Способ получения производных птеридина

ОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИКГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ(323 01.10.88 или 1, обладающих способностью сенсибили(33) ВЕ зации опухолей и имеющих первичную иливторичную резистентность к химиотерапевтическим средствам. Цель создание новых активных веществ-указанного класса, Синтез ведут реакцией соединений ф-л (Н) и (Ш)(57) Изобретение касается гетероцикличе СКИХ ВЕЩЕСТВ. В ЧЕСТНОСТИ ПОЛУЧЕНИЯ ПООИЗводных птеридина общей фор-лы (Н) где Н и На замещенная в положении 2 илиГде 531434 указано выше один из 2 или 2 нуклеофильная заменяемая группа. а ДРУ гой т- значения для Р или На или также нуклеофильнозаменяемая группа Х Н или На.НЧ дч с последующими выделением целевого проЪЕЕ ШНЧП дукта. Новые вещества обладают сенсибид н 3 лизирующим действием на устойчивые к- руппа МЮ Н М-ЗТИЛЗТЭНОЛЭМИНО. М а Ч Изобретение относится к способу пол- Нт и На вместе с находящимся между к) учения новых азотсодержащих гетероцик ними атомом азота образуют Млзтип-этано- О лических соединений. имеющих ценные ламино. М-этил-изопропаноламино. зтанол- Ь фармакологические свойства. в частности к изопропанол-аминоЛ-Ш-окси-г-метил-н-про- чО способу получения производных птеридина пиЩ-этаноламино .ъ общей формулы В е атом водорода или метил 1 п О или 1. Ежи/к Н которые МОГУТ находить Применение в каче- Ц н и (СНЙНО (1) стае средства для сенсибилизации опухо- (д м ПВИ, ОТЛИЧЗЮЩИХСЯ ПЕрВИЧНОЙ ИЛИ Р Ы Ы на вторичной резистентностью к химиотера где Н и На т замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиног РУППЗадриамицину саркомньпе клетки и являются малотоксичными соединениями. 1 табл.Цель изобретения поиск способа попучения новых соединений в ряду производных птеридина. обладающих сенсибилиэирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки.Предлагаемый способ заключается в том. что соединение общей формулыгде Нт. Нз. Ед он имеют указанные значения,один из радикалов 2 угли 21 означает нуклеофильно эаменяемую группу. такую как атом галогена, например атом хлора или брома. а другой радикал 2 или 21 имеет указанные для П или На значения. или означает нуклеофильно заменяемую группу. такую как атом галогена. Например атом хлора или брома подвергают взаимодействию с соединением общей формулыРеакцию целесообразно осуществлять в среде растворителя. такого как тетрагидрофуран. диоксан. бензол. толуол, диметилсульфоксид или простой диметилгликолевьлй эфир, при 015 ОС. предпочтительно меокду комнатной температурой и температурой кипения используемого растворителя или в расплаве. При этом можно использовать акцептор кислоты, например карбонат натрия, тризтиламин или пиридин.Исходные соединения общих формул (Н) и (т) известны или могут быть получены известными методами.Ы-Ш-окси-Ег-метил-н-пропиЩ-этанопамина. Перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре и к образовавшейся суспензии прибавляют 200 мл воды. Выделившийсл продукт отсасывают. промывают водой и кристаллизуют из метанола воды в соответствии 955. .морфолина нагревают с обратным холодильнкдксъвт н течение 30 мин. Затем раствор вливают в воду. выделившийся осадок отсасывают. промывают водой и перекристаллиаоаывают из этилового эфира уксусной кислоты.П р и м е р 2. 4-М-Этил-этаноламино 2.7-бис(2.б-диметил-морфолино)-6 фенипптеридин получают из 4-(М-этил-этаноламино-2.7-дихлор-б-фенил-птеридина и 2.6-ди метил-моофолина аналогично примеру 1, Выход 81 от теоретического. точка плавления 1281 З 8 С (атанол).Выход 74 от теоретического. точка плавления 143147 С (этиловый эфир уксусной кислоты петролейный эфир).Применение соединений примеров 1-37в качестве средства для сенсибилизации опухолей с первичной или вторичной устойчивостью к химиотерапевтическим средст вам. В качестве сравнения применялся Т бензиламино-д-М-метилд-оксизтиламиноЪпиперазино-птеридитц.Действия указанных соединений исследовались на примере резистентных клеток следующим образом.Пролиферируъощие. резистентные к адриамицину саркомные клетки 5180. выделившиеся из мышей. культивировались в течение 6 дней в присутствии разных кон е центраций испытуемых веществ. Индикато ром цитотоксичного или цитостатического действия концентраций испытуемых веществ является уменьшение роста клеток или отмирание клеток. По окончании опыта косвенно определялось количество жизне способных клеток на культуру за счет установления способности жизнеспособныхформазана. определялась концентрация испытуемого вещества, способная к уменьшению количества контроля (далее куда). испытуемые вещества исследовались как в отсутствие тэдриамицина, так и в присутствии количества адриамицина(АДР) не задерживающего попиферацию в условиях культивации. Поэтому для каятдого испытуемого вещества получались значения куба(первое в присутствии АДР. т.е. КУ 5 оАДР второе в отсутствие АДР. т.е. КУ 5 о. Разница десятичных логарифмов обоих значений КУ 5 о А 1 о 9 КУ 5 оАДР является мерой повышенной цитотоксичности испытуемого вещества. вызываемой присутствием адриамицина. Кромектсго, резистентность клеток к воздействию АДР устраняется. экспоненциально растущие. устойчивые К ЭДРИЭМИЦИНУ ИЛИ ЧУВСТВИТЭЛЬНЫЭ К адриамицину клетки 5180 помещались в ППОСКОДОННЫЕ микротитровые ПЛЭСТИНКИ С 96 углублениями (2000 клеток/углубление),каждое из которых содержало 100 мкл питательной среды (НРМ-1640 с содержанием 10 эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота). Пластинки инкубировались в термостате при 37 С и относительной влажности воздуха 100 в присутствии 5 двуокиси углерода. Поистечении 24 ч добавлялось на углубле ние 50 мкл питательной среды. содержащей разные концентрации испытуемого вещества. и 50 мкл питательной среды без адриамицина или с ЗДПИЗМИЦИНОМ- В ТЕЧЕние 6 дней культи-зашли пипеткой подевали в каждое углубление 50 мкл раствора тетраэолиевой соли Б мг бромида З-АМБ-диметилтиазол-2-ил-2 Жн-диаренилтетраэолия на солевой раствор с фосфатным буфером. разбавленный до использования средой НРМ 11640 в объемном соотношени 75. После д-часовой инкубации культурная среда осторожно отсасывалась и образовавшийся внутри клеток формазан солюбилизировался добавлением 150 мкл Диметилсульфоксида/углубление. Пластинки кратковременно встряхивались и измерялась оптическая плотность при 570 нм с помощью фотометра(Динвтех МН-БОО. Образование формазеъта путем восстановления тетразолиевой соли пропорционально количеству жизнеспособных клетокдопъгченные в результате трехкратного анализа средние значения использовались для подсчета значений КУЫ)Результаты оп ыта приведены в таблице.Данные таблицы подтверждают. что птеридины общей формулы (г) отличаются ярковыраженным сенсибипизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и поэтому в комбинации с алкалоидами из ШЫСА. апиподофиллотоксиналли или антибиотиками, тактами как даунорубицин. доксорубицин, блеомицин. митрамицин или митомаа-цин годятся для леЧеНИЯ НЕОПЛЗСТИЧНЫХ ЗЭОЛЭВЗНИЙ ДЛЯ ТОГО. чтобы устранить их устойчивость к соответствующей химиотераптаи и таким образом обеспечить ослабление опухолей, устойчивых к этим веществам. Птеридины формулы(1) совместно с химиотерапевтическим средством предотвращают то. что устойчивые к терапии субпопуляции опухолей могут пережьтватьттерапию и таким образом вызывать рецидив.Производные птеридина сроомуль (П) относятся к категории малотоксичных веществ. яСпособ получения производных птеридина общей формулыгде Н и Кв замещен-иная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиногч руппа .Щ и 122 вместе с находящимся между ними атомом азота образуют М-этил-этаноламино. М-етил-изопропаноламино. этанолиаопропаноламино.М-(2-окси-2-метил н-пропиЩ-этаноламино34 ДОДОРОД ИЛИ МЗТИП один из радпкапов 21 или 21 нуклео П. 0 или 1. фипьно заменяеълая группа. а другой ради о т л и ч а ющ и й с я тем. что соединение кап 2 или 21 имеет указанные для Я или На общей формулы значения или означает также нуклеофильд д 5 ную заменяемую группу. подвергают взаи м - На. модействию с соединением общей формулыЧ, СННт-гб Н - Х. ц ища, где Х имеет указанные значения Е или На. сПОСЛЕДУЮЩИМ выделением ЦВЛЗВОГО прогде 81. На. Ед и п имеют указанные значения 10 дукта.Нет активности даже концездиьт. и т 100 мкг/мл. Составитель Д. Плутицкии Редактор Т. Лазоренко Техред Мморгентал Корректор Е. Кравцова Заказ 779 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при гкнт СССР 113035. Москва. Ж-ЗБ. Раушская наб ПЕ Производственнед-издательский комбинат Пата г пентод. члГагярмя. 101