Способ обнаружения яиц гельминтов и/или цист патогенных простейших в копроматериале

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ И/ИЛИ ЦИСТ ПАТОГЕННЫХ ПРОСТЕЙШИХ В КОПРОМАТЕРИАЛЕ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр эпидемиологии и микробиологии(72) Автор Скрипова Лариса Викторовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии(56) Практическая паразитология. - Ленинград Медцина, 1977. - С. 86-91. Методические рекомендации. Санитарно-паразитологические методы исследования объектов внешней среды на яйца гельминтов и цисты простейших. - Минск, 1996. - С. 14. Методические рекомендации. Лабораторная диагностика, клиника, лечение и профилактика лямблиоза. - Минск,1996. - С. 7-10. Современные методы диагностики,лечения и профилактики заболеваний. Сборник инструктивно-методических документов. Т. 6. Организация и управление здравоохранением. Гигиена и эпидемиология. Фармация. Вып. 9. Минск РНМБ, 2008. - С. 59-68. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. - М. Медицина, 1968. - С. 338-339.(57) Способ обнаружения яиц гельминтов и/или цист патогенных простейших в копроматериале, включающий подготовку пробы копроматериала и ее микроскопическое исследование, отличающийся тем, что пробу копроматериала перемешивают с водой в соотношении 110, вносят по 1 мл 0,1 -ных водных растворов сульфата аммония, сульфата железа и сульфата магния, а через 5 минут - 6-8 мл 3 -ной соляной кислоты, перемешивают, отстаивают 15-20 минут, сливают надосадочную жидкость, промывают осадок водой, центрифугируют в течение 5 минут при 600 и осадок исследуют микроскопированием на наличие яиц гельминтов и/или цист патогенных простейших. Изобретение предназначено для использования в лабораториях учреждений, осуществляющих государственный санитарный надзор, а также в клинико-диагностических лабораториях. Известны способы лабораторной диагностики кишечных паразитарных заболеваний,которыми широко пользуются в лабораториях практического здравоохранения для выявления яиц гельминтов - метод нативного мазка 1 и метод Като, Миура 2. 16516 1 2012.10.30 Метод нативного мазка заключается в следующем берут кал в количестве 30-50 мг(масса величиной со спичечную головку), тщательно растирают на предметном стекле с несколькими каплями 50 -ного раствора глицерина до получения прозрачного равномерного мазка, который занимает почти всю поверхность стекла. Препарат весь просматривают под микроскопом. При слабой инвазии исследование одного мазка на предметном стекле не выявляет яйца многих гельминтов. Метод Като-Миура. На предметное стекло наносят 50-60 мг фекалий, покрывают их целлофановой полоской, пропитанной 50 -ным водным раствором глицерина и 3 -ным водным раствором малахитовой зелени и раздавливают резиновой пробкой для получения тонкого ровного слоя. Мазок оставляют на 1 час, затем микроскопируют. Метод не пригоден для обнаружения мелких яиц трематод и цист простейших. Техническая задача изобретения - разработка способа с максимальным обнаружением в копроматериале яиц гельминтов всех размеров и цист патогенных простейших при любой интенсивности инвазии. Технический результат достигается в способе обнаружения яиц гельминтов и/или цист патогенных простейших в копроматериале, включающем подготовку пробы копроматериала и ее микроскопическое исследование. Пробу копроматериала перемешивают с водой в соотношении 110, вносят по 1 мл 0,1 -ных водных растворов сульфата аммония, сульфата железа и сульфата магния, а через 5 минут - 6-8 мл 3 -ной соляной кислоты, перемешивают, отстаивают 15-20 минут, сливают надосадочную жидкость, промывают осадок водой, центрифугируют в течение 5 минут при 600 и осадок исследуют микроскопированием на наличие яиц гельминтов и/или цист патогенных простейших. Технический результат выражается в том, что определено оптимальное соотношение копроматериала и воды подобрана сорбирующая смесь (водный раствор сульфатов аммнония, железа и магния) с учетом плотности возбудителей. Кроме того, она обладает коагулирующей способностью вне зависимости отсреды копроматериала. Новый подход позволит обнаруживать в копроматериале разных размеров яиц гельминтов и цист патогенных простейших при любой интенсивности инвазии. Пример. Копроматериал здоровых людей (не менее 20 г) заливают водой в соотношении 110. Для выявления эффективности предлагаемого способа вносят культуру яиц аскарид и цист лямблий по 100 экземпляров. Перемешивают в течение 5 минут стеклянной палочкой или механически с использованием шуттель-аппарата до образования гомогенной суспензии. В гомогенную суспензию копроматериала добавляют 1 мл 0,1 -ного водного раствора сульфата аммония, 1 мл 0,1 -ного водного раствора сульфата железа и 1 мл 0,1 ного водного раствора сульфата магния, настаивают в течение 5 минут, добавляют 6-8 мл 3 -ной соляной кислоты, перемешивают стеклянной палочкой и настаивают 15-20 минут. Надосадочную жидкость сливают, добавляют такое же количество воды, перемешивают стеклянной палочкой, центрифугируют в течение 5 минут при 1500 об/мин (600). Из полученного осадка готовят препараты для микроскопирования и микроскопируют. Преимущества предлагаемого способа перед методами Като-Миура и нативного мазка обнаружение яиц гельминтов не только крупных, но и мелких размеров обнаружение цист патогенных простейших обнаружение яиц гельминтов и цист патогенных простейших при низкой интенсивности инвазии исключена потеря возбудителей. Проведенные экспериментальные исследования по обнаружению яиц гельминтов и цист патогенных простейших в копроматериале показали, что при использовании разработанного способа количество обнаруженных патогенов увеличилось до 98 , т.е. с 10 до 98 экземпляров. 2 16516 1 2012.10.30 Количество экземпляров паразитарных агентов в одной пробе Паразитарные К-во проб агенты Способ Като-Миура Предлагаемый способ Яйца аскарид 10 66 98 Цисты лямблий 10 1-2 96 Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3