Устройство для выращивания биопленки

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ УСТРОЙСТВО ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ БИОПЛЕНКИ(71) Заявитель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(72) Авторы Окулич Виталий Константинович Кабанова Арина Александровна Плотников Филипп Викторович(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(57) Устройство для выращивания биопленки, состоящее из двух металлических круглых пластин, одна из которых имеет круглые отверстия, с пластиной между ними и покровных стекол, отличающееся тем, что пластины имеют диаметр 7 см и выполнены из нержавеющей стали, одна из пластин имеет 4 равноудаленных от центра круглых отверстия, на которые располагают покровные стекла, а сверху покрывают цельной пластиной из латекса толщиной 0,2 мм.(56) 1. Тец Г.В. Роль внеклеточной ДНК и липидов матрикса во взаимодействии бактерий биопленок с антибиотиками Автореф. дис.канд. мед. наук. - Спб, 2007. - 21 с. 2./. -, 2005 (прототип). Фиг. 2 Устройство относится к медицине, а именно к клинической микробиологии, и позволяет оптимизировать методику выращивания биопленки, образуемой бактериями - возбудителями инфекционных процессов, с целью изучения ее свойств. Известно устройство для формирования биопленки, состоящее из покровных стекол,погруженных в чашку Петри с микробной взвесью через сутки стекла извлекают, биопленка, фиксированная на стекле, подвергается изучению. Недостатки данного устройства состоят в том, что микроорганизмы фиксируются к обеим поверхностям стекла, что требует очистки одной из сторон перед проведением визуальной оценки биопленки при из 84202012.08.30 влечении стекол из чашки Петри происходит смазывание биопленки, что в дальнейшем искажает результаты изучения ее строения и свойств 1. Известно устройство для выращивания биопленки, состоящее из двух алюминиевых пластин 138 мм в диаметре и 5 мм толщиной с силиконовой пластиной между ними диаметром 138 мм и 1 мм толщиной. В верхней алюминиевой и силиконовой пластинах имеется 12 отверстий диаметром 17 мм, расположенных в шахматном порядке. В нижней алюминиевой пластине сформировано 12 углублений диаметром 25 мм и 0,1 мм глубиной,соответствующих размерам покровных стекол. Устройство готовят к работе следующим образом на нижнюю алюминиевую пластину в углубления помещают 12 покровных стекол, накрывают силиконовой пластиной, а затем верхней алюминиевой пластиной так,чтобы отверстия в пластинах совпадали между собой и с покровными стеклами. С помощью 6 болтов конструкцию фиксируют. Устройство помещают в чашку Петри со взвесью микроорганизмов на сутки, затем устройство извлекают. Биопленка, полученная на покровном стекле, может быть подвергнута дальнейшему изучению одним из методов 2. Недостатками способа являются алюминиевые пластины неустойчивы к химическим соединениям силиконовые пластины труднодоступны трудоемкость формирования углублений в базовой пластине несоответствие размеров конструкции стандартной стеклянной чашке Петри. Задачей предлагаемой полезной модели является разработка более простого, удобного в применении, доступного и наименее затратного устройства для выращивания биопленки. Поставленная задача достигается за счет того, что используют пластины диаметром 7 см, выполненные из нержавеющей стали, при этом одна из пластин имеет 4 равноудаленных от центра круглых отверстия, покровные стекла располагают на отверстия и покрывают цельной пластиной из латекса толщиной 0,2 мм. Полезная модель поясняется следующими графическими материалами. На фиг. 1 изображено устройство в разобранном виде, где 1 - цельная пластина из нержавеющей стали, 2 - латексная пластина, 3 - покровные стекла, 4 - пластина из нержавеющей стали с отверстиями. На фиг. 2 изображено устройство в собранном виде. Предлагаемая полезная модель состоит из двух круглых пластин из нержавеющей стали диаметром 7 см и 0,5 мм толщиной (1, 4 - фиг. 1 1, 4 - фиг. 2), цельной латексной пластины 0,2 мм толщиной (3 - фиг. 1, 3 - фиг. 2) и покровных стекол размером 1818 мм,толщиной 0,1 мм (2 - фиг. 1, 2 - фиг. 2). Одна из пластин из нержавеющей стали имеет 4 круглых отверстия диаметром 14 мм, равноудаленных от центра (4 - фиг. 1, 4 - фиг. 2),что позволяет в последующем получать одинаковые по своим характеристикам биопленки на всех 4 покровных стеклах. На пластину из нержавеющей стали с отверстиями, непосредственно на отверстия, кладут четыре покровных стекла (2 - фиг. 1, 2 - фиг. 2), предварительно стерилизованных этиловым спиртом. Далее стекла покрывают латексной пластиной (3 - фиг. 1, 3 - фиг. 2) и цельной пластиной из нержавеющей стали (1 - фиг. 1, 1 фиг. 2). Устройство фиксируют по окружности пластмассовыми канцелярскими скрепками и переворачивают отверстиями кверху. Устройство работает следующим образом. Устройство помещают в стерильную стеклянную чашку Петри отверстиями кверху. Готовят взвесь микроорганизмов в бульоне Мюллера-Хинтона с плотностью 0,5 единиц оптической плотности, определенной с помощью денситометра, что соответствует концентрации микроорганизмов 1,5108 КОЕ/мл. В чашку Петри с устройством вносят 1 мл микробной взвеси и 10 мл бульона Мюллера-Хинтона и инкубируют в термостате при 37 С в течение 24 часов. Затем устройство осторожно извлекают из чашки Петри, высушивают при комнатной температуре и отделяют покровные стекла от металлических пластин. В результате формируется биопленка микроорганизмов, фиксированная к покровному стеклу с одной стороны в границах отверстий верхней пластины из нержавеющей стали. 2 84202012.08.30 Положительный эффект предложенного устройства состоит в том, что исходные материалы доступны для всех микробиологических лабораторий. Предложенное устройство соответствует размерам стеклянной чашки Петри, наиболее часто используемой в микробиологических лабораториях, и не требует длительных и трудоемких этапов изготовления. Применение предлагаемого устройства позволяет стандартизировать методику формирования биопленок на покровных стеклах и сделать ее удобной в применении, т.к. позволяет изучать биопленки практически сразу после извлечения конструкции из чашки Петри с микроорганизмами. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3