Средство для повышения фагоцитарной активности нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости in vitro

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СРЕДСТВО ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ В БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОЙ ЖИДКОСТИ(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(72) Авторы Поплавская Эвелина Эдмундовна Лис Михаил Александрович Шейбак Владимир Михайлович Мороз Валентина Леопольдовна Данильчик Ирина Витальевна Романчук Эдмунд Вацлавович(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет(56) СЕВЕРЬЯНОВА Л.А. и др. Человек и его здоровье. Курский научно-практический вестник. - 2006. -3. . 60-75. БОРИСОВ С.А. Взаимосвязь функции фагоцитов и состояния микроокружения при хронических обструктивных болезнях легких Автореф. дис. - Новосибирск, 2002. - . 19-20. МАКАРОВА О.П. Зависимость течения острого экссудативно-деструктивного воспаления легких от реактивности фагоцитов Автореф. дис. - Новосибирск, 1992. - . 20-21. СУНГОРКИНА Е.П. и др. Здравоохранение Чувашии. - 2006. -2. . 9-12.(57) Применение аргинина в качестве средства для повышения фагоцитарной активности нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости. Изобретение относится к области медицины, в частности к лекарственным средствам,которые могут быть использованы для коррекции фагоцитарной функции нейтрофилов. Хронические неспецифические заболевания легких - группа заболеваний, к числу которых относят и хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ). В основе их патогенеза лежит ряд иммунологических нарушений, среди которых важное значение имеет нарушение фагоцитарной функции нейтрофилов и макрофагов. В большинстве случаев при данных заболеваниях говорят о развитии так называемой дисфункции фагоцитоза,которая проявляется снижением числа нейтрофилов и макрофагов, участвующих в фагоцитозе, и уменьшением их поглотительной способности 1 2 3 4 5. Отмечается рефрактерность нейтрофилов к действию цитокинов 1. Угнетение фагоцитоза в легких может быть обусловлено способностью бактерий и продуктов их жизнедеятельности подавлять функциональную активность нейтрофилов 3, что приводит к возникновению обострений хронических заболеваний легких, более длительному течению воспаления 2. О развитии данного синдрома на местном уровне можно судить исходя из показателей бронхоальвеолярной жидкости 6. 17299 1 2013.06.30 Для коррекции этого состояния в медицине используются различные лекарственные средства. Известно эффективное применение препаратов бактериального и грибкового происхождения, таких как бронхомунал, бронховаксон, рибомунил, многокомпонентные сухие живые бактериальные вакцины, ИРС-19, производные пиримидина или нуклеиновой кислоты для стимуляции иммунной системы, в том числе и фагоцитарной активности нейтрофилов 1, 7, 14. Недостатком данных препаратов является способность вызывать аллергические реакции, иммунологическую толерантность, местные воспалительные процессы, диспептические явления. Установлен иммуномодулирующий эффект антибиотиков, в том числе влияние их на фагоцитарную функцию нейтрофилов 7, 8, 17, 18, проявляющуюся преимущественно в виде повышения продукции активных форм кислорода 18. Недостатком данных препаратов является также способность вызывать аллергические реакции и дисбактериоз 7, что ограничивает их применение для стимуляции фагоцитарной активности нейтрофилов. Задача изобретения - расширение арсенала средств для повышения фагоцитарной активности нейтрофилов бронхоальвеолярной жидкости. Данная задача решается путем применения аргинина в качестве средства для повышения фагоцитарной активности нейтрофилов бронхоальвеолярной жидкости. Аргинин является незаменимой аминокислотой, участвующей в различных процессах. В организме человека нет эндогенных запасов аргинина. Известно, что он способен стимулировать синтез оксида азота в кровеносном русле и тем самым тормозить адгезию лейкоцитов 9. Оксид азота может синтезироваться из аргинина в нейтрофилах и участвовать в свободнорадикальных процессах, связанных с киллингом бактерий 10, которые,однако, при ослабленной антиоксидантной системе способны оказывать повреждающее воздействие на легочную ткань 11. Аргинин входит в состав некоторых пептидов,например , который способствует предотвращению развития эмфиземы легких 13. В медицине аргинин используется в составе гипотензивных препаратов для коррекции дисфункции эндотелия 15, а также иммуномодулирующих препаратов 12, 16. Однако убедительных данных о влиянии данной аминокислоты на фагоцитарную активность и поглотительную способность нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости получено не было. Для оценки фагоцитарного звена нейтрофиловбыл проведен тест со стафилококком золотистым в бронхоальвеолярной жидкости, полученной у пациентов, страдающих ХОБЛ 7. Затем проводили реакции фагоцитоза при добавлении в среду аргинина в концентрации 0,01, 0,1 и 1 мг/мл. Вычисляли фагоцитарный индекс (ФИ) как процент нейтрофилов, способных к фагоцитозу, и фагоцитарное число как среднее число микробов, поглощенных одним фагоцитом. При обследовании больных 1-ю группу составили 19 пациентов, наблюдавшихся в период обострения ХОБЛ, среди которых у 11 была сопутствующая стабильная стенокардия напряженияфункционального класса и артериальная гипертензиястадии. Во 2-ю группу вошли 20 больных ХОБЛ, среди них 13 с ХОБЛ в сочетании со стабильной стенокардией напряженияфункционального класса и артериальной гипертензиейстадии,обследованных в период ранней реконвалесценции после проведения противовоспалительной терапии. Данные обработаны при помощи программы 6.0 с применением непараметрических методов исследования. Достоверность различий выборок оценивали при помощи теста Вилкоксона. Данные представлены в виде медианы и стандартного отклонения. 17299 1 2013.06.30 Влияние аргинина на показатели фагоцитарной активности нейтрофилов в бронхоальвеолярной жидкости больных ХОБЛ 1-я группа ФИ ФЧ Исходные значения 4810,665,90,84 у.е. 7213,406,72,43 у.е 1 мг/мл аргинина 10,00078 10, 0017 7214,196,92,42 у.е. 0,1 мг/мл аргинина 10,0005 10,0005 7311,897,43,17 у.е. 0,01 мг/мл аргинина 10,0005 10,0002 Название признака 2-я группа ФИ ФЧ 6014,66,053,18 у.е 6916,07,74,0 у.е. 20,009 20,012 6815,26,93,59 у.е. 20,001 20,006 69,513,107,72,74 у.е. 20,049 20,017 Примечание значение 1 приведено по отношению к исходным значениям в 1-й группе, 2 - по отношению к исходным значениям во 2-й группе. Как видно из таблицы, аргинин оказывает стимулирующее влияние на поглотительную способность нейтрофилов и повышает число активных нейтрофилов как в период обострения ХОБЛ, так и во время ранней реконвалесценции. Можно полагать, что одним из механизмов этого воздействия может быть влияние на экспрессию рецепторного аппарата нейтрофилов с усилением их функциональной активности, что улучшает элиминацию антигенов в очаге инфекции и способствует более быстрому завершению воспалительного процесса. Однако следует учитывать, что избыточная стимуляция нейтрофилов может привести к превалированию их разрушительных свойств над защитными. Поэтому мы считаем, что наиболее приемлемой концентрацией является доза 0,1 мг/мл препарата, добавляемаяв бронхоальвеолярную жидкость. Таким образом, нами установлено, что аргинин действительно увеличивает процент активных фагоцитов, их поглотительную способность, что может быть использовано для улучшения фагоцитарной функции нейтрофилов бронхоальвеолярной жидкости. Источники информации 1. Кокосов А.Н. Хронический бронхит и обструктивная болезнь легких. - СПб. Лань,2002. - 288 с. 2. Колодкина Л.А. Функциональная активность нейтрофилов у больных хронической обструктивной болезнью легких // Проблемы туберкулеза и болезней легких. - 2003. -7. С. 15-21. 3. Сунгоркина Е.П. Характеристика иммунных дисфункций на системном и местном уровнях у больных хроническим бронхитом // Здравоохранение Чувашии. - 2006. -2. С. 9-12. 4. Черняев А.Л., Самсонова В.М. Хронический обструктивный бронхит. Гл. 23 // Хронические обструктивные болезни легких. - М., 2000. - С. 259-267. 5. Чучалин А.Г. Хронические обструктивные болезни легких. Гл. 1 // Хронические обструктивные болезни легких. - Москва, 2000. - С. 11-26. 6. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология руководство для врачей. - СПб Питер, 2001. - 567 с. 7. Новиков Д.К., Новиков П.Д. Клиническая иммунология Учеб. пособие / Под ред. Д.К. Новикова. - Витебск ВГМУ, 2006.392 с. 8. Трисветова Е.Л., Лихачева А.Е., Федосеевич С.Е., Лешко Ю.Ю. Спирамицин в лечении инфекционного обострения хронической обструктивной болезни легких // Медицинская панорама. - 2009. -12. - С. 85-86. 3 17299 1 2013.06.30 9. Жданов А.А., Романовский Д.И., Дубовик Б.В. Эндотелиальная дисфункция и возможности ее коррекции - аргинином // Здравоохранение. - 2005. -9. - С. 55-60. 10. Фархутдинов У.Ф., Абдрахманова Л.М., Фархутдинов Ш.У. Влияние галотерапии на свободнорадикальное окисление у пациентов с заболеваниями легких // Пульмонология. - 2008. -1. - С. 29-32. 11. Соодаева С.К. Оксидантные и антиоксидантные системы легких при хронических обструктивных заболеваниях. Гл. 7. Чучалин А.Г. Хронические обструктивные болезни легких. - М., 2000. -. - С. 92-111. 12. Северьянова Л.А., Бобынцев И.И. Механизмы действия аминокислоты -аргинина на нервную и иммунную регуляторные системы // Человек и его здоровье. Курский научно-практический вестник. - 2006. -3. - С. 60-75. 13. ///. - 2008.-. 22. - . 9. - . 3403-3408. 14..,// . . - 1995. - . 4. - . 138-148. 15..// Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4