Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли у человека

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ХИМИОПРЕПАРАТА ИЛИ КОМБИНАЦИИ ХИМИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АТИПИЧНОЙ ТЕРАТОИДНОЙ/РАБДОИДНОЙ ОПУХОЛИ У ЧЕЛОВЕКА(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Чернов Александр Николаевич Калюнов Владимир Николаевич Талабаев Михаил Владимирович Григорьев Дмитрий Григорьевич Кульчицкий Владимир Адамович(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли у человека, при котором выделяют из взятого у пациента биоптата клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли,выращивают их на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают с питательной среды 0,25 ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри, выращивают 1 сутки в среде , содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри с клетками тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют из чашек Петри питательную среду, снимают клетки опухоли 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего,определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри и выбирают для лечения указанной опухоли химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли. Изобретение относится к медицине, к разделу клинической и экспериментальной онкологии. Для лечения многих опухолей, в том числе и для атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли используют метод химиотерапии 1, 2, 3. В основе хемотерапевтического подхо 17256 1 2013.06.30 да к лечению атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли лежит ряд стандартных протоколов, в которых пациентам циклично вводятся различные комбинации цитостатических препаратов цисплатин 3, темозоломид 3 и др. Эффективность лечения пациентов с использованием таких режимов химиотерапии зависит от многих факторов, в первую очередь от возраста больного, стадии заболевания и индивидуальной чувствительности организма к указанным медикаментам. Однако если первых два признака онкологи учитывают при выборе режимов и тактики лечения больного, то специфическая восприимчивость клеток атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли конкретного пациента к воздействию химиопрепаратов не может быть решена в клинике в силу отсутствия технологии и соответствующей организационной структуры. Заявителю неизвестен способ индивидуального подбора химиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения атипичной тетроидной/рабдоидной опухоли, в силу чего не может быть указан ближайший аналог заявляемого изобретения. Задачей заявляемого изобретения является создание способа индивидуального подборахимиопрепарата или комбинации химиопрепаратов для лечения атипичной тератоидной /рабдоидной опухоли человека. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ индивидуального подбора химиопрепарата или их комбинации для лечения атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли у человека, при котором выделяют из взятого у пациента биоптата клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли, выращивают их на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают с питательной среды 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри, выращивают 1 сутки в среде МЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри с клетками тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют из чашек Петри питательную среду, снимают клетки 0,25 -ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри и выбирают для лечения указанной опухоли химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли. Данные проведенных заявителем экспериментов показывают, что при таком способе предварительной оценки на культуре клеток определяются наибольшая чувствительность и специфичность действия цитостатиков в сравнении друг с другом и контролем, что может быть использовано в клинике. Заявителем были применены известные, зарегистрированные МЗ РБ химиотерапевтические препараты. На фигуре представлено А. Контроль. Клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли, полученные из биоптата пациента на 5 сутки культивирования в среде без химиопрепаратов. Увеличение 312,5. Б. Опыт. Клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли, полученные из биоптата пациента на 5 сутки культивирования в среде при воздействии цисплатина (1 мкг/мл). Увеличение 312,5. В. Опыт. Клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли, полученные из биоптата пациента на 3 сутки культивирования в среде при действии комбинации цисплатина (1 мкг/мл) и этопозида (1 мкг/мл). Пример. Выделяют из биоптатов по стандартной методике клетки атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли 4, выращивают их на питательной среде в течение 5 суток при температуре 37 С, влажности воздуха 95 и парциальном давлении 2 5 , снимают с питательной среды 0,25 -ным раствором трипсина в версене, переносят в чашки Петри,выращивают 1 сутки в среде МЕМ, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворот 2 17256 1 2013.06.30 ки и 10-4 г/л сульфата гентамицина, добавляют в чашки Петри с клетками тестируемые химиопрепараты и комбинации химиопрепаратов в используемых для лечения концентрациях, через 1 сутки удаляют из чашек Петри питательную среду, снимают клетки 0,25 ным раствором трипсина в версене, окрашивают 0,02 -ным раствором трипанового синего, определяют процент погибших клеток во всех чашках Петри (для сравнения на фигуре А - контрольная культура без действия химиопрепарата, Б - культура атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли при воздействии цисплатина, В - культура атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли при воздействии комбинации цисплатинэтопозид) и выбирают для лечения указанной опухоли химиопрепарат или комбинацию химиопрепаратов, при действии которых наблюдается наибольший процент погибших клеток атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли. Полученные в процессе проведенного исследования данные являются основой для коррекции режимов, дозировок и в целом тактики терапии этого вида новообразований. Таким образом, достигнутый технический результат заявляемого способа заключается в следующем. Способ позволяет определить индивидуальную чувствительность клеток к цитостатикам, установить специфичность их действия, выявить самый эффективный препарат или комбинацию химиопрепаратов для данной опухоли и затем рекомендовать последний клиницистам для использования у исследуемого больного, что дает клиницисту основание для изменения тактики лечения атипичной тератоидной/рабдоидной опухоли человека. Источники информации 1. - Т.,.,.,.,.,.,., .,.,./(/) // .. - 2010. - . 54. - о. 4. - . 647-648. 3.,,,//. . - 2009. - . 25. - о. 5. - . 535-541. 4. Пинаев Г.П.и др. Методы культивирования клеток Сборник научных трудов / Под ред. Г.П. Пинаева, Богдановой. - СПб Наука, 2008. - 313 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3