Способ получения производных гуанина или их кислотно-аддитивных фармацевтически приемлемых солей

суспензию ацикловира (2 О г) в су-ч ком диметилформамиде (ДМФ) 150 мл нет гревают до 60 С, в результате получают бесцветны раствор. К тепломуд раствору добавляют 3,012 г карбоксибензил-Ь-валнна (СВ 2 Ьвалин) 154 мг . 4 диметнламннопиридина (дМАП) 2,998 дициклогексилкарбодиимида (ДГК).Блед ножелтын раствор.оставляют охлажг 10 даться до комнатной температуры и перазвешивают Б течение НОЧИ Через 30 мин наблюдают выпадение белого осадкав К реакциднной смеси снова до 1 бавляют указанные количества СВ 2-Ь д 5зию перемешивают в течене двух днейр при комнатной температуред После этого суспензию отфильтро вываюта Получают 15418 г твердого вещества белого цвета Бесцветный фильтрат концентрируют, получая в результате маслянистую жидкость желтоватого цвета,ноторую очищают с по- мощью хроматографии на силикагелеЭлюЬла и днщлорметана разного состава г(О 152) В результате получают 3,751 г целевого соединения (выщод 91,1) в 1 виде белого твердого вещества. 5 о в) 25(2 Амино 1,бтдигидро 6-оксодд 9 Нпурин 9-ил)метокси-этил-Ъ-валинатд Смесь 5,0 г 2 К 2-аммо-1,Бди 1. гидро 6 оксо-9 Н-пурин 9-ил)метокси 1затора на угле (502 воды) н 50 мл ДМФД-встрвхивают в аппарате Парра при давтруютчерез слой целита и уваривают в 1 ванууме получая маспянистую жид кость. Кристаллмэацию осуществляют из смеси воды и этанола в объемном соотношении 130 После перекристаллнза 35вор. К теплому раствору добавляют 3,012 г СВ 2-Ътвалинат 154 мг ДМАП и 2,998 г ДГК. Желтоватому растворудают остыть до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи Через 30 мин наблюдают выпадение белого осадка. К реакционной смеси снова добавляют указанные количества СВ 2-Ъвалина, ДАП и ДГК и мутную суспензию перемешнвают при комнатной температуре в течение двух дней, послефильтрат концентрируют, получая жел товатую маспянистую жидкость, кото . рую очищают спомощью хроматографии на снликагеле.используя в качестве элюента смеси метанола и диклорметана различного состава (015)ь В результате получают 3,751 г целевого соединена (92,1) в виде белого твердого вещества.лоты встряхивают в аппарате Парра при давлении водорода 50 фунтов на кв.дюйм в течение дня. После этого д реакционную смесь фильтруют через слой целита и концентрируют, полу чая белое твердое вещество, которое ПЕРЕКРИСТЗГЦЕИЗОВЫВШОТ ИЗ СМЕСИ ВОДЫ р он этанолаВ результате получают 1,762 г е(6 О 0) целевого соединения в виде Чбелого порошка, тпл 150 С (усадка 1 твердого вещества) с постепенным переходом в маслянистую жидкость и разложением со вспенванием при 19500.Суслензию 1,00 г ацикловира в 80 мл сухого ДМФ нагревают до 60 С,получая бесцветный раствор. К тепло Б-му раствору добавляют 1,70 г СВ 2-В валина, 74 мг ДМАП и 1,60 г ДГК Проарачному раствору дают остыть до ком- 10 натной.температуры и затем перемешит вают его в атмосфере азота в течение2 дней. После этого к реакционной смеси снова добавляют указанные количествсуспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 днейа После этого суспензию фильтруют, отделял белы твердый осадок. Бесцветный филь трат концентрируют, остаток растворит 20ют в смеси метанола и дихлорметана и полученный раствор хроматографируют на силикагеле, используя в качестве элюента 102-ный метанол в дихлормета не В результате получают 1,10 г (52)25ро-6-оксо 9 Н-пурин-9 ил)метоксиэтилЫКбенэилокси 5 карбонл-Пвалината,200 мг-5 ногопалладиевого каталн- А заторана угле, 25 мг метанола, 25 мп ТГФ и 4,5 мл 0,5 М соляной кислоты встряхивают в аппарате Парра при давлении водорода дд фунтовна кв.дюймную смесь фильтруют через микР 0 П 0ристую-мембрану-и фильтрат концентрируют. В результате получают целевое соединение в виде вещества ГРЯ 3 нобелого цвета, т.пл. 185-188 С вычислено, С.4047 Н 6,18Суспензию 2,000 г ацикловира в 150 мл сухого ДФ нагревают до бОС,П 0 ПУчая бесцветный Раствор. К теплоМУ раствору добавляют 3,012 г СВ 20 Ъ валина, 1.54 мг ДМАП и 2998 гдгк. РЭСТВОРУ ДЗЮТ ОСТЫТЬ ДО КОМНЗТНОЙ температуры и перемешивают его в течение ночи, После этого к реакционНой СМЕСИ СНОВЗ ДОБНВЛНЮТ УКЗЗЗНЪЫЕ количества СВ 2-ВЪвалина, ДМАП и ДГК и суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 дней За тем ее фильтруют, отделяя твердое белое вещество, а фильтрат концентРИРУЮТ И ОЧРПЦЗЮТ С ПОМОЩЬЮ ХРОМЗТО графин на силикагеле, используя в-кач честве элюента смеси метанола и дид ХЛОРМЕТЗНЗ В РЗЗПИЧЪЕЫХ СООТНОШЕНИЯХ(0-15)ъ В результате получают целеВОЗ СОЕДИНЕНИЕвэтил 1 Кбензилоксн)карбонил-ВЪ-ва лината, 317 мг 5-ного палладиевого катализатора на угле, 100 мл метанола, 100 мл ТГФ и 18 мл 0,5 М соляной кислоты встряхивают в аппарате Парра при давлениводорода 50 фунтов над кв.дюйм в течение дня. Послеэтого реакционную смесь фильтруют через слой целита и концентрируют, получая твердое вещество, которое затем перекристаллизовывают из смеси воды и этанола В результате получаютцелевое соединение.(б,б ммоль) Н-карбобеивокси-Ъиэолей цина и 0,3 г молекулярного сита Васвоп тип ЗА в 580 мл сухого днметилформамида перемешивают при кометной темд пературе в атмосфере азота. Через4 дня к ней добавляют еще 1,6 гперемешивание при комнатной температуре в течение еще 7 днейс Смесь затем фильтруют Н прозрачный фильтрат концентрируют в вакууме до получения полутвердого остатка При элюировании из остатка на силикагеле 60 (ЕМ,230-00 меш. 8,5 Б 14 см) смесью 2,552 метанола и метиленхпорица получают 0,8 г (452)2-(2-амина-1,6-дигид-,ро-6-оксо-9 Н-пурин-9-ил)метоксиэтилН-(беизилокси)карбоиип-Ьизолейцината л виде белого твердого вещества,т.пл. 155-157 с.Тонкослойиая хроматография одно пятно на силикагеле при использовании в качестве подвннон фазы 102 неон/сн 2 с 1, 11 0,38,жидкостная хроматография высокого разрешения один пик на 5 ире 1 со ЬС 3 при использовании в качестве подвижной фазы 501 МеОН/НдОуЮОХ к 7,02.5 мл 0,5 н. соляной кислоты н 0,30 г. 52-ного палладия на древесном угле. Смесь гидрнруют в гидрогенизатореПарра при давлении 50 фунтов на кввлого твердого вещества, т.пл 180 182 С (сильное размягчение при температуре 150 С)Тонкослойная хроматография одно пятно на силикагеле при использовании в качестве подвижной фазы 10 МеСН 1 С 12, К 1 0,12, шгдкостиая хроматография высокого разреыенид один пик на Че 1 вараск С при использовании в качестве подаажной фазы 10 ме 0 н/н,0 /0,12 гдссоон 1007 к Ъ З 74 7Антибактериальная активность. Вирус пузырькового лишая (НЗЧ 1) анали ЗИРУЮТ В МОНОСДТОЛК КЛЕТОК ЧЕГО В 11.718стинах с несколькими ячейками. Активность соединений определяют в опытах по уменьшению количества кровяных пластинок. В этих опытах монослой клеток заражают суспензией НЗУ 1, после чего дляпредупреждеиия распространения вируса в культуре покрывают их слоем питательной агарозы в видел гепяВ спой питательной агарозы вводят затем различные количества испытуемыш соединений. Количество кровяных пластинок при каждойконцентрации выражают в процентах по.отношению к соответствующей величине в контрольном опыте и по полученным данным строят кривую зависимости степени торможения от концентрацииь По этой кривой определяют концентрацию, при которой наблюдается 50-ное торможение (ШСЗО),мкмгь которой анализ Ероводнтся по томуОпределение оральной биоусвояемости. Крысам Ьопа Еуапв через желудочный зонд, введении через нос, вводи ли испытуемые соединения в дозах, эк вивалентны 25 мгкг ацикловира Собирали мочу за 24 и 48 ч н после уль трафильтрациианализировали ее с по- 10 мощью жидкостной хроматографии высокого давленияо Оральную биоусвояемость соединений выражали в количестве (в процентах от введенной дозы) обнаруженного в моче соединения (в 15 виде ацикловнра) Соединение по - 2 от введенной до примеру вы (в моче) в виде цикловира 1-4 63 20 50 АЦВ 15 Глициловый эфир АЦВ 30 ыгАлниило- 25 вый эфир АЦВ- 3 д . р Определена торможения роста клеток млекопитающих. Способность нспытуеы соединеннй тормозить рост клеток В 98(чело- 30века) и Ь (мшей) определяли подколичеству клеток после выдержки в те-. чение трех дней стандертногоколичества клеток в растворах соединения различной концентрации. Найденное ко- 35 личество клеток сравнвали с количеством, полученным в отсутствие сое динения. Количество клеток определялиили путем прямого подсчета с последующей трипсинизацией монослоя, или 4 о путем спектрофотометрического определения количества краснтеляущпот 5 площенного клетками. Оба способа дали сопоставиые результаты. Концентрацию соединения, при кото-45 рой неблщдалось 502-ное торножеве р(1650)-по сравнению с контрольым опытом, рассчитывали или непосредст Цвенно интерполяцией из графика 8 ВИксимости логарифма концентрации соедн-Бок ния или из компьютерной п 0 гЬамЫ,тРеэультатм исследований даны в таблице.. .....цы Пример Клеточная токсичность, Х контрольным значенй при 100 мкм1. Способ получения пронэводнх гуанина общей формулы 1подвергают взаимодействию с Н-защищеннм валином или изолейцином в присутствн днциклогексилкарбодиимнда 5растворителе с последующим удалением защитной группы и выделением делено Г 0 ПРОдУкта в виде основаиия.или пере. веденем его в соль дейстА внем кисрлоты. . 2 Способ по пд о т л н ч а ю