Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЛИАЛЬНОЙ ОПУХОЛИ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Кульчицкий Владимир Адамович Талабаев Михаил Владимирович Алейникова Ольга Витальевна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы, при котором осуществляют забор биоптата, затем выделяют из биоптата глиальные опухолевые клетки, выращивают их в питательной среде в течение 3 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают клетки 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри и выращивают 1 сутки в среде Дульбекко с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки до 20 и сульфата гентамицина до 10-4 г/л, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с терапевтически используемыми, через 1 сутки удаляют среду, снимают клетки 0,25 ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, оценивают в процентах эффективность летального действия на клетки химиопрепаратов и комбинаций химиопрепаратов и выбирают для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов с наибольшим летальным действием на указанные клетки. Изобретение относится к медицине, к разделу клиническая и экспериментальная онкология. Метод химиотерапии используется для лечения многих опухолей, в том числе и для глиальных опухолей центральной нервной системы 1, 2, 3. В основе хемотерапевтического подхода к лечению глиальных опухолей центральной нервной системы лежит ряд стандартных протоколов -91, -2000,2, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов карбоплатин, цитоплатин, этопозид, цикло 15633 1 2012.04.30 фосфамид, темозоломид и др. 1, 3, 4. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии заболевания и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам, и на сегодняшний день составляет 484. Однако если первых два признака онкологи стараются учитывать при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток глиальных опухолей центральной нервной системы конкретного пациента к воздействию цитостатических средств не может быть решена в клинике. Заявителю неизвестен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы, при котором осуществляют забор биоптата,затем выделяют из биоптата глиальные опухолевые клетки, выращивают их в питательной среде в течение 3 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 5 , снимают клетки 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри и выращивают 1 сутки в среде Дульбекко с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки до 20 и сульфата гентамицина до 10-4 г/л, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с терапевтически используемыми, через 1 сутки удаляют среду, снимают клетки 0,25 ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют в процентах эффективность летального действия на клетки химиопрепаратов и комбинаций химиопрепаратов и выбирают для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов с наибольшим летальным действием на указанные клетки. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительной оценки на культуре клеток действия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфика действия цитостатиков в сравнении друг с другом и контролем, что затем может быть использовано в клинике. Заявителем были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фигуре представлено 1.1. Контроль. Клетки глиальной опухоли центральной нервной системы, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. 1.2. Опыт. Клетки глиальной опухоли центральной нервной системы, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде при действии карбоплатина(4 мкг/чашку). Увеличение 312,5. Пример Осуществляют забор биоптата, выделяют из биоптата по стандартной методике клетки глиальной опухоли центральной нервной системы 5, выращивают их в питательной среде в течение 3 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 5 , снимают клетки 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри и выращивают 1 сутки в среде Дульбекко с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки до 20 и сульфата гентамицина до 10-4 г/л, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в концентрациях, уменьшенных в 100 раз по сравнению с терапевтически используемыми, через 1 сутки удаляют среду, снимают клетки 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют в процентах эффективность летального действия на клетки химиопрепаратов и комбинаций химиопре 2 15633 1 2012.04.30 паратов (для сравнения на фигуре 1.1 - контрольная культура без действия химиопрепарата, 1.2 - культура глиальной опухоли центральной нервной системы при действии одного из препаратов - карбоплатина) и выбирают для лечения глиальной опухоли центральной нервной системы химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов с наибольшим летальным действием на указанные клетки. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой индивидуального подбора терапевтических средств в лечении глиальных опухолей центральной нервной системы, коррекции режимов, дозировок и в целом тактики терапии этого вида новообразований. Таким образом, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат или их комбинацию и его концентрацию для данной опухоли и затем рекомендовать последний врачам в больнице для использования у исследуемого больного, что дает основание для изменения тактики лечения глиальных опухолей центральной нервной системы у пациента. Источники информации 1..,.,.,.,.,.,.,.-//. 2009. - . 29,3. - . 911-917. 2..,.,.,.,.,.,., .,.,,.//. . - 2006. - . 79,3. - . 299-305. 3..,.,.,.,.,.,.-(, ,)// . 2004. - . 100,4. - . 807-813. 4. Орлов Ю.А и др. Комбинированное лечение детей с опухолями головного мозга // Укранский нейрохрургчний журнал. - 2004. -2. - С. 50-54. 5. - ., ,/.. .7. 200.., , . - . 63-80. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3