Способ прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ТРОМБОЭМБОЛИЧЕСКОГО ОСЛОЖНЕНИЯ У БЕРЕМЕННОЙ ЖЕНЩИНЫ С ВАРИКОЗНОЙ БОЛЕЗНЬЮ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр Мать и дитя(72) Авторы Вильчук Константин Устинович Харкевич Ольга Николаевна Курлович Иван Васильевич Сергейчик Наталия Леонидовна Зубовская Елена Тарасовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр Мать и дитя(56) ШАХБАЗОВ Ш.К. Клнчна хрургя. 2009. -4. - С. 47-50. ШАХБАЗОВ Ш.К. и др. Медицинские новости Грузии. - 2008. - Т. 163.10. - С. 12-17. Российские клинические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике венозных тромбоэмболических осложнений. Флебология. - 2010. Т. 4. - Вып. 2. -1. - С. 2-20.(57) Способ прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью, включающий иследование индуцированной АДФ агрегации тромбоцитов в плазме крови беременной женщины, отличающийся тем,что индуцируют агрегацию тромбоцитов раствором АДФ с концентрацией 0,5 мкмоль/л,регистрируют кривую первичной агрегации тромбоцитов в течение 30 с и определяют угол ее наклона, индуцируют агрегацию тромбоцитов раствором АДФ с концентрацией 1,5 мкмоль/л, регистрируют кривую вторичной агрегации тромбоцитов в течение 30 с и определяют угол ее наклона и прогнозируют риск развития тромбоэмболического осложнения у беременной с варикозной болезнью при значении разности между углом наклона кривой вторичной агрегации тромбоцитов и углом наклона кривой первичной агрегации тромбоцитов от 0 до 6. Изобретение относится к медицине, а именно к разделу акушерства и лабораторной диагностики, и может быть использовано для прогнозирования риска развития тромбоэмболических осложнений у беременных женщин с варикозной болезнью. Тромбозы различной локализации, в том числе тромбоз глубоких вен нижних конечностей и тромбоэмболия легочной артерии, как проявление венозного тромбоэмболизма,являются наиболее частыми заболеваниями, которые в значительном числе случаев приводят к инвалидизирующим осложнениям и фатальным исходам. Тромбоэмболии и тромботические осложнения занимают ведущее место в структуре причин материнской 18298 1 2014.06.30 заболеваемости и смертности 1. В немалой степени это объясняется тем, что диагностика тромбоэмболических заболеваний только на основе клинических проявлений не всегда бывает точной. Часто венозный тромбоз не имеет выраженной клинической картины, а тромбоэмболия легочной артерии является первым и нередко последним манифестирующим проявлением венозного тромбоза. В настоящее время для оценки состояния сосудов и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза существуют такие методы, как контрастная венография, ультразвуковая допплерография и другие, однако высокая частота отрицательных результатов и ограниченная доступность для ежедневной клинической практики привели к разработке новых методов диагностики, основанных на результатах оценки состояния системы гемостаза. В исследованиях свертывающей системы крови преобладают рутинные методы для определения функциональной активности факторов активированное время свертывания крови (АЧТВ), протромбиновое время (ПВ), тромбиновое время (ТВ), концентрация фибриногена 2, 3. Однако оценить риск развития тромбоза с помощью рутинных тестов невозможно, так как скорость реакций практически не может увеличиваться и нет достоверных различий между низким и повышенным риском развития тромбоза 4, 5. Активация системы гемостаза, которая в последующем приводит к развитию тромбоза, сопровождается появлением в кровотоке маркеров, отражающих степень повышения гемостатического потенциала крови. Такими маркерами является определение в плазме крови растворимых комплексов мономеров фибрина (РКМФ) и Д-димера 4. Однако РКМФ и Д-димер свидетельствуют о формировании нерастворимого фибрина (сгустка крови) в сосудистом русле и его лизис (расщепление) плазмином. Указанные маркеры гемостаза прежде всего констатируют образование сгустка (тромба) и развитие тромбоза либо тромбоэмболии, а не угрозу его образования. Д-димер - это показатель уже протекающего процесса тромбообразования и фибринолиза 6. Известно, что огромная роль в активации процесса свертывания крови принадлежит сосудисто-тромбоцитарному звену гемостаза 7. Появление в циркулирующем кровотоке гиперактивных тромбоцитов, особенно на фоне артериальной гипертензии, патологии беременности, сахарного диабета, гиперлипидемии, наследственных тромбофилий способствует развитию тромбозов и тромбоэмболических состояний. Для выявления предтромботических состояний и риска развития тромбозов в клинической практике проводится изучение агрегационной активности тромбоцитов. Повышение агрегационной активности тромбоцитов способствует нарушению микроциркуляции,прежде всего в жизненно важных органах, стазу крови, выбросу из тромбоцитов биологически активных соединений, спазму сосудов и образованию на первых этапах тромбоцитарного тромба, на базе которого формируется плотный фибриновый сгусток - окончательный тромб. Исследование агрегационной функции тромбоцитов проводитсяв плазме крови пациентов на специальных приборах - агрегометрах, дающих возможность определить функциональное состояние клеток в условиях, близких к физиологическому состоянию, поскольку соблюдаются постоянный температурный режим ( 37 С), постоянная скорость перемешивания суспензии тромбоцитов, моделирующая кровообращение, интактная среда (пластиковые пробирки). Прибор дает возможность графически произвести запись агрегатограммы, изучить ее параметры, сохранить агрегатограммы в базе данных 6. Определение активности тромбоцитов чаще всего проводится с использованием агрегирующих веществ, стимулирующих процесс агрегации растворы аденозиндифосфата(АДФ) с минимальной и субпороговой концентрацией (0,5 и 1,5 мкмоль/л). Оценка гиперактивности тромбоцитов основывается на таких показателях агрегатограммы, как скорость агрегации, время агрегации и степень агрегации (максимальная агрегация). 18298 1 2014.06.30 В зависимости от концентрации АДФ при добавлении к плазме богатой тромбоцитами происходит различный процесс агрегации и дезагрегации кровяных пластинок. Агрегирующая способность тромбоцитов под влиянием АДФ обусловлена мембранной активацией рецепторови/. Повышенная агрегационная функция тромбоцитов свидетельствует об активации тромбоцитарного гемостаза и начального этапа процесса свертывания крови. Применяемые дезагреганты для терапии предтромботических состояний подавляют функциональную активность тромбоцитов, и максимальная агрегация клеток ослабляется. Однако зачастую степень агрегации ослабляется, а начальная гиперактивность тромбоцитов сохраняется повышенной. Заявителю не известен способ прогнозирования риска развития тромбозов и тромбоэмболии у беременных женщин с варикозной болезнью путем оценки углов наклона первичной агрегации (ПА) и вторичной агрегации (ВА) и вычисления разницы углов наклона за первые 30 с процесса агрегации тромбоцитов при исследования агрегационной функции тромбоцитов под влиянием индуктора аденозиндифофосфорной кислоты (АДФ) двух концентраций минимальной - 0,5 мкмоль/л и субпороговой - 1,5 мкмоль/л. Задачей заявляемого изобретения является разработка способа прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью. Поставленная задача достигается в способе прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью, включающем исследование индуцированной АДС агрегации тромбоцитов в плазме крови беременной женщины. При этом индуцируют агрегацию тромбоцитов раствором АДС с концентрацией 0,5 мкмоль/л, регистрируют кривую первичной агрегации тромбоцитов в течение 30 с и определяют угол ее наклона, индуцируют агрегацию тромбоцитов раствором АДС с концентрацией 1,5 мкмоль/л, регистрируют кривую вторичной агрегации тромбоцитов в течение 30 с и определяют угол ее наклона и прогнозируют риск развития тромбоэмболического осложнения у беременной с варикозной болезнью при значении разности между углом наклона кривой вторичной агрегации тромбоцитов и углом наклона кривой первичной агрегации тромбоцитов от 0 до 6. Способ осуществляют традиционным образом. В таблице представлены результаты собственных исследований. Сравнительная характеристика агрегационной функции тромбоцитов по разнице углов наклона ПА и ВА у беременных женщин с варикозной болезнью (ВБ) и здоровых беременных женщин (группа сравнения) Беременные женщины с ВБ Здоровые беременные женщины Индуктор АДФ Индуктор АДФ разность разность п/п 0,5 мкмоль/л 1,5 мкмоль/л 0,5 мкмоль/л 1,5 мкмоль/л углов ПА и углов ПА иПаВАПАВА ВА ВА 1 2 3 4 5 6 7 1 82 82 0 78 84 6 2 76 80 4 80 87 7 3 78 80 2 79 84 5 4 75 79 4 76 83 7 5 77 78 1 68 76 8 6 64 70 6 69 75 6 7 77 78 1 77 80 3 8 87 87 0 69 75 6 9 84 84 0 80 87 7 3 7,671,505 Р 0,01 При анализе агрегатограмм беременных женщин с варикозной болезнью выявлено,что в результате потребления тромбоцитов в агрегатах, образующихся под воздействием индукторов агрегации, скорость агрегации тромбоцитов остается повышенной и угол наклона ПА на 0,5 мкмоль/л совпадает с углом наклона ВА на 1,5 мкмоль/л от процента светопропускания. В наших исследованиях выявлено, что у беременных женщин с варикозной болезнью угол ПА составил 80,93, угол ВА - 82,48, разность углов - 1,55. У здоровых беременных женщин угол ПА составил 73,0, угол ВА - 80,67, разность углов - 7,67. Разность углов ПА и ВА у беременных женщин с варикозной болезнью достоверно отличалась от таковой здоровых беременных женщин (Р 0,01). Только у 3,45 беременных женщин с варикозной болезнью разность углов ПА и ВА составила более 5, у 96,55 она находилась в пределах 0-6. Средняя разность углов ПА и ВА здоровых беременных женщин достоверно превышала таковую беременных женщин с варикозной болезнью и составила против 6,12 (Р 0,01). Очевидно, что у беременных женщин с варикозной болезнью снижение разницы углов ПА и ВА в пределах 0-6 свидетельствует о риске развития тромбоэмболического осложнения. Таким образом, для оценки степени риска и угрозы тромбообразования у беременной женщины с варикозной болезнью большое значение имеет изучение агрегационной функции тромбоцитов под влиянием индуктора АДФ с минимальной и субпороговой концентрацией. Расчет разницы углов наклона ПА и ВА дает возможность выявить дисбаланс в тромбоцитарном звене гемостаза. Агрегационная кривая при этом отражает гиперактивность тромбоцитов и склонность к тромбобразованию. Повышение агрегационной функции тромбоцитов вызывает синдром гипервязкости,замедление кровотока, развитие вазоконстрикции, блокаду микроциркуляции и стойкое нарушение транскапиллярного обмена, что создает угрозу развития тромбогенеза тромбоХср. 18298 1 2014.06.30 зов и тромбоэмболии. Проблема профилактики тромботических осложнений остается актуальной практически во всех медицинских дисциплинах. Высокая агрегационная активность тромбоцитов в большей степени имеет прогностическое значение, когда тромбоза еще нет, но имеется риск его развития. Следовательно,оценка первичной и вторичной агрегации тромбоцитов на индуктор АДФ с минимальной и субпороговой концентрацией по разнице углов ПА и ВА в пределах 0-6 может служить фактором прогнозирования развития тромбоэмболических осложнений. Источники информации 1. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. - Кафедра КДЛ. - М., 2005. - 43 с. 2. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. - М., 2001. - 285 с. 3. Брутцова Н.А. Влияние различных факторов преаналитического и аналитического периодов на ПВ/МНО при мониторинге оральной антикоагулянтной терапии // Тромбоз,гемостаз и реология. - 2008. -2. - С. 16-21. 4. Романов С.В. Инновационный метод мониторинга системы гемостаза // Тромбоз,гемостаз и реология. - 2008. -4. - С. 18-21. 5. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. - С-Петербург, 2000. - 222 с. 6. Корнюшина Е.А., Зайнулина М.С. Нарушение системы гемостаза, методы их коррекции и исходы беременности у больных с тромбофилией и невынашиванием // Тромбоз,гемостаз и реология. - 2009. -4. - С. 71-78. 7. Макацария А.Д., Бицадзе О.В. Тромбофилические состояния в акушерской практике. - М. Медицина, 2001. - 703 с. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5