Ингибитор вируса Западного Нила

Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

61 31/14 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ИНГИБИТОР ВИРУСА ЗАПАДНОГО НИЛА(71) Заявитель Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ Республики Беларусь(72) Авторы Мишаева Нина Павловна Азарова Ирина Андреевна Щерба Виктор Васильевич(73) Патентообладатель Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ Республики Беларусь в качестве ингибитора вируса Западного Нила.(56) Азарова И.А. и др. Антибиотики и химиотерапия, 1992. - Т. 37. -8. - С. 29-31.1827251 1, 1993.1565027 1, 1996. Дьяков С.И. и др. Современные антибиотики и противовирусные препараты. - Мн. Беларусь, 1988. - С. 136-138. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Мн. Медицина, 1977. - Ч. 2. - С. 151. Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано как эффективный ингибитор вируса Западного Нила (ЗН). Известно ингибирующее действие канамицина на вирус ЗН 1. В экспериментах на белых мышах, инфицированных 100 ЛД 50 вируса ЗН, установлено, что под действием канамицина, вводимого по лечебной схеме, выживаемость животных увеличивалась на 40 по сравнению с контролем 1. Недостатком данного препарата является недостаточно высокий защитный эффект. Известно, что ингибирующее действие на вирус ЗН оказывает виразол 2. Препарат имеет широкий спектр действия, обладает эффективностью против ДНК- и РНК-содержащих вирусов. В экспериментах на белых мышах, зараженных невысокими дозами вируса ЗН,выживаемость животных увеличивалась на 50 по сравнению с контролем 2. Недостатком виразола как ингибитора вируса ЗН является его невысокая эффективность. В качестве прототипа взят антибиотик гентамицин 3. В экспериментах на животных показано, что введение гентамицина в фармакопейных и более низких дозах белым мышам, зараженным летальной дозой вируса, выживаемость их возрастала в среднем на 405163 1 50 , а в отдельных случаях, при использовании низких заражающих доз вируса, выживаемость достигала 70 и более. Недостатком прототипа является его недостаточно высокая эффективность, особенно при высоких заражающих дозах вируса (50-100 50), и значительная ото- и нефротоксичность, что ограничивает его применение. Задачей изобретения является поиск и расширение арсенала средств, эффективных в отношении вируса ЗН. Поставленная задача достигается применением ампициллина тригидрата. Ампициллин (6(-)аминофенилацетамидо-пенициллановая кислота) является полусинтетическим антибиотиком группы пенициллина общей формулы Ампициллин - антибиотик широкого спектра действия, активен в отношении граммположительных, а также ряда граммотрицательных микроорганизмов. Исследование антибиотика на токсичность показало, что внесение его в культуру клеток в дозе 2000 мкг/мл было нетоксичным. Низкая токсичность ампициллина позволяет применять его для лечения детей. В медицинской практике ампициллин назначают для лечения пневмоний, бронхопневмоний, ангин, абсцессов легких, перитонитов, холециститов, сепсиса, кишечных инфекций, инфекций мочевых путей и других заболеваний, вызванных смешанной инфекцией 4. Одной из слабоизученных инфекций в Республике Беларусь является лихорадочное заболевание, вызванное вирусом Западного Нила (ЗН). Такое экзотическое название вирус получил по месту его первого выделения (Уганда, провинция Западный Нил). На территории бывшего СССР вирус ЗН циркулирует от Беларуси на севере-западе до Закавказья и Средней Азии на юго-востоке, до Хабаровского, Приморского краев и Чукотки на востоке, встречается даже за Полярным кругом (до 73 с.ш.), где антитела к вирусу ЗН обнаружены в крови аборигенов и северных оленей. Такое широкое распространение вируса вызвано тем, что он экологически связан с птицами, при помощи которых осуществляется перенос возбудителя с мест зимовок, в том числе трансконтинентальный. На территории Беларуси зарегистрирована циркуляция вируса ЗН во всех административных областях, при этом отмечено существование сопряженных очагов ЗН, клещевого энцефалита и Укуниеми, что подтверждается данными серологических и вирусологических исследований. Ампициллин исследовали на антивирусное действие при экспериментальной ЗападноНильской инфекции в широком диапазоне доз - от 5 до 2000 мкг/на белую мышь. Все исследуемые дозы оказывали протективное действие различной степени выраженности от (20 до 70 ). Наиболее эффективной была доза, равная 500 мкг/на животное, введенная по лечебно-профилактической схеме и дающая защитный эффект 85 и выше. При этом наблюдалось увеличение средней продолжительности жизни животных в опыте по сравнению с контролем в 1,7-1,9 раза. Химиотерапевтический индекс (ХТИ) препарата равен 400. Сущность изобретения поясняется примерами. Пример 1. Исследовали ингибирующее действие ампициллина на течение экспериментального менингоэнцефалита, вызванного вирусом ЗН, у белых мышей массой 5-6 г. Две группы животных (по 20 экземпляров в каждой) инфицировали массивной дозой вируса ЗН (100 50). Одной группе зараженных мышей за 24 ч до и в течение 3 суток после заражения внутри2 5163 1 мышечно вводили ампициллин в разных дозах. Вторая группа зараженных животных служила контролем (плацебо). Выживаемость белых мышей в опытной группе составила 60-70 , при полной гибели животных в контроле. Пример 2. При снижении инфицирующей дозы вируса до 10 50 защитный эффект антибиотика возрастал. Две группы белых мышей (по 10 экземпляров) инфицировали подкожно 10 50 вируса ЗН. Одной группе (опытной) за 24 ч и в течение 4 суток после заражения вводили ампициллин внутримышечно в дозах 5 и 500 мкг/на мышь. Вторая группа животных, зараженных такой же дозой вируса (контрольная), лечения не получала. Выживаемость белых мышей в опытной группе, получавших ампициллин в дозе 5 мкг/на животное,составила 40 . Применение самой эффективной дозы (500 мкг/на мышь) увеличивало защитный эффект антибиотика до 85 и выше при полной гибели животных в контроле. Пример 3. Изучали влияние ампициллина на размножение вируса ЗН в ЦНС и в крови при экспериментальном менингоэнцефалите белых мышей. Одной группе белых мышей, инфицированных 10 50 вируса ЗН, вводили ампициллин в дозе 500 мкг/на животное в течение 4 суток. Вторая группа (контроль) антибиотик не получала. На 7 сутки, когда в контроле началась гибель животных в обеих группах, у части животных забран мозг и взята кровь, которые были исследованы на наличие вируса путем титрования интрацеребральным способом на белых мышах. Установлено, что в мозге контрольных животных, не получавших лечения, вирус интенсивно размножался,титр его был 5,2550/0,03 мл, в мозге же опытных животных титр вируса составил лишь 2,2550/0,03 мл, т.е. под влиянием ампициллина произошло снижение накопления вируса в мозге на 3,0 . Такая же картина наблюдалась и в крови - снижение титра вируса в опыте по сравнению с контролем на 3,7550/0,03 мл. Пример 4. Исследовали также антивирусные свойства ампициллина натриевой соли. Ингибирующие свойства этого препарата были гораздо ниже по сравнению с ампициллином тригидратом. Так, введение ампициллина натриевой соли в дозе 100 мкг/мышь животным,зараженным 1 50 вируса по лечебно-профилактической схеме, повышало выживаемость животных в опыте по сравнению с контролем лишь на 40 , средняя продолжительность жизни животных увеличивалась на 6 суток. Пример 5. Проявлял также четко выраженные ингибирующие свойства и в культуре клеток(клетки почек зеленой мартышки). При внесении на монослой клеток ампициллина в дозе 25 мкг/мл после заражения вирусом ЗН (лечебная схема) наблюдалось снижение цитопатического действия вируса на(75 ) по сравнению с контролем. Введение в культуру клеток ампициллина за 1,5 ч до заражения ее вирусом ЗН (лечебно-профилактическая схема) приводило к 100 -ной защите монослоя клеток от цитопатического действия вируса, в то время как в контроле наблюдалась полная деструкция монослоя клеток. Десятикратное увеличение дозы ампициллина незначительно увеличивало протективное действие антибиотика. Антивирусные свойства ампициллина оценивали по увеличению выживаемости белых мышей, средней продолжительности жизни животных, по снижению титра вируса в крови и мозге в опытной группе по сравнению с контрольной, а также по химиотерапевтическому индексу (ХТИ), который равен отношению максимально переносимой концентрации(МПК) к минимально активной концентрации (МАК). Из приведенных в примерах 1-5 данных видно, что ампициллин обладает четко выраженным ингибирующим действием в отношении вируса Западного Нила как в системе ин виво, так и в системе ин витро и превышает по всем показателям гентамицин, взятый нами в качестве прототипа (таблица). 3 5163 1 Сравнительное изучение ингибирующих свойств (6(-)аминофенилацетамидо МПК, мкг/мышь МАК, мкг/мышь ХТИ х) Суточная доза, мкг/мышь 500 400 Увеличение выживаемости животных,зараженных 100 вируса, в опыте по сравнению с контролем,60-70 40-50 Снижение титра вируса в крови в опыте по сравнению с контролем,3,75 2,25 Снижение титра вируса в мозге в опыте по сравнению с контролем,3,0 1,75 х) сравниваются наиболее эффективные суточные дозы препаратов. Увеличение ингибирующих свойств в 4 раза в 1,2 раза в 3,2 раза в 1,25 раза на 20 на 1,5 на 1,25 Таким образом, нами впервые установлено наличие у ампициллина антивирусного действия в отношении вируса Западного Нила. Антибиотик подавляет развитие вирусного менингоэнцефалита белых мышей, вызванного вирусом ЗН. Выживаемость белых мышей,зараженных вирусом ЗН и получавших в качестве лечебного препарата ампициллин, возрастала по сравнению с контролем на 60-70 при высоких инфицирующих дозах вируса(50-100 50) и на 85 и выше при применении более низких заражающих доз. Наличие высокого ингибирующего эффекта у ампициллина в отношении вируса ЗН позволяет рассматривать его как кандидата в антивирусные препараты для этиотропного лечения Западно-Нильской инфекции, поскольку химиотерапия и химиопрофилактика данного заболевания не разработана. Источники информации 1. Азарова И.А., Мишаева Н.П., Вотяков В.И., Головнева Г.П. Поиск ингибиторов вируса Западного Нила среди антибиотиков // Антибиотики и химиотерапия. - 1992. -8. - С. 29-31. 2. Дьяков С.И., Чижов Н.П., Сидоренко С.В. Современные антибиотики и противовирусные препараты в экспериментальной химиотерапии бактериальных и вирусных инфекций. - Мн. Беларусь, 1988. - С. 136-138. 3. Азарова И.А., Мишаева Н.П., Вотяков В.И. Поиск ингибиторов вируса Западного Нила среди антибиотиков // Антибиотики и химиотерапия. - 1992. -8. - С. 30 (прототип). 4. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 1983. - Т. 1. - С. 254. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4

МПК / Метки

МПК: A61P 31/14, A61K 31/43

Метки: вируса, западного, нила, ингибитор

Код ссылки

<a href="https://by.patents.su/4-5163-ingibitor-virusa-zapadnogo-nila.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Ингибитор вируса Западного Нила</a>

Похожие патенты