Способ определения
-каротина в молоке и молочных продуктах

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(72) Авторы Шуляковская Ольга Васильевна Воронцова Ольга Сергеевна Белышева Людмила Леонидовна Гуринович Татьяна Анатольевна Полянских Елена Ильинична(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр гигиены(56)1562854 1, 1990.1566288 1, 1990. ГОСТ 8756.22-80 (СТ СЭВ 6519-88). Продукты переработки плодов и овощей. Метод определения каротина.1723518 1, 1992. РОМАНОВ Н.А. и др. Нове в методах зоотехнчных дослджень. Частина друга. Харкв, 1992.1730578 1, 1992.1651199 1, 1991.(57) 1. Способ определения -каротина в молоке и молочных продуктах, заключающийся в том, что навеску анализируемого продукта гидролизуют 50 -ным раствором КОН, полученную смесь экстрагируют, экстракт очищают на адсорбционной колонке с силикагелем,измеряют оптическую плотность полученного элюата с помощью спектрофотометра и рассчитывают содержание -каротина в продукте. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при массе навески 15-20 г и содержании жира в продукте до 2,0 используют 3-4 см 3 50 -ного раствора КОН, при содержании жира от 2 до 10- 7-8 см 3 50 -ного раствора КОН и при содержании жира более 1010-12 см 3 50 -ного раствора КОН. Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики, а также к сельскому хозяйству и пищевой промышленности. Известен способ определения -каротина в продуктах переработки плодов и овощей,основанный на экстракции, щелочном гидролизе, очистке экстракта от мешающих определению веществ, измерении с помощью спектрофотометра массовой концентрации-каротина в сравнении с стандартным раствором 1. Способ является аналогом по отношению к заявляемому. Однако указанный способ ограничен определением -каротина только в продуктах переработки плодов и овощей. В настоящее время расширяется ассортимент обогащенных -каротином продуктов питания, в том числе молочных, в связи с чем возникает необходимость проведения анализа такой продукции. 11079 1 2008.08.30 В доступной научно-технической и патентной литературе заявителем ближайший аналог не выявлен. Задачей заявляемого изобретения является разработка способа определения -каротина в молоке и молочных продуктах с высокой точностью. Поставленная задача достигается следующим образом. Представлен способ определения -каротина в молоке и молочных продуктах, включающий щелочной гидролиз анализируемого продукта, экстракцию, очистку экстракта на адсорбционной колонке и последующее измерение оптической плотности элюата с помощью спектрофотометра и расчет содержания -каротина, при этом в качестве адсорбента используют силикагель, а также в зависимости от содержания жира в образце соответствующее количество 50 -ного раствора гидроксида калия (КОН). При этом при содержании жира в продукте до 2 используют 3-4 см 3 50 -ного раствора КОН, при содержании жира от 2 до 10 используют 7-8 см 3 50 -ного раствора КОН, а при содержании жира более 10- 10-12 см 3 50 -ного раствора КОН. Пример. Определение -каротина в молоке и молочных продуктах. 1. Щелочной гидролиз. Навеску продукта массой 15-20 г помещают в круглодонную колбу с обратным холодильником вместимостью 250 см 3, добавляют 40-60 см 3 этилового спирта, 0,1-0,2 г аскорбиновой кислоты и раствор гидроокиси калия массовой концентрацией 0,5 г/см 3, количество которого зависит от содержания жира в продукте. При низком содержании жира в молочных продуктах (до 2 ) добавляют 3-4 см 3 гидроксида калия. При более высоком содержании жира от 2 до 10(творог, жирный йогурт, сливки) добавляют 7-8 см 3 КОН, а при содержании жира больше 10- 10-12 см 3 КОН. Затем смесь нагревают на водяной бане до кипения и выдерживают в течение 30 мин, после чего охлаждают до 20 С и количественно переносят в делительную воронку. Колбу ополаскивают 50 см дистиллированной воды, которую также сливают в делительную воронку. 2. Экстракция.-каротин экстрагируют диэтиловым эфиром три раза по 25 см 3. Затем нижний (водный) слой отбрасывают. Объединенный эфирный экстракт переносят в другую делительную воронку и промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции по фенолфталеину. Промытый экстракт фильтруют в сухую круглодонную колбу через слой безводного сернокислого натрия. Далее отгоняют на роторном испарителе диэтиловый эфир под вакуумом при температуре 45 С. Сухой остаток растворяют в 5 см 3 гексана. 3. Очистка экстракта. Полученный по п. 2 экстракт -каротина (5 см 3) пропускают через адсорбционную колонку со скоростью 1,0-1,5 см 3 в минуту. Затем пропускают гексан снова до тех пор, пока не начнет выходить бесцветный элюат. Далее элюат -каротина переносят в мерную колбу вместимостью 25 или 50 см, доводят до метки растворителем. 4. Измерение оптической плотности. Оптическую плотность полученного по п. 3 раствора измеряют по отношению к гексану на спектрофотометре при длине волны 450 нм (максимум поглощения -каротина). По градуировочному графику находят массовую концентрацию -каротина (мкг/см 3). Если оптическая плотность исследуемого раствора превышает 0,45, делают соответствующее разведение. Приготовление адсорбционной колонки. В нижнюю часть стеклянной трубки адсорбционной колонки, вставленной в пробку,помещают небольшой кусочек ваты. Трубку заполняют силикагелем для хроматографии на высоту 7-10 см 3. Сверху насыпают 2 см 3 сернокислого натрия в качестве обезвоживающего вещества. Колонку промывают 10 см 3 гексана. 2 11079 1 2008.08.30 5. Обработка результатов. Массовую долю -каротинаввычисляют по формуле,10000 где С - концентрация витамина -каротина, определенная по градуировочному графику,мкг/см 3- объем элюата -каротина (п. 1), см 3- масса навески продукта, г 10000 - коэффициент пересчета на 100 г продукта. За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми в одной лаборатории не должны превышать по абсолютному значению 1 . Результаты определения -каротина в молоке и молочных продуктах представлены в таблице. Определяемое количество-каротина в молоке и молочных продуктах с помощью предлагаемого способа Продукт Биойогурт с фруктовым наполнителем, жир 1,5 Молоко детское, жир 3,2 Творог домашний, жир 9 Примечание- мутный гидролизат из-за неполного гидролиза. Достигаемый технический результат заявляемого способа заключается в том, что способ позволяет определять -каротин в молоке и молочных продуктах с высокой точностью. Источники информации 1. ГОСТ 8756.22-80. Продукты переработки плодов и овощей. Метод определения каротина. Введ. 01.01.81. - М. Издательство стандартов, 1992. - 6 с. (аналог). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3