Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения тератомы головного мозга у ребенка

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ТЕРАТОМЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА У РЕБЕНКА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Кульчицкий Владимир Адамович Талабаев Михаил Владимирович Григорьев Дмитрий Григорьевич Калюнов Владимир Николаевич(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения тератомы головного мозга у ребенка, заключающийся в том, что выделяют из биоптата головного мозга клетки тератомы, выращивают на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 ,снимают с питательной среды 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри, выращивают 1 сутки в среде ДМЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют питательную среду из чашек Петри, снимают клетки тератомы 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри и выбирают для лечения тератомы головного мозга химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток. Изобретение относится к медицине, к разделу клинической и экспериментальной онкологии. Для лечения многих неоплазий, в том числе и для тератомы, используют метод химиотерапии 1, 2, 3. В основе хемотерапевтического подхода к лечению тератомы головного мозга лежит ряд стандартных протоколов, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов цисплатин 3, этопозид 3, блеомицин 3 и др. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии 17255 1 2013.06.30 заболевания и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам. Однако если первых два признака онкологи учитывают при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток тератомы головного мозга конкретного пациента к воздействию химиопрепаратов не может быть решена в клинике в силу отсутствия технологии и соответствующей организационной структуры. Заявителю неизвестен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения тератомы головного мозга у ребенка, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения тератомы головного мозга у ребенка. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения тератомы головного мозга у ребенка, заключающийся в том, что выделяют из биоптата головного мозга клетки тератомы, выращивают на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают с питательной среды 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри, выращивают 1 сутки в среде ДМЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют питательную среду из чашек Петри, снимают клетки тератомы 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри и выбирают для лечения тератомы головного мозга химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов,при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительнойоценки воздействия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфичность их действия в сравнении друг с другом и контролем, что может быть использовано в клинике. Заявителем были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фигуре представлено А. Контроль. Клетки тератомы головного мозга ребенка, полученные из биоптата на 5 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. Б. Опыт. Клетки тератомы головного мозга ребенка, полученные из биоптата на 5 сутки культивирования в среде при действии цисплатина (1 мкг/мл). Увеличение 312,5. В. Опыт. Клетки тератомы головного мозга человека, полученные из биоптата на 5 сутки культивирования в среде при действии комбинации цисплатина (1 мкг/мл) и карбоплатина (4 мкг/мл). Пример. Выделяют из биоптатов по стандартной методике клетки тератомы головного мозга 4, выращивают на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении СО 2 5 , снимают с питательной среды 0,25 ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри, выращивают 1 сутки в среде ДМЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют питательную среду из чашек Петри, снимают клетки тератомы 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри (для сравнения на фигуре А - контрольная культура тератомы без действия химиопрепарата, Б -культура тератомы головного мозга при действии одного из препаратов -цисплатина, В - культура тератомы головного 2 17255 1 2013.06.30 мозга при действии комбинации препаратов - цисплатина и карбоплатина) и выбирают для лечения тератомы головного мозга химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой для разработки метода индивидуального подбора терапевтических средств для лечения тератомы головного мозга у ребенка, коррекции режимов, дозировок и тактики терапии. Таким образом, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат или их комбинацию и его концентрацию для данной опухоли и затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает клиницисту основание для изменения тактики лечения тератомы головного мозга. Источники информации 1..,.,. . . - 2009. - . 45. - о. 5. - . 354-360. 2.,,.,,--//. 2009. - . 3. - . 31-36. 3..-//. . - 2010. - . 3. - . 231-233. 4. Пинаев Г.П. и др. Методы культивирования клеток Сборник научных трудов / Под ред. Г.П. Пинаева, Богдановой. - СПб Наука, 2008. - 313 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3