Способ определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в продовольственном сырье или пищевом продукте

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПСИХРОТРОФНЫХ АЭРОБНЫХ И ФАКУЛЬТАТИВНО-АНАЭРОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПРОДОВОЛЬСТВЕННОМ СЫРЬЕ ИЛИ ПИЩЕВОМ ПРОДУКТЕ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(72) Авторы Дудчик Наталья Владимировна Мельникова Людмила Александровна Катулина Татьяна Алексеевна Янецкая Светлана Анатольевна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(56) БАННИКОВА Л.А. и др. Микробиологические основы молочного производства. - Москва, Агропромиздат, 1987. - С. 349. Метод выявления психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в продовольственном сырье и продуктах питания. Инструкция 235-1203. Утверждена главным санитарным врачом Республики Беларусь 14.10.2004. МОИСЕЕВА Е.Л. Микробиология мясных и молочных продуктов при холодильном хранении. - Москва Агропромиздат, 1988. - С. 39, 88, 108.. - 1982. - . 45. -2. - . 172-207.(57) Способ определения количества психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в образце продовольственного сырья или пищевого продукта,отличающийся тем, что образец исследуемого сырья или продукта инкубируют при 1821 С и 7,3 в питательной среде, содержащей в 1000 см 3 дистиллированной воды 17,9 г панкреатического гидролизата кильки, 11,2 г агара микробиологического и 7,7 г хлорида натрия, при этом осуществляют регистрацию активной проводимости среды, определяют показатель времени детекции роста микроорганизмов и по показателю, используя предварительно построенный калибровочный график, - количество микроорганизмов в образце. Изобретение относится к разделу санитарной микробиологии и гигиены питания. Известен способ определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в продовольственном сырье и пищевых продуктах, заключающийся в подготовке определенного количества исследуемого образца, посева его в питательную среду, инкубировании посевов при 5-7 С и подсчете видимых колоний на поверхности и в толще питательной среды 1. Указанный способ является прототипом по отношению к заявленному. Однако способ-прототип обладает следующими недостатками недостаточной чувствительностью, что связано со значительным временем генерации психротрофных микроорганизмов, необходимым для формирования видимых колоний на поверхности и в толще питательной среды, в связи с чем требуется длительное, до 10 суток, время проведения испытаний. 11532 1 2009.02.28 Задачей заявленного изобретения является повышение чувствительности способа,приводящее к уменьшению времени проведения испытания. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в образце продовольственного сырья или пищевого продукта, при этом образец исследуемого сырья или продукта инкубируют при 18-21 С и 7,3 в питательной среде, содержащей в 1000 см 3 дистиллированной воды 17,9 г панкреатического гидролизата кильки, 11,2 г агара микробиологического и 7,7 г хлорида натрия, при этом осуществляют регистрацию активной проводимости среды, определяют показатель времени детекции роста микроорганизмов и по показателю, используя предварительно построенный калибровочный график, - количество микроорганизмов в образце. Пример выполнения. Требуется определить количество психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в молочном продукте. Приготовление сред. Для приготовления забуференной пептонной воды 10,0 г пептона,5,0 г хлористого натрия, 9,0 г двузамещенного фосфорнокислого натрия, 1,5 г однозамещенного фосфорнокислого калия растворяют при нагревании в 1000 см 3 дистиллированной воды устанавливаюттак, чтобы после стерилизации он составлял 7,00,1. Стерилизуют при температуре 1211 С в течение 20 минут. Для приготовления питательной среды для определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов 17,9 г панкреатического гидролизата кильки, 11,2 г агара микробиологического, 7,7 г натрия хлорида растворяют при нагревании в 1000 см 3 дистиллированной воды устанавливаюттак, чтобы после стерилизации он составлял 7,30,2. Стерилизуют автоклавированием при 1211 С в течение 20 минут. Подготовка образца к исследованию. Навеску продукта перемешивают с забуференной пептонной водой, соблюдая соотношение питательной среды и массы (объема) продукта 91. Готовят исходное и ряд десятикратных разведений с использованием забуференной пептонной воды. Асептически переносят по 0,1 мл продукта и его соответствующих разведений в 1 мл питательной среды, разлитой в ячейки модуля, и инкубируют в термоинкубаторе при 18 С. Получены следующие результаты. Для определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов предложенным способом потребовалось 19 часов. Согласно предложенной формуле, количество психротрофных аэробных и факультативноанаэробных микроорганизмов составило 1,2104 КОЕ/мл. Параллельно было проведено контрольное определение психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов по способу-прототипу. Получены следующие результаты. Для выявления психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов потребовалось 9 суток. Таким образом, заявленный способ позволяет исключить этап формирования видимых колоний психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов на поверхности и в толще питательной среды за счет повышения чувствительности, что приводит к уменьшению времени, необходимого для определения психротрофных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, с 9 суток до 19 часов. Источники информации 1. Банникова Л.А. и др. Микробиологические основы молочного производства. - Москва Агропромиздат, 1987. - С. 349. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.