Способ прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ТРОМБОЭМБОЛИЧЕСКОГО ОСЛОЖНЕНИЯ У БЕРЕМЕННОЙ ЖЕНЩИНЫ С ВАРИКОЗНОЙ БОЛЕЗНЬЮ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр Мать и дитя(72) Авторы Вильчук Константин Устинович Харкевич Ольга Николаевна Курлович Иван Васильевич Зубовская Елена Тарасовна Сергейчик Наталия Леонидовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр Мать и дитя(57) Способ прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью, заключающийся в том, что определяют степень коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов с использованием коллагена в концентрации 20,0 мкмоль/л и при степени агрегации тромбоцитов более 58 прогнозируют риск развития тромбоэмболического осложнения. Изобретение относится к медицине, а именно к разделу акушерства и лабораторной диагностики, и может быть использовано для прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью. Тромбозы различной локализации, в том числе тромбоз глубоких вен нижних конечностей и тромбоэмболия легочной артерии, как проявление венозного тромбоэмболизма,являются наиболее частыми заболеваниями, которые в значительном числе случаев приводят к инвалидизирующим осложнениям и фатальным исходам. Тромбоэмболии и тромботические осложнения занимают ведущее место в структуре причин материнской заболеваемости и смертности 1. В немалой степени это объясняется тем, что диагностика тромбоэмболических заболеваний только на основе клинических проявлений не всегда бывает точной. Часто венозный тромбоз не имеет выраженной клинической картины, а тромбоэмболия легочной артерии является первым и нередко последним манифестирующим проявлением венозного тромбоза. В настоящее время для прогнозирования состояния сосудов известны такие способы,как контрастная венография, ультразвуковая допплерография и другие. Недостатками известных способов является высокая частота отрицательных результатов и ограниченная доступность для ежедневной клинической практики. 15738 1 2012.04.30 Известны способы диагностики, основанные на результатах оценки состояния системы гемостаза. В исследованиях свертывающей системы крови преобладают рутинные способы для определения функциональной активности факторов активированное время свертывания крови (АЧТВ), протромбиновое время (ИВ), тромбиновое время (ТВ), концентрация фибриногена 2, 3. Недостатком этих способов является то, что прогнозировать риск развития тромбоза с помощью рутинных тестов невозможно, так как скорость реакций практически не может увеличиваться и нет достоверных различий между низким и повышенным риском развития тромбоза. Активация системы гемостаза, которая в последующем приводит к развитию тромбоза, сопровождается появлением в кровотоке маркеров, отражающих степень повышения гемостатического потенциала крови. Такими маркерами являются определение в плазме крови растворимых комплексов мономеров фибрина (РКМФ) и Д-димера 4. Однако РКМФ и Д-димер свидетельствуют о формировании нерастворимого фибрина (сгустка крови) в сосудистом русле и его лизис (расщепление) плазмином. Указанные маркеры гемостаза, прежде всего, констатируют образование сгустка (тромба) и развитие тромбоза либо тромбоэмболии, а не угрозу его образования. Д-димер - это показатель уже протекающего процесса тромбообразования и фибринолиза. Известно, что огромная роль в активации процесса свертывания крови принадлежит сосудисто-тромбоцитарному звену гемостаза 6. Появление в циркулирующем кровотоке гиперактивных тромбоцитов, особенно на фоне артериальной гипертензии, патологии беременности, сахарного диабета, гиперлипидекмии, наследственных тромбофилий способствует развитию тромбозов и тромбоэмболических состояний. Для выявления предтромботических состояний и риска возникновения тромбозов в клинической практике проводится изучение агрегационной активности тромбоцитов. Повышение агрегационной активности тромбоцитов способствует нарушению микроциркуляции, прежде всего в жизненно важных органах, стазу крови, выбросу из тромбоцитов биологически активных соединений, спазму сосудов и образованию на первых этапах тромбоцитарного тромба, на базе которого формируется плотный фибриновый сгусток тромб. Известен способ исследования агрегационной функции тромбоцитов, который осуществляютв плазме крови пациентов на специальных приборах-агрегометрах, дающих возможность определить функциональное состояние клеток в условиях, близких к физиологическому состоянию, поскольку соблюдается постоянный температурный режим (37 ), постоянная скорость перемешивания, моделирующая кровообращение,интактная среда (пластиковые пробирки). Прибор дает возможность графически произвести запись агрегатограммы, изучить ее параметры, сохранить их в базе данных 4, 5. Определение активности тромбоцитов проводят с использованием агрегирующих веществ,стимулирующих процесс агрегациирастворов аденозиндифосфата (АДФ) с минимальной и субпороговой концентрацией (0,5 и 1,5 мкмоль/л), раствора адреналина (5,0 мкмоль/л),раствора коллагена (20 мкмоль/л). Однако неизвестен способ прогнозирования развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью. Задачей заявляемого изобретения является разработка способа прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью. Поставленная задача достигается в способе прогнозирования риска развития тромбоэмболического осложнения у беременной женщины с варикозной болезнью, заключающемся в том, что определяют степень коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов с использованием коллагена в концентрации 20,0 мкмоль/л и при степени агрегации тромбоцитов более 58 прогнозируют риск развития тромбоэмболического осложнения. Оценка гиперактивности тромбоцитов основывается на таких показателях агрегатограммы, как скорость агрегации, время агрегации и степень агрегации (максимальная агрегация). 2 15738 1 2012.04.30 Способ осуществляют следующим образом. С помощью стандартной методики приготавливают плазму, богатую тромбоцитами(центрифугирование цитратной крови 5 мин при 1000 об/мин), используемую для исследования агрегации тромбоцитов, и бедную тромбоцитами плазму (центрифугирование цитратной крови 20 мин при 3000 об/мин), используемую для калибровки шкалы оптической плотности и при необходимости для разведения богатой тромбоцитами плазмы до стандартного содержания клеток (200,0-250,0109/л). К плазме со стандартным количеством тромбоцитов добавляют коллаген с концентрацией 20 мкмоль/л. Регистрируют кривую агрегации тромбоцитов на агрегометре (агрегатограмма). Настоящие исследования показали, что у беременных женщин с варикозной болезнью при лечении дезагрегантами максимальная агрегация тромбоцитов под влиянием АДФ закономерно снижается, под влиянием адреналина имеет тенденцию к снижению. Однако при изучении агрегации клеток с применением в качестве индуктора коллагена авторами обнаружено неочевидное явление - максимальная агрегация тромбоцитов у беременных женщин с варикозной болезнью, несмотря на лечение дезагрегантами, остается высокой и достоверно превышает таковую здоровых беременных женщин (Р 30,001). У 93,75 беременных женщин с варикозной болезнью при использовании в качестве индуктора коллагена максимальная активность тромбоцитов была выше 58-61 . Средняя степень агрегации (максимальная агрегация) тромбоцитов у беременных женщин с варикозной болезнью составила 69,563,65 против 44,02,30 у здоровых беременных женщин. Очевидно, что превышение максимальной агрегации тромбоцитов более 58-61 на коллаген у беременных женщин с варикозной болезнью свидетельствует о риске развития тромботических осложнений. В таблице представлены результаты собственных исследований. Сравнительная характеристика агрегационной функции тромбоцитов(максимальная агрегация, ) у беременных женщин с варикозной болезнью (ВБ) и здоровых беременных женщин (группа сравнения) Беременные женщины с ВБ Здоровые беременные женщины 15738 1 2012.04.30 Таким образом, для прогнозирования степени риска и угрозы тромбообразования у беременных женщин с варикозной болезнью большое значение имеет изучение агрегационной функции тромбоцитов под влиянием коллагена. Максимальная степень агрегации под влиянием коллагена дает возможность выявить дисбаланс в тромбоцитарно-сосудистом звене гемостаза. Агрегационная кривая при этом отражает суммарный процесс активации тромбоцитов и взаимодействие их с субстратами коагуляционного гемостаза. Проблема профилактики тромботических осложнений остается актуальной практически во всех медицинских дисциплинах. Высокая агрегационная активность тромбоцитов в большей степени имеет прогностическое значение, когда тромбоза еще нет, но имеется риск его возникновения. Следовательно, оценка степени агрегации (максимальная агрегация) с уровнем более 58-61 может служить фактором прогнозирования развития тромбоза и тромбоэмболии. Источники информации 1. Макацария А.Д., Бицадзе О.В. Тромбофилические состояния в акушерской практике. - М. Медицина, 2001. - С. 703. 2. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. - М., 2001. - С. 285. 3. Долгов В.В., Свирин П.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. Кафедра КДЛ. - М., 2005. - С. 43. 4. Романов С.В. Инновационный метод мониторинга системы гемостаза//Тромбоз, гемостаз и реология. - 2008. -4. - С. 18-21. 5. ЗАО Спектроскопия, оптика и лазеры - авангардные разработки. Анализатор агрегации тромбоцитов АР 2110, паспорт. РБ.Минск, 1995. - С. 22. 6. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. - С-Петербург, 2000. - С. 222. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4