Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения астроцитомы у ребенка

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АСТРОЦИТОМЫ У РЕБЕНКА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Талабаев Михаил Владимирович Григорьев Дмитрий Григорьевич Калюнов Владимир Николаевич Кульчицкий Владимир Адамович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения астроцитомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки астроцитомы из биоптата, выращивают в течение 7 суток на питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 -ным 15520 1 2012.02.28 раствором трипсина в версене, переносят на чашки Петри в количестве 150 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток на среде , содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в количествах, в 100 раз меньше терапевтических, через сутки по окраске клеток 0,02 -ным раствором трипанового синего выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток астроцитомы и химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, использованные для данного образца, выбирают для лечения астроцитомы у ребенка. Изобретение относится к медицине, к разделу клиническая и экспериментальная онкология. Для лечения многих опухолей, в том числе и для астроцитомы, используют метод химиотерапии 1,2. Этот метод всегда сочетается с хирургической резекцией опухоли и/или лучевой терапией. 3. В основе хемотерапевтического подхода к лечению астроцитомы лежит ряд стандартных протоколов -91, -2000,2, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов цитоплатин, винорелбин,циклофосфамид, темозоломид, карбоплатин и др. 1, 3, 4. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии заболевания и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам и на сегодняшний день составляет 482. Однако если первых два признака онкологи стараются учитывать при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток астроцитомы конкретного пациента к воздействию цитостатических средств не может быть решена в клинике. Заявителю неизвестен способ индивидуального подбора химиопрепарата или их комбинации для лечения астроцитомы человека, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения астроцитомы у ребенка. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или их комбинации для лечения астроцитомы у детей путем взятия у пациента биоптата, выделения из него клеток астроцитомы с последующим выращиванием их в питательной среде в течение 7 суток при температуре 37 ,влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 равным 5 , после чего клетки снимают 0,25 раствором трипсина в версене в соотношении 13 соответственно и в количестве 150 000 клеток на чашку, переносят в чашки Петри и выращивают сутки в среде МЕМ с добавлением 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, затем на следующие сутки в образцы среды с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты в концентрациях, уменьшенных в 100 раз, по сравнению с теми, которые используют для лечения в клинике и после 1 суток введения препарата в образцы среды оценивают эффективность его действия, для чего удаляют среду из чашек Петри, клетки снимают 0,25 растворомтрипсина в версене в соотношении 13 соответственно и по их окраске 0,02 раствором трипанового синего определяют образец с наибольшим процентом погибших клеток астроцитомы и химиопрепарат или их комбинацию, использованную в данном образце, применяют для лечения пациента. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительной оценки на культуре клеток действия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфика действия цитостатиков в сравнении друг с другом и контролем, что затем может быть использовано в клинике. Заявителем 15520 1 2012.02.28 были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фигурепредставлено Контроль. Клетки астроцитомы человека, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. На фигуре Б представлено Опыт. Клетки астроцитомы человека, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде при действии карбоплатина (1 мкг/мл). Увеличение х 312,5. Пример. Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения астроцитомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки астроцитомы из биоптата 5, выращивают в течение 7 суток в питательной среде при температуре 37 , влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 равным 5 ,снимают 0,25 раствором трипсина в версене, переносят на чашки Петри в количестве 150 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток на среде МЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в количествах, в 100 раз меньше терапевтических, через сутки по окраске 0,02 раствором трипанового синего выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток астроцитомы и химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов (для сравнения на фигуре А - контрольная культура без действия химиопрепарата, а на фигуре Б - культура астроцитомы при действии одного из препаратов - карбоплатина), использованные для данного образца, выбирают для лечения астроцитомы у ребенка. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой для разработки метода индивидуального подбора терапевтических средств в лечении астроцитомы человека, коррекции режимов, дозировок и в целом тактики терапии этого вида новообразований. Следовательно, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат или их комбинацию и его концентрацию для данной опухоли и затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает клиницисту основание для изменения тактики лечения астроцитомы у пациента. Источники информации 1..,.,.,.,.-,// . . - 2003. - . 18. - . 3. - . 683-693. 2. Орлов Ю.А. Комбинированное лечение детей с опухолями головного мозга // Онкология. - 2005. - . 7. -4. - . 332-338. 3.,,,,,.,,,,// . . - 2009. - . 115. - . 15. . 3501-3511. 4.,,.,.,.// . . . - 2009. - . 53. - . 4. - . 590-593. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4