Способ иммунотерапии послеоперационного гнойно-воспалительного осложнения у больного с тяжелой черепно-мозговой или спинномозговой травмой

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ИММУНОТЕРАПИИ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ОСЛОЖНЕНИЯ У БОЛЬНОГО С ТЯЖЕЛОЙ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ИЛИ СПИННОМОЗГОВОЙ ТРАВМОЙ(71) Заявитель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(72) Авторы Кубраков Константин Михайлович Косинец Александр Николаевич(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(56)2326687 С 1, 2008.2088152 С 1, 1997. БЕЛОВОЛОВА Р.А. Посттравматические нарушения механизмов неспецифической резистентности, клеточных и гуморальных факторов иммунитета и их коррекция Автореф. дис. - М.,1992. - . 31-32. МАКСЮТОВА Л.Ф. Оптимизация методов комплексной иммунокоррекции при ожоговой травме с использованием церулоплазмина и ультрафиолетового облучения крови Автореф. дис. Уфа, 2002. - . 7, 21. БЛБУЛЯН А.К. Влияние аутотрансфузии ультрафиолетом облученной крови на иммунологические параметры и ионтранспортные процессы клеток крови у больных анемией и гнойно-септическими осложнениями в послеродовом периоде Автореф. дис. - Ереван,1998. - . 6, 18.(57) Способ иммунотерапии послеоперационного гнойно-воспалительного осложнения у больного с тяжелой черепно-мозговой или спинномозговой травмой, отличающийся тем,что ежедневно в течение трех дней проводят процедуры ультрафиолетового облучения крови с пропусканием ее через кювету, а затем через пять дней однократно вводят интерлейкин-2 человека рекомбинантный внутривенно в дозе 500 тыс. . Изобретение относится к области медицины и может применяться в нейрохирургии. Известны способы иммунотерапии гнойно-воспалительных осложнений после травм и нейрохирургических операций с применением тимогена, полиоксидония, беталейкина,фотогемотерапии (внутрисосудистое инфракрасное лазерное излучение), декариса 1,2,4. Прототипом предполагаемого изобретения является способ иммуностимулирующей терапии в остром периоде черепно-мозговой травмы с помощью инфракрасного лазерного излучения 20 4. 14356 1 2011.04.30 Недостатком прототипа является то, что у больных, получавших иммуностимулирующую терапию при черепно-мозговой травме с помощью инфракрасного лазерного излучения 20, отмечалось менее выраженное, чем в контрольной группе снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов, Т-хелперов, хелперо-супрессорного соотношения, функциональной активности нейтрофилов. Данный метод применяли при черепномозговой травме для профилактики гнойно-воспалительных осложнений, а не для лечения. Иммуностимулирующее воздействие инфракрасного лазерного излучения характеризуется более выраженным влиянием на показатели микроциркуляции и гемодинамики и менее выраженным иммуностимулирующим эффектом. Кроме этого, недостатком является высокая стоимость аппарата 20. Задачей предполагаемого изобретения является разработка способа комбинированной иммунотерапии гнойно-воспалительных осложнений при тяжелой черепно-мозговой и спинномозговой травме, которая, наряду с рациональной антибактериальной, сосудорегулирующей, ноотропной, дезинтоксикационной терапией, позволила бы снизить летальность и сократить сроки стационарного лечения нейрохирургических больных. Реализация данной задачи достигается тем, что кровь подвергают ультрафиолетовому облучению, а затем через 5 суток внутривенно однократно вводят рекомбинантный интерлейкин - 2 (препарат Ронколейкин) в дозе 500 тыс. . Сущность способа состоит в следующем. У нейрохирургического больного с послеоперационным гнойно-воспалительным осложнением по иммунограмме определяют наличие вторичного иммунодефицита и показания к иммунотерапии. Маятниковым способом выполняют эксфузию крови из вены больного в объеме 1-3 млкг (14020 мл) с помощью насоса аппарата ИЗОЛЬДА МД-73 М. Кровь пропускают через кювету,расположенную над ультрафиолетовым облучателем в стандартный флакон для взятия крови с консервантом глюгицир 2,2- 20 мл. Длинна волны - 254 нм, поверхностная плотность потока - 2-3 мВ/см 2. Затем осуществляют возврат крови в кровеносное русло с ее повторным облучением. Длительность процедуры 182 мин при площади кюветы, открытой для облучения, 35 см 2. Выполняют по 1 процедуре в течение 3 дней. Через 5 дней после окончания ультрафиолетового облучения крови внутривенно однократно вводят рекомбинантный интерлейкин - 2 (Ронколейкин) в дозе 500 тыс. ,который растворяют в 400 мл изотонического раствора натрия хлорида, куда предварительно добавляют человеческий сывороточный альбумин до конечной концентрации 0,10,2(т.е. 4-8 мл 10 альбумина) для стабилизации белка рИЛ-2. Раствор вводят медленно в течение не менее 6 ч. Разработанную комбинированную иммунотерапию с использованием ультрафиолетового облучения крови и рекомбинантного интерлейкина - 2 применяли у 19 больных ( группа) с гнойно-воспалительными осложнениями при тяжелой черепно-мозговой и спинномозговой травмах. Для сравнения была взята группаиз 10 больных, получавшие иммунотерапию ультрафиолетовым облучением крови, которую выполняли маятниковым способом на аппарате ИЗОЛЬДА МД-73 М в течение 3 суток. Группа- 9 больных, в этой группе с целью иммуно-коррекции назначали рекомбинантный интерлейкин - 2(Ронколейкин), который вводили внутривенно однократно по 500 тыс. . Контрольная группа включала 14 пациентов с гнойно-воспалительными осложнениями без иммунотерапии. По полу, возрасту, видам гнойно-воспалительных осложнений группы были сопоставимы. Эффективность иммунокорригирующего лечения оценивали путем сравнительного анализа клинических данных и иммунного статуса пациентов. Исследовали показатели гемограммы, иммунограммы до лечения, на 8 и 14 сутки после курса иммунотерапии. До иммунотерапии гемограммы больных в группах (табл. 1) характеризовались лейкоцитозом со сдвигом формулы влево (р 0,05), лимфопенией (р 0,05), ускорением скорости оседания эритроцитов (р 0,05). По данным лабораторного обследования, прове 2 14356 1 2011.04.30 денного до какой-либо иммунотерапии в группах выявлены следующие нарушения иммунитета снижение показателей фагоцитоза ФИ (р 0,05), ФЧ (р 0,05) повышение спонтанной (НСТсп) и снижение стимулированной (НСТст) (р 0,05) метаболической активности нейтрофилов и функционального резерва нейтрофильных фагоцитов снижение уровня лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы 3 (р 0,05), 4 (0,05), 25 (0,05)- (р 0,05) снижение ИРИ (р 0,05). У большинства больных выявлено увеличение концентрации ЦИК (р 0,05),(0,05) и снижение концентрации(0,05) по сравнению с донорами. Достоверных отличий между группами не выявлено (р 0,05)(табл. 2). Иммунокорригирующий эффект ультрафиолетового облучения крови у больныхгруппы особенно четко проявлялся в отношении неспецифической реактивности организма, возросли показатели фагоцитоза ФИ (р 0,05), ФЧ (р 0,05) и нормализовалась метаболическая активность нейтрофилов (в спонтанном и стимулированном НСТ-тесте). Увеличилось количество Т-лимфоцитов с маркерами 3, 4 и 25 (0,05). Однако они достоверно отличались от аналогичных параметров у доноров (р 0,05). Вогруппе после терапии Ронколейкином достоверно возросло количество Тлимфоцитов, экспрессирующих рецепторы (3, 4, Е-РОК) (р 0,05). Отмечалась тенденция к увеличению 25 Т-лимфоцитов и нормализация ИРИ (р 0,05). Наблюдалось также положительное влияние Ронколейкина на показатели неспецифической иммунологической резистентности (р 0,05), которые достоверно отличались от аналогичных параметров у доноров (р 0,05). Таким образом, проведенная иммунотерапия рекомбинантным интерлейкином - 2 и ультрафиолетовым облучением крови оказывала разнонаправленное влияние на клеточный, гуморальный и неспецифический иммунитет. При этом Ронколейкин преимущественно воздействовал на клеточно-опосредованный иммунный ответ, а ультрафиолетовое облучение крови - на факторы естественной резистентности. Медленное восстановление показателей иммунитета на фоне моноиммунотерапии являлось отражением подавления функциональной активности иммунитета при гнойно-воспалительных осложнениях, что подтверждалось достоверно сниженными показателями иммунограммы у больныхигрупп в сравнении с донорами (р 0,05) (табл. 2). Комбинированная иммунокоррекция предполагает одновременное или последовательное применение нескольких модуляторов, обладающих различными механизмами действия с целью устранения иммунных расстройств и увеличения эффективности традиционного лечения. С целью усиления эффекта иммунотерапии у нейрохирургических больных ( группа) с послеоперационными гнойно-воспалительными осложнениями нами предложен способ комбинированной иммунотерапии с использованием ультрафиолетового облучения крови и рекомбинантного интерлейкина - 2. Контрольное иммунологическое обследование проводили на 5 сутки после проведения ультрафиолетового облучения крови, т.к. увеличение количества Т-лимфоцитов вследствие воздействия стимулирующего фактора на пролиферацию этих клеток достигает пика к 4 дню 3. У больных повысились показатели фагоцитарной активности цейтрофилов ФЧ (р 0,05), ФИ (р 0,05), НСТст, возросло количество Т-лимфоцитов,экспрессирующих рецепторы 3 (р 0,05), 4 (0,05), 25 (табл. 2). Следовательно, ультрафиолетовое облучение крови привело к повышению функциональной активности нейтрофилов и активации рецепторного аппарата иммунокомпетентных клеток. С целью усиления пролиферативной активности иммунокомпетентных клеток в этот же день (на 5 сутки после ультрафиолетового облучения крови) внутривенно однократно вводили рекомбинантный интерлейкин - 2 (Ронколейкин). Комбинированная иммунокорригирующая терапия способствовала положительному клиническому течению воспалительного процесса, что выражалось улучшением общего состояния больных, уменьшением объективных жалоб, снижением температуры тела, по 3 14356 1 2011.04.30 вышением двигательной активности, а также уменьшением или исчезновением симптомов эндогенной интоксикации, быстрой санацией ликвора и регрессом менингеального синдрома. Положительная клиническая динамика определялась, как правило, на 6-8 сутки от начала разработанной иммунокорригирующей терапии. У большинства больных полный регресс воспалительных изменений наблюдался на 14-16 сутки от начала комбинированной иммунотерапии и был подтвержден лабораторно. На 14-16 сутки от начала иммунокорригирующей терапии проводили повторное иммунологическое обследование. При этом отмечалось достоверное увеличение содержания 3 (р 0,05), 4 (0,05), 25 (0,05), Е-РОК (р 0,05), нормализовались показатели метаболической активности нейтрофилов (снизился НСТсп, увеличился НСТст, а следовательно, и функциональный резерв нейтрофильных фагоцитов), уровня ЦИК(р 0,05), повысилась концентрация . В целом иммунологические показатели свидетельствовали о восстановлении дефектов реагирования клеточного и неспецифического звеньев иммунитета в полном объеме (табл. 2). Показатели периферической крови (табл. 1) у больных характеризовались нормализацией количества лейкоцитов (р 0,05), СОЭ (р 0,05), сегментоядерных нейтрофилов(р 0,05), увеличением лимфоцитов (р 0,05) по сравнению с показателями до лечения. Состояние иммунологической резистентности у больных контрольной группы наоборот характеризовалось усилением признаков иммунодефицита с достоверным снижением Е-РОК, 3, 4, 25, ФИ,(0,05) по сравнению с донорами (табл. 2). Положительная динамика воспалительного процесса наблюдалась не ранее чем на 10-12 сутки. Полный регресс воспалительных изменений приходился в среднем на 20-21 сутки. В контрольной группе на фоне медленного снижения количества лейкоцитов (р 0,05) наблюдалась длительно сохраняющаяся повышенная СОЭ. Таким образом, комбинированная иммунотерапия приводит к более выраженным иммунотерапевтическим эффектам. При этом иммунотропное действие распространяется на различные звенья иммунной дисфункции и приводит к значительным улучшениям показателей клеточного иммунитета и неспецифической резистентности организма. Средняя длительность пребывания больных с комбинированной иммунотерапией в стационаре - 27,3 койко-день, летальность - 5,3(умер 1 пациент). У больных без иммунотерапии период стационарного лечения - 42,9 койко-день, летальность составила 28,5(умерло 4 пациента). К положительным эффектам предполагаемого способа комбинированной иммунотерапии следует отнести то, что иммунокорригирующая терапия с помощью ультрафиолетового облучения крови и рекомбинантного интерлейкина - 2 (Ронколейкин) в дозе 500 тыс.по разработанной схеме является эффективным средством в комплексном лечении нейрохирургических больных с гнойно-воспалительными осложнениями, при тяжелой черепно-мозговой и спинномозговой травмах, влияя на все звенья иммунитета, позволяющим наряду с рациональной антибактериальной терапией, снизить летальность больных (р 0,05) и сократить сроки стационарного лечения пациентов на 15 койко-день(р 0,05). Метод характеризуется отсутствием пирогенных реакций. Дешевизна способа определяет его доступность комбинированная иммунотерапия может быть внедрена в практику любого медицинского учреждения - от Республиканского научно-практического центра до районной больницы. Палочкоядерные нейтрофилы Сегментоядерные нейтрофилы Эозинофилы Базофилы Лимфоциты Моноциты(19) После До лечения лечения(14) После До лечения лечения Примечание- отличие от доноров с р 0,05,- отличие до и после лечения с р 0,05.(9) Показатели Норма После После До лечения лечения До лечения лечения После иммуноДо иммуноДо иммунотерапии (14-16 терапии терапии сутки) После комбиПосле ультрафинированной олетового облуиммунотерачения крови пии (14-16 сут(5 сутки) ки) 26,223,91 28,254,35 52,617,97 60,214,79 50,604,27 55,664,57 34,165,75 39,425,65 22,615,29 25,946,24 19,174,29 19,943,19 17,904,40 21,503,47 1,511,08 1,520,94 78,9435,78 Примечание- отличие от доноров с р 0,05, - отличие до и после лечения с р 0,05. 14356 1 2011.04.30 Использованные источники 1. Стародубцева Е.А.и др. Иммунотерапия в комплексном лечении тяжелой черепномозговой травмы. Мат. научно-практической конф. врачей и научных работников, посвященные 60-летию Омской областной клинической больницы. - Омск, 2000. - С. 37-38. 2. Мартынов Б.В. Патогенетическое обоснование иммунотерапии внутричерепных гнойно-воспалительных осложнений (клинико-экспериментальное исследование) Дис канд. мед. наук. - СПб, 1997. - 183 с. 3. Дейл М.М, Формен Дж.К. Руководство по иммунофармакологии. - М. Медицина,1998. - 331 с. 4. Сумная Д.Б. Новые методы иммунокорекции в комплексной терапии больных с черепно-мозговой травмой. Новые технологии в здравоохранении Сборн. научн.-практ. работ врачей ЛПУ и уч. Гос. Мед. академии. - Челябинск, 2000. - С. 338-339 (прототип). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.