Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения медуллобластомы у ребенка

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МЕДУЛЛОБЛАСТОМЫ У РЕБЕНКА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Кульчицкий Владимир Адамович Талабаев Михаил Владимирович Григорьев Дмитрий Григорьевич(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения медуллобластомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки медуллобластомы из биоптата, выращивают в течение 7 суток на питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят на чашки Петри в количестве 200000 кл/мл и выращивают в течение суток на среде , содержащей 10-20 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют в терапевтических количествах тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов, через 3 суток по окраске клеток 0,02 -ным раствором трипанового синего выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток медуллобластомы и химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, использованные для данного образца, выбирают для лечения медуллобластомы у ребенка. Изобретение относится к медицине, к разделу клиническая и экспериментальная онкология. Для лечения многих опухолей, в том числе и для медуллобластомы, используют метод химиотерапии 1, 2. Этот метод всегда сочетается с хирургической резекцией опухоли и/или лучевой терапией, трансплантацией аутологических стволовых клеток 1, 3, 5, 6. В основе хемотерапевтического подхода к лечению медуллобластомы лежит ряд стандартных протоколов -91,, , -921, 81,,1, 3, 4, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов цисплатин, винкристин, этопозид, циклофосфамид, ифосфамид, карбоплатин и др. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от 15518 1 2012.02.28 многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии заболевания и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам и на сегодняшний день составляет от 24 до 773. Однако если первых два признака онкологи стараются учитывать при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток медуллобластомы конкретного пациента к воздействию цитостатических средств не может быть решена в клинике. Заявителю неизвестен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения медуллобластомы у ребенка, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения медуллобластомы у ребенка. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или их комбинации для лечения медуллобластомы у детей путем взятия у пациента биоптата, выделения из него клеток медуллобластомы с последующим выращиванием их в питательной среде в течение 7 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2, равном 5 , после чего клетки снимают 0,25 раствором трипсина в версене в соотношении 13 соответственно и в количестве 200 000 кл/мл, переносят в чашки Петри и выращивают сутки в среде ДМЕМ с добавлением 10-20 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л раствора сульфата гентамицина, затем на следующие сутки в образцы среды с клетками добавляют тестируемые химиопрепараты в тех концентрациях, которые используют для лечения в клинике, и после 1, 2, 3 суток введения препарата оценивают эффективность его действия,для чего удаляют среду из чашек Петри, клетки снимают 0,25 раствором трипсина в версене в соотношении 13 соответственно и по их окраске 0,02 раствором трипанового синего определяют образец с наибольшим процентом погибших клеток медуллобластомы, и химиопрепарат или их комбинацию, использованную в данном образце,применяют для лечения пациента. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительной оценки на культуре клеток действия указанных химиопрепаратов определяются наибольшая чувствительность и специфика действия цитостатиков в сравнении друг с другом и контролем, что затем может быть использовано в клинике. Заявителем были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фиг. 1 представлено контроль. Клетки медуллобластомы человека, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. На фиг. 1 Б представлено опыт. Клетки медуллобластомы человека, полученные из биоптата пациента на 7 сутки культивирования в среде при действии фитозида(150 мкг/мл). Увеличение 312,5. Пример Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения медуллобластомы у ребенка, заключающийся в том, что выделяют клетки медуллобластомы из биоптата, выращивают в течение 7 суток на питательной среде при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и при парциальном давлении 2 5 , снимают 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри в количестве 200000 кл/мл и выращивают в течение суток на среде ДМЕМ, содержащей 10-20 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, после чего в чашки Петри с образцами клеток добавляют в терапевтических количествах тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов, через 3 суток по окраске клеток 0,02 -ным раствором трипанового синего выявляют образец с наибольшим процентом погибших клеток медуллобластомы (для сравнения на фиг. 1- контрольная культура без действия 2 15518 1 2012.02.28 химиопрепарата, а на фиг. 1 Б - культура медуллобластомы при действии одного из препаратов - фитозида) и химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, используемые для данного образца, выбирают для лечения медуллобластомы у ребенка. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой для разработки метода индивидуального подбора терапевтических средств в лечении медуллобластом у ребенка, коррекции режимов, дозировок и в целом тактики терапии этого вида новообразований. Таким образом, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфику их действия, выявить самый эффективный препарат или их комбинацию и его концентрацию для данной опухоли и затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает клиницисту основание для изменения тактики лечения медуллобластомы у ребенка. Источники информации 1. Конопля Н.Е. Новый подход в лечении медуллобластомы у детей // Доклады НАН Беларуси. - 2009. - Т. 53. -2. - С. 91-94. 2.,,.,.,.,.,.-// -. - 2006. - . 8. - . 53-59. 3. Конопля Н.Е. Сравнительная клиническая эффективность различных методов лечения медуллобластомы у детей // Медицина. - 2009. -1. - С. 66-69. 4..,.,С.,.,.,.// . . . 2001. - . 84. - . 11. - . 1453-1459. 5..,,.,,,//. - 2006. - . 25, . 2. . 241-246. 6..,.,.,.,.,.,., .,.,. -,-//. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3