов животных и придатков семенников 1. Однако и этот способ не лишен недостатков высокое содержание в питательной среде ингибиторов роста микроорганизмов, недостаточно высокий выход целевого продукта. Задача изобретения - повышение биологической активности питательной среды и выхода целевого продукта. Поставленная цель достигается тем, что приготовленный водный и кислотноферментативный гидролизаты мясокостной муки и щелочно-перекисный гидролизат сыворотки смешивают в необходимых соотношениях. Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что питательная среда для выращивания микроорганизмов в качестве белковой питательной основы содержит водный и 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизаты мясокостной муки и дополнительно - 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови животных в качестве стимулятора роста при следующем соотношении компонентов, об.водный гидролизат мясокостной муки 75-80 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки 15-20 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови 5. Способ получения питательной среды заключается в том, что сухую мясокостную муку гидролизуют водой при массовом соотношении 19 в течение 120 минут при температуре 100-120 С с получением водного гидролизата, мясокостную муку и фарш свиных желудков гидролизуют водой с рН 2,0 при массовом соотношении ингредиентов 1,00,65,4 в течение 20 часов при температуре 50 С с получением кислотно-ферментативного, гидролизата, сыворотку крови животных, разведенную в соотношении 11 щелочно-перекисным раствором, содержащим 0,04 натрия гидроксида и 0,3 перекиси водорода, инкубируют при температуре 100-120 в течение 40-60 минут с получением щелочно-перекисного гидролизата, после чего полученные компоненты смешивают. Водный гидролизат мясокостной муки, кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови смешивают в соотношениях 1631 или 1541. 2 6292 1 Пример 1. Приготовление водного гидролизата мясокостной муки. Сухую мясокостную муку ресуспендируют в воде в соотношении 19, для набухания выдерживают 8-12 часов при температуре 4-8 С, инкубируют смесь при температуре 100-120 в течение 120 минут. Смесь отстаивают в течение 24 часов. Надосадочную жидкость деконтируют, фильтруют и используют для изготовления среды. Осадок мясокостной муки используют для получения кислотно-ферментативного гидролизата. Пример 2. Приготовление кислотно-ферментативного гидролизата мясокостной муки. Сухую мясокостную муку или ее осадок от производства водного гидролизата, фарш свиных желудков со слизистой оболочкой и воду с рН 2,0 инкубируют при температуре 50 в течение 20 минут и соотношении ингредиентов вес.10,65,4. Смесь отстаивают при комнатной температуре в течение 24 часов, надосадочную жидкость деконтируют,фильтруют и раскисляют до рН 7,0-7,4 добавлением 20 -ного раствора натрия гидроксида. Пример 3. Приготовление щелочно-перекисного гидролизата сыворотки крови животных. Сыворотку крови животных смешивают в соотношении 11 с щелочно-перекисным раствором, содержащим 0,4 натрия гидроксида и 0,3 перекиси водорода. Смесь инкубируют при температуре 100-120 в течение 40-60 минут. Гидролизат закисляют 20 ной соляной кислотой, фильтруют и стерилизуют. Пример 4. Питательную среду для выращивания микроорганизмов готовят путем смешивания водного гидролизата мясокостной муки, 5-ного кислотно-ферментативного гидролизата мясокостной муки и 3 -ного щелочно-перекисного гидролизата сыворотки крови при следующих соотношениях компонентов об.- 75205. Выход среды с 1 кг сырья составил 15 литров. Накопление сальмонелл на данной среде составило 2,6 млрд/см 3. Пример 5. При изготовлении питательной среды водный гидролизат мясокостной муки, 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови смешивают при следующих соотношениях компонентов об.- 80155. Выход среды с 1 кг сырья составил 15,4 литра. Накопление сальмонелл было 2,64 млрд/см 3. Пример 6. При изготовлении питательной среды водный гидролизат мясокостной муки, 5 -ный кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и 3 -ный щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови смешивают при следующих соотношениях компонентов об.-73216. Выход среды с 1 кг сырья - 14,2 литра. Концентрация сальмонелл составила 2,12 млрд/см 3. Пример 7. Для приготовления питательной среды водный гидролизат мясокостной муки, 5 ный кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки и 3 -ный щелочноперекисный гидролизат сыворотки крови смешивают при следующих соотношениях компонентов об.- 82144. Выход среды с 1 кг сырья - 12,8 литра. 3 6292 1 Концентрация сальмонелл составила 1,42 млрд/см 3. Результаты исследований по оценке влияния питательных сред различного состава на интенсивность роста некоторых микроорганизмов представлены в таблице. Интенсивность роста микроорганизмов на питательных средах различного состава Вид микроорганизма Сальмонеллы Эшерихии Рожистые бактерии Пастереллы Питательные среды бульон Хоттингера предлагаемая 0,80,06 2,620,12 1,50,12 3,420,16 0,320,07 2,400,14 0,560,05 2,380,12 Из таблицы видно, что предлагаемая питательная среда обеспечивает более интенсивный рост сальмонелл, эшерихии, рожистых бактерий и пастерелл, чем известная (прототип). Источники информации 1. Короткевич А.С. и др. Питательная среда для выращивания микроорганизмов. - А.с. 1237707 СССР//Открытия. - 1986. -22. 2. Липковский А.С. Применение ионообменных смол в производстве аминокислот // Медицинская промышленность СССР. - 1965. -8. - С. 34-36. 3. Справочник ветеринарного лаборанта / Под ред. В.Я. Антонова. -М. Колос, 1981. С. 20-24. 4. Шагам Н.Л., Раскин Б.М., Мельников В.А., Шапарина Л.В. Сравнительное изучение фракционного состава ферментативного и кисленного гидролизатов крови, используемых для конструирования микробиологических сред // ЖМЭИ. - 1981. - С. 89-92. - С. 8. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.