Способ моделирования гепаторенального синдрома

(51) С МВ 23/28 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОИ СОБСТВЕННОСТИ(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ГЕПАТОРЕНАЛЬНОГО СИНДРОМА(71) Заявитель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет (ВУ)(72) Авторы Кизюкевич Леонид Стефанович Кизюкевич Игорь Леонидович Савчук Алла Николаевна (ВУ)(73) Патентообладатель Учреждение образования Гродненский государственный медицинский университет (ВУ)СПОСОб моделирования гепаторенального синдрома, заключающийся В ТОМ, ЧТО вначаЛС у ЭКСПСРИМВНТЗЛЬНОГО ЖИВОТНОГО ОСУТЦССТВЛЯЮТ ХОЛССТЭЗ В ТСЧВНИСЧ, а затем на ПРОТЯЖЕНИИ ПОСЛСДУЪОЩИХЧ ПОЛНУЮ ПОТСрЮ ЖСЛЧИ.Изобретение относится К области экспериментальной Медицины, а именно К экспериментальной хирургии и патологической физиологии, и может использоваться для изучения эффективности воздействия различных медикаментозных препаратов на состояние внутренних органов при развитии гепаторенального синдрома.Необходимость в создании такого изобретения вызвана тем, что после оперативных вмешательств на органах гепатопанкреатодуоденальной зоны данный синдром занимает ведущее место в группе осложнений, приводя при этом к высокой послеоперационной летальности. Вопросы предупреждения и лечения это грозного осложнения можно изучить только в экспериментах на животных. Данная модель поможет экспериментальным путем обосновать возможности коррекции развивающейся патологии.В экспериментальной практике известен ряд способов моделирования острой печеночной недостаточности. Один из них связан с перевязкой у собак печеночной артерии,пузырного протока и введением в общий желчный проток 40-50 раствора СС 14 в подсолнечном масле в дозе 0,05-0,15 мл/кг (Локщин Л.С., Пустовалова Л.М. Изменения некоторых ферментов при острой печеночной недостаточности в эксперименте // Экспериментальная хирургия. - 1973. - Не 3. - С. 40-42).Недостатками этого метода являются дополнительное использование дорогостоящих высокотоксичных препаратов и невозможность моделирования сочетанной печеночнопочечной патологии - гепаторенального синдрома.Известен способ моделирования почечной недостаточности (Туревский А.А., Кизюкевич Л.С. Способ моделирования острой почечной недостаточности // А.с. 1661823, 1991). Животным под эфирным наркозом проводят катетеризацию общего желчного протока, ВУ 8840 С 12006.12.30при этом за 6-7 суток до операции И 2-3 суток после не ежедневно внутримышечно вводят гидрокортизон в дозе 6 мг на 1 кг массы.Недостатками данного способа являются длительное время, необходимое для воспроизводства модели (8-10 суток) дополнительное использование дорогостоящих медикаментов (гидрокортизона) невозможность моделирования сочетанной печеночно-почечной патологии - гепаторенального синдрома.При анализе доступной литературы нам не удалось найти способ, который мог бы являться прототипом заявляемого изобретения.Задача изобретения - создание модели, позволяющей вызывать сочетанную печеночно-почечную патологию - гепаторенальнь 1 й синдром.Поставленная задача решается путем последовательного, рассчитанного экспериментальным путем, моделирования вначале 72-часового холестаза (достигается пик билирубинемии), а затем, на протяжении последующих 72 ч, полной потери желчи организмом. Такие последовательно чередующиеся, строго выдержанные по времени разнонаправленнь 1 е нарушения внешнесекреторной функции печени и позволяют моделировать гепаторенальнь 1 й синдром.Способ осуществляют следующим образом. Холестаз и полную потерю желчи вь 1 зь 1 вают путем комбинированного нарушения внешнесекреторной функции печени (Кизюкевич Л.С., Туревский А.А. Способ комбинированного нарушения внешнесекреторной функции печени // Патент 5402, 2003). Под эфирным наркозом у крыс производят разрез кожи по средней линии живота. Узкий отросток стеклянного желчеприемника с укрепленной в нем полиэтиленовой трубкой вводят под кожу, а сам желчеприемник укрепляют на правом боку крысы с помощью медной проволоки. После этого производят разрез брюшной стенки по белой линии и через небольшое отверстие, сделанное справа на 1,0 см латеральнее срединного разреза, полиэтиленовую трубку проводят в брюшную полость. В брыжейке 12-перстной кишки выделяют общий желчный проток и после надреза его стенки в проксимальной трети вводят в него полиэтиленовый катетер, ту его часть, которая соединяется со стеклянным отростком желчеприемника. Катетер фиксируют в протоке двумя шелковыми лигатурами. Операционную рану присыпают белым стрептоцидом и ушивают послойно. Противоположный конец (дистальная часть) катетера через резервуар желчесборника выводят в его горловину и просвет герметично закрывают металлической турундой, диаметр которой соответствует внутреннему диаметру катетера. Таким образом создается желчная гипертензия, то есть холестаз. Через 72 ч металлическую турунду извлекают из просвета катетера и дистальную часть катетера из горловины вводят в полость желчеприемника для сбора секретируемой печенью желчи. Как следствие, развивается наружное желчеистечение с последующей полной потерей желчи организмом, которое длится 72 ч. В результате таких строго выдержанных по времени разнонаправленных нарушений внешнесекреторной функции печени и моделируется гепаторенальнь 1 й синдром.Сокращение или увеличение сроков холестаза не приводит к желаемому результату,поскольку при сокращении его продолжительности не достигается максимальной, критической концентрации билирубина в сыворотке крови, а удлинение сроков холестаза, наоборот, приводит к падению данной критической концентрации билирубина. При этом 72 часовая полная потеря желчи организмом (наружное желчеистечение) является наиболее оптимальным временем для развития почечной недостаточности (Туревский А.А., Кизюкевич Л.С. Изменения в эпителии проксимальной части канальца нефрона при потере желчи организмом // Архив анатомии, гистологии, эмбриологии. - 1985 Т. 89. - Не 9. С. 70-74). Все вышеизложенное во многом и предопределяет временные сроки эксперимента, позволяющие с высокой степенью достоверности моделировать именно гепаторенальнь 1 й синдром.Приводим пример, доказывающий возможность осуществления способа.Беспородная крь 1 са-самец массой 210 г 2002 г. (Протокол Не 618). Под эфирным наркозом производят комбинированное нарушение внешнесекреторной функции печени указанным способом. Результаты исследований показали, что через 6 суток от начала эксперимента в сыворотке крови опытного животного концентрация общего билирубина увеличена до 35,7 ммоль/л, мочевины - до 26,5 ммоль/л, активность у-глютамилтранспептидазь 1 возрастает почти в 3 раза - до 2,5 ммоль/(г-л), концентрация ионов натрия в крови падает до 129,0 ммоль/л, развивается полиурия - почти в 2,6 раза увеличивается диурез, шйп клиренс мочевины снижается до 10,8 (относительно контрольных величин),значительно уменьшается концентрация мочевины в моче и на 89,2 уменьшается ее концентрационный индекс. В эпителиоцитах канальцевого аппарата нефронов значительно снижается активность сукцинатдегидрогеназы, Щелочной фосфатазы при одновременном увеличении активности лактатдегидрогеназы и маркерного фермента лизосом кислой фосфатазы.В пользу развития почечной недостаточности свидетельствуют полиурия (Роговий Ю.Е., Федорук О.С., Ф 1 л 1 пова Л.О. и др. // Мед. х 1 м. - 2000. - Т. 2. - Не 2. - С. 23-27),резкое повышение концентрации мочевины в крови и уменьшение ее концентрации в моче (Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. - Изд. второе, перераб. и доп. - Мн. Беларусь, 1982. - 366 с.), снижение концентрационного индекса мочевины(П/Р) (Рябов С.И., Наточин Ю.В., Бондаренко Б.Б. Диагностика болезней почек. - Л. Медицина. - 1979. - 255 с.), уменьшение средней величины клиренса мочевины ниже 75 от контрольного показателя (Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. - Изд. второе, перераб. и доп. - Мн. Беларусь, 1982. - 366 с.), снижение концентрации натрия в сыворотке крови (Милованов Ю.С., Николаев А.Ю. // Анестезиология и реаниматология. - 1998. - Не 6. - С. 65-68) и, наконец, резкое падение в эпителиоцитах канальцевого аппарата нефронов активности сукцинатдегидрогеназы, дегидрогеназы восстановленного НАД, лактатдегидрогеназы и Щелочной фосфатазы при одновременном увеличении активности маркерного фермента лизосом - кислой фосфатазы. В пользу токсического поражения печеночной паренхимы свидетельствуют увеличение в сыворотке крови концентрации билирубина, активности у-глютамилтранспептидазь 1, а также уменьшение концентрации мочевины в моче (Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. - Изд. второе, перераб. и доп. - Мн. Беларусь, 1982. - 366 с.).Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о развитии тяжелой сочетанной патологии печени и почек - гепаторенального синдрома.Используя данное техническое решение, появляется возможность моделирования такого грозного послеоперационного осложнения, как гепаторенальный синдром. Предлагаемое изобретение является доступным для выполнения и может использоваться в научно-исследовательских лабораториях для экспериментальной оценки вопросов патогенеза, диагностики и способов коррекции гепаторенального синдрома, который очень часто встречается в клинических условиях.Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.