Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЭПЕНДИМОМЫ У РЕБЕНКА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Талабаев Михаил Владимирович Григорьев Дмитрий Григорьевич Калюнов Владимир Николаевич Кульчицкий Владимир Адамович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки эпендимомы из биоптата, выращивают в течение 2 суток в питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят на чашки Петри в количестве 300 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток в среде , содержащей 15 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с используемыми для лечения, через 1 сутки окрашивают клетки в чашках 0,02 -ным раствором трипанового синего, выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения эпендимомы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, использованные для данного образца. Изобретение относится к медицине, к разделу клиническая и экспериментальная онкология. Для лечения многих опухолей, в том числе и эпендимомы у ребенка, используют метод химиотерапии 1. В основе хемотерапевтического подхода к лечению эпендимомы у детей лежит ряд стандартных протоколов -91, -2000,2, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов цисплатин, карбоплатин 2, темозоломид и др. 3. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии заболевания 1 и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам, и на сегодняшний день составляет от 24 до 751. Однако если первые два признака онкологи стараются учитывать при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток эпендимомы у детей к воздействию 16006 1 2012.06.30 цитостатических средств не может быть решена в клинике в силу отсутствия технологии и соответствующей организационной структуры. Заявителю не известен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения эпендимомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки эпендимомы из биоптата,выращивают в течение 2 суток в питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри в количестве 300 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток в среде МЕМ, содержащей 15 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях,уменьшенных в 100 раз по сравнению с используемыми для лечения, через 1 сутки окрашивают клетки в чашках 0,02 раствором трипанового синего, выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения эпендимомы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, используемые для данного образца. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительной оценки на культуре клеток действия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфика действия цитостатиков в сравнении друг с другом и контролем, что затем может быть использовано в клинике. Заявителем были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фигуре А представлено Контроль. Клетки эпендимомы ребенка, полученные из биоптата пациента на 2 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. На фигуре Б представлено Опыт. Клетки эпендимомы ребенка, полученные из биоптата пациента на 2 сутки культивирования в среде при действии гемцитабина (2 мкг/мл). Увеличение 312,5. Пример. Выделяют из биоптата по стандартной методике клетки эпендимомы 4, выращивают в течение 2 суток в питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри в количестве 300 000 клеток на чашку и выращивают в течение суток в среде МЕМ, содержащей 15 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты или комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с используемыми для лечения, через 1 сутки окрашивают клетки в чашках 0,02 раствором трипанового синего, выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток эпендимомы и выбирают для лечения эпендимомы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, используемые для данного образца (для сравнения на фигуре А контрольная культура без действия химиопрепарата, а на фигуре Б - культура эпендимомы при действии одного из препаратов - гемцитабина). Таким образом устанавливают индивидуальную чувствительность клеток эпендимомы к химиопрепарату или к комбинации химиопрепаратов, выявляя, какой из препаратов обладает наибольшим летальным действием на злокачественные клетки. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой для разработки метода индивидуального подбора терапевтических средств в лечении эпендимомы у ребенка, коррекции режимов, дозировок и в целом тактики терапии этого вида новообразований. 2 16006 1 2012.06.30 Следовательно, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат или комбинацию химиопрепаратов и его концентрацию для данной опухоли, затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает клиницисту основание для изменения тактики лечения эпендимомы у ребенка. Источники информации 1..,.. //. - 2009. - . 24. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3