Способ пересадки слизистой трахеи

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СПОСОБ ПЕРЕСАДКИ СЛИЗИСТОЙ ТРАХЕИ(73) Патентообладатели НИИ радиационной медицины,Витебский государственный медицинский университет,Белорусский государственный институт усовершенствования врачей(71) Заявители НИИ радиационной медицины,Витебский государственный медицинский университет, Белорусский государственный институт усовершенствования врачей(57) Способ пересадки слизистой трахеи, включающий трансплантацию в область раневой поверхности дыхательной трубки эпителиального покрова, отличающийся тем, что в качестве трансплантата используют культуру аутоэксплантата, которую инокулируют в область раневой поверхности. Изобретение относится к медицине, в частности к пластической хирургии и трансплантологии. Известен способ трансплантации лоскутов аутологичной слизистой дыхательных путей на раневую гранулирующую поверхность гортани и трахеи для предупреждения развития рубцовых стенозов и сохранения нормального воздухотока с помощью свободных слизистых трансплантатов, фиксирующихся к раневой поверхности окрашенным индоцианиновым зеленым альбумином, активированным диодным лазером 1. Однако приведенный выше способ пересадки слизистой трахеи требует наличия значительных размеров лоскутов слизистой дыхательных путей, отсепаровывание которых является технически сложной и трудоемкой процедурой. Тем более удаление эпителиального покрова на значительном протяжении с донорских участков дыхательных путей может осложняться кровотечением и развитием избыточной грануляционной ткани, что неблагоприятно сказывается на течение послеоперационного периода. Кроме того, при травмах,ожогах, других поражениях дыхательной трубки не всегда возможно перемещение лоскутов слизистой из-за выраженного воспалительного процесса, склерозирования подслизистой оболочки, отсутствия необходимой площадки неповрежденного эпителиального покрова. Недостатком прототипа является невозможность использования указанного способа при протяженных поражениях трахеи и гортани, особенно при обширных циркулярных ранах, когда забор достаточных для трансплантации участков эпителиального покрова затруднен, тем более при использовании эндоскопического оборудования и инструментария. Задачей исследования явилась разработка операции пересадки культуры ткани слизистой оболочки дыхательных путей на раневую поверхность трахеи для устранения указанных выше недостатков. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ пересадки слизистой трахеи,включающий трансплантацию в область раневой поверхности дыхательной трубки эпителиального покрова,1 3261 1 отличающийся тем, что в качестве трансплантата используют культуру аутотрансплантата, которую инокулируют в область раневой поверхности. Сущностью изобретения является то, что для закрытия обширных раневых поверхностей дыхательной трубки берут небольшое количество эпителиальных клеток слизистой воздухоносных дыхательных путей,которые культивируют и затем инокулируют инъекционным способом эндоскопически или интраоперационно в область раневой поверхности. Полная регенерация слизистой оболочки трахеи наступает через 2-3 недели после инокулирования аутоэксплантата. Преимущество данного способа заключается в том, что для закрытия раневого дефекта используются незначительные по площади лоскуты слизистой трахеи, закрывающие всю поврежденную поверхность, а не большие аутотрансплантаты, фиксация которых к раневой поверхности очень сложна и требует закрепления их на ране в шахматном порядке окрашенным индоцианиновым зеленым альбумином, активированным диодным лазером. Пример 1. Техника операции инокуляции культуры ткани слизистой трахеи. Этап 1. Получение культуры слизистой. До операции осуществляют забор фрагментов аутослизистой оболочки трахеи в стерильные питательные среды в асептических условиях и культивируют аутоклетки в течение 5-7 суток. Этап 2. Инокуляция суспензии клеток культуры аутослизистой трахеи. После мобилизации деэпителизированного участка трахеи (см. контрольную группу) его рассекают перпендикулярно продольной оси и в раневую поверхность краниального и каудального сегментов трахеи с помощью одноразового шприца с иглой на глубину 1-2 мм вводят культуру ткани слизистой оболочки трахеи через 0,5-0,7 см в шахматном порядке. Целостность трахеи восстанавливают узловыми швами. Пример 2. Техника эндоскопической инокуляции культуры ткани слизитой трахеи. Этап 1. Получение культуры слизистой. До операции осуществляют забор фрагментов аутослизистой оболочки трахеи в стерильные питательные среды в асептических условиях и культивируют аутоклетки в течение 5-7 суток. Этап 2. Эндоскопическая инокуляция суспензии клеток культуры аутослизистой трахеи. Под общим наркозом эндотрахеально вводят ригидный или волоконный бронхоскоп, осматривают деэпителизированный участок трахеи и в раневую поверхность эндоскопическим инъектором на глубину 1-2 мм инъецируют культуру ткани слизистой оболочки по всей окружности поврежденной дыхательной трубки через 0,5-0,7 см в шахматном порядке. После завершения манипуляций бронхоскоп извлекают. Послеоперационные клинические наблюдения, эндоскопическое, рентгенологическое и морфологическое исследования показали, что все животные, находящиеся под наблюдением до 30 суток (17 собак), периодически кашляли, эндоскопически (видеотрахеоскопия) и рентгенологически (контрастная трахеобронхография) у трех животных наблюдали сужение оперированного участка трахеи до 10 от первоначального просвета трахеи. У остальных 14 собак в течение 2-3 недель послеоперационного периода после инокуляции аутоэксплантата слизистой дыхательных путей отмечали полную эпителизацию раневой поверхности, сужения просвета трахеи в области подсадки слизистой не отмечали. Морфологическое исследование показало, что введенная культура клеток в большинстве случаев быстро развивается в слизистой оболочке и грануляционной ткани с формированием солидных и псевдожелезистых структур с микрозонами некрозов по периферии и умеренной лимфогистиоцитарной инфильтрацией в прилежащих участках слизистой оболочки. Инокуляция культуры клеток приводит к значительному ускорению процессов созревания и дифференцировки как эпителиального, так и соединительнотканного компонентов слизистой оболочки трахеи, в результате чего через 2-3 недели после пересадки наблюдается почти обычная структура слизистой оболочки,содержащая наряду с железами большое число микрососудов. Контрольная группа. Операция деэпителизации шейного участка трахеи. Под нембуталовым наркозом, из расчета 35 мг/кг веса реципиента, по срединной линии шеи производят продольное рассечение тканей до трахеи. После рассечения претрахеальной фасции и мобилизации шейного участка трахеи поперечно пересекают трахею по межкольцевидной связке до мембранозной части. После этого глазным скальпелем и ножницами циркулярно иссекают слизистую оболочку с хрящевых полуколец и соответствующих им участков мембранозной части вначале с краниального фрагмента дыхательной трубки, затем с каудального. После этого отдельными узловыми швами восстанавливают целостность трахеи. Послеоперационные исследования показали, что у всех 7, находящихся под наблюдением до 30 суток,прооперированных животных в послеоперационном периоде наблюдался кашель, эндоскопически (видеотрахеоскопия) и рентгенологически (контрольная трахеобронхография) отмечалось разрастание грануляционной ткани с развитием грануляционных и рубцовых стенозов в зоне деэпителизации. При микроскопиче 2 3261 1 ском исследовании препаратов трахеи отмечалось разрастание грануляционной ткани, отсутствие желез при наличии слизистой оболочки, определяющейся по краям зоны деэпителизации, эпителиальная выстилка носила псевдомногорядный характер с участками десквамации эпителия. Полной эпителизации раневой поверхности не наступило на всех сроках наблюдения. Следовательно, результаты, полученные в данной серии экспериментов, подтверждают возможность культивирования слизистой дыхательных путей и последующей ее инокуляции на раневую поверхность дыхательной трубки, что способствует регенерации эпителиального покрова на пораженной поверхности и препятствует образованию грануляционных и рубцовых стенозов трахеи. Таким образом, разработанный способ пересадки слизистой дыхательных путей позволяет добиться полной эпителизации раневой поверхности трахеи с сохранением обычной структуры слизистой и требует для осуществления указанных манипуляций забора небольших кусочков слизистой дыхательной трубки, что может быть осуществлено как интраоперационно, так и эндоскопически. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.