Производные хинолина, способы их получения, фармацевтическая композиция и способ лечения с их использованием

(71) Заявитель АКТИВЕ БИОТЕХ АВ(73) Патентообладатель АКТИВЕ БИОТЕХ АВ(57) 1. Производные хинолина общей формулы 5 3 где- метил, этил, нормальный пропил, изо-пропил, нормальный бутил или аллил- метил, метокси, фтор, хлор, бром, трифторметил или ,где- целое число от 0 до 2, - целое число от 1 до 3, при условии, что 3- водород, фтор или хлор, причем- фтор или хлор, только если- фтор или хлор 4 - водород или фармацевтически приемлемый неорганический или органический катион 5 - этил, нормальный пропил, изо-пропил, метокси, этокси, хлор, бром, трифторметил,или 2,где- целое число от 0 до 2, - целое число от 1 до 3, при условии, что 3 6 - водород или 5 и 6 вместе представляют собой метилендиокси,или любой их таутомер. 7600 1 2005.12.30 2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемыми неорганическими катионами являются катионы натрия, калия или кальция, а органическими катионами являются катионы моноэтаноламина, диэтаноламина, диметиламиноэтанола или морфолина. 3. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что 5 представляет собой этил, метокси, хлор или трифторметил. 4. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что 5 и 6 вместе представляют собой метилендиокси. 5. Соединение по любому из пп. 1-4, отличающееся тем, чтопредставляет собой метил или этил. 6. Соединение по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, чтопредставляет собой метокси, фтор, хлор или трифторметил, еслипредставляет собой водород. 7. Соединение по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, чтопредставляет собой мета- или пара-фтор, если- орто-фтор. 8. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -этил(3 фторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 9. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -метил-(2,4-дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 10. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -метил-(2,5-дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 11. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -метил-(2,5-дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 12. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -метил-(4-трифторметилфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3 карбоксамид. 13. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что представляет собой -метил-(2,4-дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5,6-метилендиокси-1-метил-2-оксохинолин-3 карбоксамид. 14. Соединение общей формулыпо п. 1 в качестве лечебного средства для лечения болезней, возникающих в результате аутоиммунной реакции или патологического воспаления. 15. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, возникающих в результате аутоиммунной реакции или патологического воспаления, содержащая в качестве активного вещества соединение общей формулыпо п. 1 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель. 16. Фармацевтическая композиция по п. 15, отличающаяся тем, что дополнительно содержит другие фармакологически активные вещества. 17. Способ получения соединения общей формулыпо п. 1 путем взаимодействия сложного эфира хинолинкарбоновой кислоты общей формулы 3 где,иимеют значения, указанные в п. 1,с анилином общей формулы 4 где ,иимеют значения, указанные в п. 1,в соответствующем растворителе, в частности толуоле или ксилоле. 18. Способ получения соединения общей формулыпо п. 1 путем взаимодействия хинолинкарбоновой кислоты общей формулы 5 46 3 где,иимеют значения, указанные в п. 1,с анилином общей формулы 4 где ,иимеют значения, указанные в п. 1,с использованием соответствующего конденсирующего агента, предпочтительно карбодиимида или хлористого тионила, в присутствии триэтиламина в подходящем растворителе, в частности дихлорметане. 19. Способ лечения млекопитающего, страдающего заболеваниями, возникающими в результате аутоиммунной реакции или патологического воспаления, включающий введение млекопитающему соединения общей формулы 5 3 где- метил, этил, нормальный пропил, изо-пропил, нормальный бутил или аллил- метил, метокси, фтор, хлор, бром, трифторметил или ,где- целое число от 0 до 2, - целое число от 1 до 3, при условии, что 3- водород, фтор или хлор, причем- фтор или хлор, только если- фтор или хлор 4 - водород или фармацевтически приемлемый неорганический или органический катион 5 - этил, нормальный пропил, изо-пропил, метокси, этокси, хлор, бром, трифторметил,или 2,где- целое число от 0 до 2, - целое число от 1 до 3, при условии, что 3 6 - водород или 7600 1 2005.12.30 5 и 6 вместе представляют собой метилендиокси,или любого его таутомера. 20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемыми неорганическими катионами являются катионы натрия, калия или кальция, и органическими катионами являются катионы моноэтаноламина, диэтаноламина, диметиламиноэтанола или морфолина. 21. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что 5 представляет собой этил, метокси, хлор или трифторметил. 22. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что 5 и 6 вместе представляют собой метилендиокси. 23. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, чтопредставляет собой метил или этил. 24. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, чтопредставляет собой метокси,фтор, хлор или трифторметил, еслипредставляет собой водород. 25. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, чтопредставляет собой мета- или пара-фтор, если- орто-фтор. 26. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -этил(3-фторфенил)1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 27. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -метил(2,4 дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 28. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -метил(2,5 дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 29. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -метил(2,5 дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 30. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -метил(4 трифторметилфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 31. Способ по п. 19 или 20, отличающийся тем, что вводят -метил(2,4 дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5,6-метилендиокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксамид. 32. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих рассеянным склерозом. 33. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих инсулинозависимым сахарным диабетом. 34. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих системной красной волчанкой. 35. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих ревматоидным артритом. 36. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих воспалительным заболеванием кишечника. 37. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих псориазом. 38. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих воспалительным респираторным заболеванием, таким как астма. 39. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих атеросклерозом. 40. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих припадками. 41. Способ по любому из пп. 19-31, отличающийся тем, что лечат млекопитающих,страдающих болезнью Альцгеймера. 42. Способ по п. 19, отличающийся тем, что включает введение активного вещества в суточной дозе от 0,0005 мг/кг до 10 мг/кг массы тела млекопитающего. 4 7600 1 2005.12.30 Данное изобретение относится к новым производным хинолин-3-карбоксиамида, к способам их получения и композициям, содержащим эти производные, которые пригодны для клинического лечения болезней, возникающих в результате аутоиммунной реакции,таких как рассеянный склероз, инсулинозависимый сахарный диабет, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, воспаление кишок и псориаз, и, кроме того, болезней, в которых главную роль играет патологическое воспаление, таких как астма, атеросклероз,припадки и болезнь Альцгеймера. Более конкретно данное изобретение относится к новым производным хинолина, пригодным для лечения, например, рассеянного склероза и его проявлений. Аутоаллергические болезни, например рассеянный склероз, инсулинозависимый сахарный диабет, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, воспаление кишок и псориаз, представляют собой атаки иммунной системы организма, которые могут быть системными по природе или же направленными на отдельные органы тела. Они представляются заболеваниями, при которых иммунная система совершает ошибки и вместо опосредования защитных функций становится агрессором. Рассеянный склероз является наиболее распространенной приобретенной неврологической болезнью молодых взрослых людей в Западной Европе и Северной Америке. Он в большей степени, чем любое другое неврологическое заболевание в этой возрастной группе, вызывает утрату трудоспособности и финансовые потери, выражаемые как в упущенном доходе, так и в расходах на медицинское обслуживание. В США наблюдается примерно 250000 случаев этого заболевания. Хотя причина рассеянного склероза неизвестна, успехи изучения головного мозга, иммунологии и молекулярной биологии расширили понятие исследователей об этой болезни. Для лечения рассеянного склероза в настоящее время применяются несколько методов терапии, но ни один из них не показал ярко выраженной терапевтической эффективности. Современная терапия рассеянного склероза подразделяется на три категории терапия резких обострений, модуляция прогрессирующей болезни и терапия характерных симптомов. Рассеянный склероз поражает центральную нервную систему и вызывает демиелинизацию, то есть миелиновые оболочки теряются, а аксоны сохраняются. Миелин является изолирующим веществом, способным быстро проводить нервные импульсы. Очевидно,что при демиелинизации это свойство теряется. Хотя развитие патологического процесса при рассеянном склерозе не понято, некоторые факты свидетельствуют, что демиелинизация имеет иммунопатологическую основу. Патологические изменения (бляшки) характеризуются инфильтрацией иммунологически активных клеток, например, макрофагов и активированных лимфоцитов. В патентах США 4547511 и 4738971 и в Европейском патенте 0059698 некоторые производные -арил-1,2-дигидро-4-замещение-1-алкил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамида заявляются в качестве усилителей клеточно-опосредованного иммунитета. К этому ряду соединений относится мета,7600 1 2005.12.30 известное как рохинимекс (индекс Мерка 12 ,84182616, -фенил-метил-1,2-дигидро-4-гидрокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид). Рохинимекс описан как имеющий множественную иммуномодуляторную активность, не сопровождаемую общей иммунодепрессией. Кроме того, в патенте США 5580882 производные хинолин-3-карбоксиамида заявляются в качестве средств, пригодных для терапии состояний, сопутствующих рассеянному склерозу. Особо предпочтительным соединением назван рохинимекс. В патенте США 5594005 производные хинолин-3-карбоксиамида заявляются в качестве средств, пригодных для лечения диабета 1 типа. Особо предпочтительным соединением назван рохинимекс. В 95/24195 производные хинолин-3-карбоксиамида заявляются в качестве средств, пригодных для лечения воспаления кишок. Наиболее предпочтительными соединениями названы рохинимекс или его соль. В 95/24196 производные хинолин-3 карбоксиамида заявляются в качестве средств лечения псориаза. Наиболее предпочтительными соединениями названы рохинимекс или его соль. При сравнительных клинических испытаниях с плацебо рохинимекс описан как подающий надежды в терапии состояний, сопутствующих рассеянному склерозу. Имеется,однако, несколько серьезных недостатков, связанных с рохинимексом. Например, установлено, что рохинимекс обладает тератогенным действием на крыс и вызывает у людей побочные эффекты, ограничивающие дозу, например синдром, подобный гриппу, что препятствует использованию полного клинического потенциала соединения. Кроме того, в 92/18483 заявляются производные хинолина, замещенные в 6-й позиции группой( - низший алкил или арил 0-2), причем утверждается, что они обладают иммуномодулирующим, противовоспалительным и противораковым действием. Замещение, то есть тип и структура вышеуказанных ранее известных соединений, располагает их за пределами объема данного изобретения. Основной целью данного изобретения является создание соединений хинолина с новой структурой, которые вследствие их фармакологической направленности при высокой эффективности экспериментальных образцов и низком уровне побочного действия могут приобрести большое значение для лечения болезни, возникающей в результате аутоиммунной реакции и патологического воспаления. Примерами таких болезней являются рассеянный склероз, инсулинозависимый сахарный диабет, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, воспаление кишок, псориаз, а также другие болезни, в которых главную роль играет воспаление, например астма, атеросклероз, припадки и болезнь Альцгеймера. Более конкретно данное изобретение относится к новым производным хинолина, пригодным для лечения, например, рассеянного склероза и его проявлений. Термин лечение , используемый здесь, включает профилактику, а также ослабление симптомов болезни. В настоящее время установлено, что новые соединения с общей формулой 5 7600 1 2005.12.30 выбирается из метила, метокси, фтора, хлора, брома, трифторметила и,где 0-2 у 1-3 с условием, что ху 3 выбирается из водорода, фтора и хлора с условием, чтовыбирается из фтора и хлора только в том случае, когдавыбирается из фтора и хлора 4 выбирается из водорода и приемлемых в фармакологии неорганических катионов,например натрия, калия и кальция, и органических катонов, например моноэтаноламина,диэтаноламина, диметиламиноэтанола, морфолина и т.п. 5 выбирается из этила, нормального пропила, изо-пропила, метокси, этокси, хлора,брома, трифторметила,и 2,где 0-2,у 1-3 с условием, чтоу 3 6 представляет водород или 5 и 6 вместе представляют метилендиокси,эффективны и специфичны при лечении лиц, страдающих аутоаллергическими и воспалительными болезнями. Соединения с общей формулоймогут существовать в различных таутомерных формах и все такие формы, где бы они не существовали, сюда включаются. В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения 4 выбирается из водорода и натрия,5 выбирается из метила, метокси, хлора и трифторметила,5 и 6 вместе представляют метилендиокси, выбирается из метила и этила, выбирается из метокси, фтора, хлора и трифторметила, когдапредставляет водород, ивыбирается из - и -фтора при условии, чтопредставляет -фтор. Среди большого количества предпочтительных соединений с общей формулойданному изобретению наиболее соответствуют-метил(4-метокси-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-трифторметил-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид. Некоторые аутоаллергические болезни человека имеют экспериментальные модели,которые спонтанно встречаются в определенных наследственных чертах лабораторных животных или могут быть вызваны в лабораторных животных путем иммунизации специфическим антигеном (антигенами) из органа-мишени. До сих пор наиболее широко используемой моделью рассеянного склероза у человека был экспериментальный аутоаллергический энцефаломиелит - модель аутоаллергических воспалительных заболеваний центральной нервной системы. В определенных наследственных чертах мышей или крыс можно экспериментально вызвать аутоиммунную реакцию на коллагентипа и это может привести к развитию полиартрита. Артрит, вызываемый коллагеном, имеет некоторые особенности, общие с ревматоидным артритом у человека. Признаком астмы у человека является повышенная реактивность дыхательных путей на широкий ряд химических и физических раздражителей. Теперь широко признается, что продукты, выделяемые воспалительными клетками, например активированные эозинофилы, ставят под угрозу целостность эпителия и способствуют бронхиальной гиперреактивности. Мышино-крысиная модель воспаления легких, вызываемого овальбумином, сдерживается с помощью регулируемого во времени притока лимфоцитов и эозинофилов в бронхиальную полость. Установлено, что рохинимекс вызывает у разных поколений собак породы бигла(коротконогих гончих) болевой синдром. Болезнь сопровождается клиническими и лабораторными проявлениями, определяющими этот синдром бигл как модель гриппоподобного синдрома, вызываемого у человека рохинимексом. Соединения с общей формулойиспытывали на ингибирование острого экспериментального аутоаллергического энцефаломиелита у мышей. В качестве контрольного лечебного средства применялся рохинимекс, показавший 50-процентное ингибирование при 5 мг/кг и менее. Неожиданные результаты были получены при введении надлежащего заместителя в 5-ю позицию хинолинового кольца. По сравнению с рохинимексом эффективность 5-хлорозамещенного соединения возросла в 100 раз. Замещение в позициях 6, 7 и 8 имело результатом менее активные соединения. Эффект замещения в позиции 5 можно более глубоко понять на физико-химической основе. В целом активность экспериментального аутоаллергического энцефаломиелита, как видно из его ингибирования, снижалась в следующем порядке в соответствии с позицией замещения 5678. Сравнение эффектов замещения в позициях 5 и 6 показало, что имеет место статистически существенное различие на каждом нормальном уровне (0,001) между этими двумя значениями, причем эффект замещения в позиции 5 является превосходящим. Кроме того,надлежащее замещение в ароматическом ядре хинолиновой части и 3-карбоксиамидной части соединений с общей формулойзначительно уменьшает или даже уничтожает побочные действия, то есть тератогенный эффект и болевой синдром бигл, рохинимекса. Таким образом, физико-химические свойства 5-заместителя в хинолиновой части и -,- и/или, в особенности, -замещение в 3-карбоксиамидной части представляют особую важность для соотношения риска и пользы, улучшенного по сравнению с рохинимексом. Замена метиловой группы на карбоксиамидный азот с высшей алкильной группой уменьшала побочные действия еще более. Следовательно, установлено, что соединения с формулойпо своим химическим и фармакологическим свойствам отличаются от лекарственных препаратов, предлагавшихся до сих пор для лечения рассеянного склероза и его проявлений. Все варианты осуществления данного изобретения, раскрытые в формуле, настоящим включаются в описание. Следующие примеры предназначаются для иллюстрирования данного изобретения без ограничения его объема. 8 Соединение с формулойможно получить известными способами, например, как показано выше, с помощью реакции эфирной производной хинолинкарбоновой кислоты с анилином в соответствующем растворителе, таком как толуол, ксилол и т.п. Основные способы получения эфирной производной хинолинкарбоновой кислоты с формулойописаны ниже. -алкилированные анилины с формулойимеются в продаже или известны из литературы (например,, . . . 1969, 2223-2224). Соединения, выражаемые формулой , можно получить способами, в общем аналогичными тем,которые описаны в указанной литературе. Способ В 5 Соединения с формулойможно также получить с помощью реакции хинолинкарбоновой кислоты с формулойс анилином с формулой . Можно использовать различные реагенты сочетания, применяемые в данной области, например карбодиимиды, известные из патента США 4547511. В одном из подходящих способов сочетания применяются хлористый тионил в присутствии триэтиламина и соответствующий растворитель, например дихлорметан. Этот способ можно использовать в случаях, когда прямая связь между эфиром и анилином не работает, например когда анилин содержит электронноакцепторные заместители. Хинолинкарбоновые кислоты с формулойможно получить из соответствующих эфиров с формулойс помощью кислотного гидролиза, как будет описано ниже. Пример 1 Этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоновой кислоты К раствору 2,6-дифторбензонитрила (42 г, 0,30 моля) в 150 мл безводного метанола при 30 медленно добавляли метилат натрия (17,9 г, 0,33 моля). После нагревания с обратным холодильником в течение 1 часа добавляли водный 40-процентный метиламин и полученный раствор нагревали с обратным холодильником в течение 4 дней. При охлаждении осаждалось белое твердое вещество, 2-метокси-6-(метиламино)бензонитрил, который собирали с помощью фильтрации. Этот осадок растворяли в водном растворе этиленгликоля (500 мл) и гидроокиси калия (14 г). Раствор перегоняли с обратным холодильником при 150 в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и регулировали рН до 4 с помощью концентрированной соляной кислоты. Образовавшуюся антраниловую 9(38 г, 0,45 моля) взвешивали в 500 мл 1,4-диоксана. Медленно добавляли фосген (25 мл,0,45 моля) при охлаждении в ледяной ванне. Смесь прогревали при 40 в течение 1 часа,охлаждали до 15 , а затем добавляли 150 мл воды. Образовавшийся изатоиновый ангидрид ( ) собирали с помощью фильтрации. После тщательного просушивания 5-метоксиметил-изатоиновый ангидрид (20,7 г, 0,10 моля) добавляли к раствору диэтилмалоната натрия (31 г, 0,17 моля) в 250 мл безводного ,-диметилформамида при комнатной температуре. Раствор прогревали при 100 в течение 3 часов, охлаждали до комнатной температуры, добавляли 250 мл воды и регулировали рН до 4 с помощью концентрированной соляной кислоты. Осадок собирали с помощью фильтрации и просушивали под вакуумом, получая титульное соединение в виде чистых белых кристаллов (22 г),выход 48 . ЯМР-спектр 1(3),43(,3), 3,62(,3), 3,96(,3), 4,45(,2), 6,70(,1),6,92(,1), 7,55(,1), 13,5(,1). Пример 2 Этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоновой кислоты В механически перемешиваемую взвесь 2-амин-6-хлор-бензойной кислоты (30 г,0,175 моля) и бикарбоната натрия (44 г, 0,52 моля) в 300 мл диоксана добавляли частями фосген (51 г, 0,52 моля), растворенный в 150 мл диоксана. Происходила интенсивная реакция с выделением газа, и реакционную смесь охлаждали, поддерживая температуру ниже 50. Затем перемешивание продолжали при 50 в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до 15 , полученный осадок собирали, промывали водой и просушивали,получая изатоиновый ангидрид. Этот ангидрид (5 г, 0,025 моля) растворяли в 50 мл,-диметилацетамида и охлаждали до 0 . Добавляли гидрид натрия (75 ) (0,94 г,0,028 моля), а затем йодистый метил (1,89 мл, 0,030 моля) в той степени, чтобы удержать температуру ниже 5 . Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Остаточный йодистый метил удаляли под вакуумом. Добавляли гидрид натрия (0,94 г, 0,028 моля) вместе с малоновым эфиром (4,5 г, 0,028 моля). Смесь прогревали при 85 в течение 5 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли 50 мл метанола и 50 мл 1 соляной кислоты и потом 250 мл воды. Образовывалась эмульсия, которая кристаллизовалась при выстаивании в холодильнике в течение 72 часов. Кристаллическую массу собирали с помощью фильтрации, промывали водой, водой с метанолом (11) и гептаном и просушивали, получая титульное соединение (6,3 г), выход 74 . ЯМР-спектр 1 (3)1,46(3,), 3,63(3,), 4,49(2,), 7,23(1,), 7,27(1,),7,49(1,), 15,0(1,). Пример 3 Этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-трифторметил-1-метил-2-оксо-хинолин 3-карбоновой кислоты 2-фтор-6-(трифторметил)бензонитрил (10 г, 0,053 моля) прогревали при 40 в 200 мл безводного метиламина в автоклаве в течение 2 дней. Избыточному метиламину позволяли испаряться, а полученное серое твердое вещество растворяли в 200 мл хлористого метилена вместе с 4-аминопиридином (0,1 г, 0,001 моля) и триэтиламином (3,3 мл, 0,026 моля). К охлажденному раствору медленно добавляли хлорэтилмалонил (8,8 г, 0,060 моля). Раствор перемешивали в течение 4 часов, а затем обрабатывали до получения желтоватого сиропа. Сироп растворяли в 100 мл безводного этанола и добавляли метилат натрия (5,4 г,0,10 моля). По истечении 1 часа растворитель удаляли, а остаток обрабатывали хлористым метиленом и водой. Полученная производная хинолина тщательно просушивалась и взвешивалась в 250 мл охлажденного безводного тетрагидрофурана. Медленно добавляли 10 7600 1 2005.12.30 гидрид натрия (4 г, 0,125 моля) и затем йодистый метил (10 мл, 0,15 моля). Смесь нагревали при обратном холодильнике в течение 6 часов, охлаждали водой и обрабатывали диэтиловым эфиром. Растворители удаляли, а остаток (17,3 г) растворяли в смеси этанола(50 мл) и концентрированной соляной кислоты (10 мл). Раствор прогревали при 45 в течение ночи, охлаждали и собирали осадок, получая 8 г титульной смеси, выход 48 . ЯМР-спектр 1 (3)1,46(3,), 3,68(3,), 4,50(2,), 7,58(1,), 7,71(2,),15,0(1,). По существу, тем же способом из соответствующих исходных веществ было получено следующее соединение этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-трифторметокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3 карбоновой кислоты. Пример 4 Этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-1-метил-2-оксо-5,6-метилендиокси-хинолин 3-карбоновой кислоты В раствор 3,4-(метилендиокси)-анилина (20,6 г, 0,15 моля) в безводном тетрагидрофуране (150 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (36 г, 0,17 моля). Раствор нагревали при обратном холодильнике в течение 2 часов и затем концентрировали под вакуумом, получая черный твердый остаток. Остаток растворяли в безводном тетрагидрофуране (600 мл) и охлаждали до -40 . По каплям добавляли гексановый раствор 1,3 вторичного бутиллития (265 мл, 0,35 моля). После перемешивания раствора в течение 0,5 часа при-40 добавляли гранулу сухого льда (приблизительно 40 г). Смеси позволяли нагреваться до 0 и добавляли воду (приблизительно 700 мл). Водный раствор подкисляли соляной кислотой до рН 3 и экстрагировали простым эфиром. Экстракты высушивали и концентрировали, получая - защищенную 5,6-метилендиокси-антраниловую кислоту в виде твердого остатка (45 г). Эту кислоту добавляли в охлажденную льдом взвесь гидрида натрия (80 в масле, 9,0 г, 0,30 моля) в ,-диметилформамиде (200 мл). Смесь перемешивали в течение 0,5 часа и добавляли йодистый метил (22 мл, 0,35 моля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, охлаждали водой (600 мл) и три раза экстрагировали простым эфиром. Органический слой промывали насыщенным рассолом,высушивали и концентрировали под вакуумом, получая темно-коричневую маслянистую жидкость. Маслянистую жидкость растворяли в метаноле (400 мл) и добавляли концентрированную соляную кислоту (80 мл). Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, нейтрализовывали с помощью 5 М гидроокиси натрия и три раза экстрагировали простым эфиром. Объединенные экстракты фильтровали через колонку с 2 и элюат концентрировали под вакуумом, получая метилированный антраниловый эфир (20 г). Эфир растворяли в дихлорметане (400 мл) и охлаждали в ледяной ванне. Добавляли хлористый этилмалонил (21 г, 0,14 моля) и затем по истечении 30 минут триэтиламин (22 мл, 0,16 моля). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре мутную смесь промывали 0,5 М соляной кислотой и затем бикарбонатом. Органическую фазу тщательно просушивали и концентрировали под вакуумом. Остаток затем растворяли в сухом этаноле (200 мл) и добавляли метилат натрия (17 г, 0,32 моля). Смесь перемешивали в течение 1 часа и добавляли воду (300 мл). Раствор промывали этилацетатом и затем водный раствор подкисляли концентрированной соляной кислотой. Осадок собирали с помощью фильтрации и высушивали под вакуумом, получая титульное соединение в виде серых кристаллов (17 г, полный выход 41 ). ЯМР-спектр 1 (3)1,45(3,), 3,58(3,), 4,48(2,), 6,17(2,), 6,71(1,),7,14(1,). Пример 5 5-этил-изатоиновый ангидрид Смесь хлоральгидрата (59,3 г, 0,36 моля), воды (700 мл) и сульфата натрия (85,8 г,0,60 моля) нагревали до 50 . По достижении 50 одновременно добавляли смесь 3-этиланилина (40,8 г, 0,33 моля), воды (700 мл) и концентрированной соляной кислоты 11(33,6 мл) и смесь хлористоводородного гидроксиламина (74,8 г, 1,04 моля) и воды (330 мл). Полученную смесь нагревали до 80 в течение 30 минут и выдерживали при этой температуре в течение еще 30 минут перед охлаждением реакционной смеси в ванне со льдом. Полученный в результате осадок отфильтровывали, промывали водой и просушивали под вакуумом над 25, получая при этом изонитрозоацетанилид (36,6 г), выход 58 . Изонитрозоацетанилин (10,0 г, 0,05 моля) добавляли частями в смесь воды (9 мл) и концентрированной серной кислоты (60 мл), предварительно нагретую до 50 , причем поддерживали температуру 50-55 . По окончании добавления смесь нагревали до 80 и выдерживали при этой температуре в течение 10 минут. Затем реакционную смесь охлаждали и всыпали 10-12 реакционных объемов измельченного льда. Затем смесь оставляли для выстаивания в течение одного часа. Водную суспензию экстрагировали дихлорметаном, который высушивали и испаряли, получая в результате этого смесь двух аналогов - 4-этилизатина и 6-этилизатина в соотношении приблизительно 0,681 (7,6 г), выход 84 . Смесь двух изомеров растворяли в водной гидроокиси натрия и раствор фильтровали через броунмиллерит, а затем подкисляли до рН 4. Аналог-4 при этом рН экстрагировали в дихлорметане, который высушивали и испаряли, получая чистый 4-этилизатин (3,1 г),выход 34 . 4-этилизатин (3,1 г, 0,018 моля) добавляли к смеси концентрированной серной кислоты (45 мл) и уксусной кислоты (14 мл). Суспензию нагревали до 30 , добавляли перекись водорода 35(2,2 мл) и после добавления повышали температуру до 65 . После нагревания в течение 3 часов смесь охлаждали и осадок отфильтровывали, промывали водой и высушивали, получая титульное соединение (1,7 г), выход 48 . ЯМР-спектр 1 (-6)1,12(3,), 3,02(2,), 6,98 (1,), 7,05(1,), 7,58(1,),11,6(1, широкий). Пример 6 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоновая кислота 10 мл концентрированной соляной кислоты добавляли в 30 мл уксусного ангидрида при охлаждении. К этому раствору добавляли этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5 метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-карбоновой кислоты (10,5 г, 38 ммолей) и смесь прогревали при 80 в течение 14 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и кристаллический продукт отфильтровывали, промывали холодным метанолом, высушивали,получая титульное соединение (7,2 г), выход 77 . ЯМР-спектр 1 (3)3,73(3,), 4,02(3,), 6,82(1,), 7,02(1,), 7,62(1,). Пример 7-метиланилин (2,7 г, 0,025 моля) растворяли в 80 мл толуола и около 30 мл растворителя отгоняли, чтобы получить сухой раствор. К кипящему раствору добавляли этиловый эфир 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоновой кислоты(2,7 г, 0,01 моля). Этанол, образовавшийся во время реакции, отгоняли вместе с некоторым количеством толуола в течение приблизительно 4 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Осадок собирали, промывали холодным толуолом и гексаном и высушивали, получая титульное соединение (2,8 г), выход 83 . ЯМР-спектр 1 (3)3,49(3,), 3,50(3,), 4,03(3,), 6,66(1,), 6,86(1,), 7,087,48(6,). ЯМР-спектр 13 С (3)29,7(СН 3), 36,8(3), 56,8(3), 103,3, 104,2, 108,4,110,2, 126,2, 127,2, 128,6, 131,4, 141,2, 143,6, 157,0, 157,4,160,3, 165,1./339, фрагмент 232. 12 7600 1 2005.12.30 По существу, тем же способом из соответствующих исходных веществ получали следующие соединения.-этил(3-фтор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксо-хинолин-3 карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)1,20(3,), 3,33(3,), 3,95(2,), 6,84-6,98(3,), 7,117,20(2,), 7,23(1,), 7,42(1,). ЯМР-спектр 13 С (3)12,9(3), 29,9(3), 45,8(2), 104,7, 112,7, 113,4,113,8-114,0, 113,9-114,1, 122,3-122,4, 125,6, 129,5-129,6, 131,9,132,8, 142,7, 143,7-143,8, 158,0, 161,4-163,4, 165,9, 168,8 некоторые пики представляют из себя мультиплеты вследствие -связи./375, фрагменты 236 и 140.-этил(3-фтор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин 3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)1,22(3,), 3,50(3,), 3,92(2 Н, широкополосной сигнал), 4,02(3,),6,66(1,), 6,81-6,92(2,), 7,08-7,19(3,), 7,41(1,). ЯМР-спектр 13 (3)13,1(3), 29,8(СН 3), 43,9(СН 2), 56,9(СН 3), 103,4,104,3, 108,6, 110,4, 114,5114,7, 123,4, 129,6129,7, 131,6,141,4, 143,5, 157,2, 157,4, 160,3, 161,4163,3, 164,4 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./371, фрагмент 232.-метил(4-хлор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-трифторметил-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)3,40(3,), 3,48(3,), 7,08-7,25(4,), 7,48(1,), 7,65(1,),7,69(1,). ЯМР-спектр 13 ( 3 ) 30,1(СН 3), 38,7(3), 103,8, 112,7, 113,4,118,7, 121,9121,9122,0122,0, 120,3122,4124,6126,8, 127,0,127,8128,0128,3128,5, 128,9, 131,6, 132,4, 142,3, 142,6, 157,7,166,3, 169,9 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./-411, фрагменты 270 и 142.-метил(4-трифторметил-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид (способ В) К охлажденному льдом раствору 1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоновой кислоты (8 г, 0,32 моля), триэтиламина (15,5 мл, 0,11 моля) и 4-трифторметилметиланилина (6,1 г, 0,035 моля) в 150 мл хлористого метилена добавляли по каплям в течение 0,5 часа раствор хлористого тионила (3,0 мл, 0,042 моля) в 10 мл хлористого метилена. Раствор разбавляли 10 миллилитрами хлористого метилена, промывали холодной 1 серной кислотой и затем экстрагировали 1 гидроокисью натрия. Регулировали рН водной фазы до 8-8,5, осветляли путем фильтрации, а затем подкисляли соляной кислотой до рН 4. При выстаивании образовывался кристаллический осадок, который отфильтровывали, промывали водой и просушивали, получая титульное соединение (8,5 г), выход 65 . ЯМР-спектр 1 (3)3,48(3,), 3,54(3,), 4,06(3,), 6,70(1,), 6,94(1,), 7,46(1,),7,50(4, широкополосной сигнал). ЯМР 13 (3)29,8(СН 3), 36,9(СН 3), 56,9(СН 3), 103,5, 104,2, 108,7,109,5, 117,3121,71265,0130,3, 125,8125,9125,9126,0, 126,3,127,9128,4128,9129,4, 131,8, 141,4, 146,7, 157,2, 158,0, 160,3,165,0 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./407, фрагмент 232. По существу, тем же способом из соответствующих исходных веществ получали следующие соединения-этил(4-трифторметил-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)1,22(3,), 3,28(3,), 3,99(2,), 7,13(1,), 7,23-7,32(3,),7,40-7,51(3,). ЯМР-спектр 13 С (3)13,0(3), 29,8(3), 45,8(2), 104,0, 112,7, 113,5,120,6122,8124,9127,1, 125,7, 125,7125,7125,8125,8, 126,7,128,3128,6128,8129,1, 132,1, 133,0, 142,8, 145,6, 157,9, 166,8,169,1 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./425, фрагменты 236 и 190.-этил(4-трифторметил-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксохинолин-3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)1,22(3,), 3,51(3,), 3,93(2,), 4,02(3,), 6,67(1,), 6,91(1,),7,43(1,), 7,46-7,52(4,). ЯМР-спектр 13 С (3)13,2(3), 29,8(3), 44,1(2), 456,9(3), 103,5,104,3, 108,7, 110,0, 120,7122,9125,0127,2, 125,9125,9, 127,7,128,9129,2129,4129,7, 131,8, 141,5, 145,3, 157,2, 157,8, 160,3,164,4 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./421, фрагмент 232. 7600 1 2005.12.30 ЯМР 13 С (3)29,9(СН 3), 37,3(СН 3), 103,3, 104,7104,9105,1, 110,5110,7,112,7, 113,3, 125,7, 128,1, 128,6, 132,1, 133,3, 142,8, 157,8,156,9157,0158,9159,0, 160,6160,6, 167,4, 170,4 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./379, фрагменты 236 и 144.-метил(2,4-дифтор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)3,40(3,), 3,51(3,), 4,02(3,), 6,60-6,63(1,), 6,63(1,),6,73-6,79(1,), 6,90(1,), 7,38-7,46(2,). ЯМР 13 ( 3 ) 29,9(3), 36,0(3), 56,9(3), 103,5, 104,2,104,4104,6104,6104,8, 108,6, 109,2, 110,8110,9111,0111,0,127,3127,3127,4127,4, 130,0130,1, 131,8, 141,4, 157,2,157,3157,4159,3159,4, 158,5, 160,3, 160,7160,8162,6162,7, 165,5 некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./375, фрагмент 232.-метил(2,5-дифтор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид. ЯМР-спектр 1 (3)3,48(3,), 3,64(3,), 4,10(3,), 6,60-7,30(5,), 7,63(1,). ЯМР-спектр 13 (3)31,0(3), 37,2(СН 3), 57,2(СН 3), 104,4, 105,0,105,7, 109,5, 115,2115,6, 116,8116,9, 117,2117,3117,5117,7,129,8130,0130,0130,2, 133,9, 141,0, 151,9155,8, 157,6,155,8159,6, 161,4, 161,7, 167,6 основная форма некоторые пики представляют собой мультиплеты вследствие -связи./375, фрагмент 232.-метил(2,4-дифтор-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5,6-метилендиокси-1-метил-2 оксо-хинолин-3-карбоксиамид. Фармакологические способы Острый экспериментальный аутоаллергический энцефаломиелитДля экспериментов использовались самки мыши / 8-недельного возраста. Мышиный спинномозговой гомогенатполучали от самок мыши С 57 В 1/6 возраста 812 недель. Ткань гомогенизировали на льду и растворяли в охлажденном фосфатносолевом буферном растворе. Неполный адьювант Фрюнда, содержащий 1 мг/мл .37, эмульгировали равным объемом , получая конечную концентрацию 10 мг/мл . Объем инокулята 0,1 мл впрыскивали интрадермально в основание хвоста. Через 0-3 дня после иммунизации впрыскивали внутрибрюшинно коклюшный токсин. Лечение производилось перорально каждый день либо в 3-12 дни после иммунизации, либо в 3-7 и 10-12 дни. Контрольные животные получали физиологический раствор. Животные, восемь на группу, распределялись по клиническим признакам паралитических болезней по шкале от 0 до 5 следующим образом 0. нормальные 1. с вялым хвостом 2. с частичным параличом задних конечностей 3. с параличом задних конечностей и вялыми передними 4. с двусторонним параличом задних и передних конечностей 5. смертельный исход. Клинические показатели проверяли на 7-й день и ежедневно с 9-го дня до конца эксперимента на 14-й день. Показатели терапевтического эффекта вычисляли как процент подавления клинических показателей по сравнению с результатами контрольных групп. Артрит, вызываемый коллагеном Для экспериментов использовали самцов мышей /1 в возрасте 8-10 недель. В день 0 мышей иммунизировали интрадермально в основание хвоста бычьим коллагеномтипа 16(100 мг на мышь) в полном адьюванте Фрюнда. Лечение производилось перорально каждый день с 3 до 7, с 10 по 14, с 17 по 21, с 24 по 28 и с 31 по 35. Через пятнадцать дней после иммунизации мышей начали проверять на признаки артрита. Животных проверяли три раза в неделю. Каждый второй или третий день отдельные лапки животных, зараженных артритом, оценивались по шкале 0-4 (0 - нет артрита, 1 - артрит в одном из межфаланговых, плюснефаланговых или межзапястных суставов, 2 - артрит в двух суставах, 3 артрит в трех суставах, 4 - как и в третьем, но с более сильной краснотой и опуханием лапки). Сюда добавляли оценку каждой лапки, чтобы получить максимально подробную картину состояния каждой мыши. Воспаление легких, вызываемое овальбумином Для экспериментов использовали самок мыши С 57 В 1/6 в возрасте 10-14 недель, 10 мышей на группу. Мышей сенсибилизировали овальбуминомв гидроокиси алюминия в объеме 0,2 мл, заражение осуществляли внутрибрюшинно. Лечение выполняли от 0-го до 16-го дня. Контрольные мыши получали физиологический раствор. Через 14 дней после сенсибилизациимышей подвергали в течение 20 минут воздействию аэрозоля в соотношении веса и объема 1,5 в физиологическом растворе, с помощью распылителя. Контрольных мышей подвергали воздействию носителя - физиологического раствора. Через 72 часа после проверочного заражения ОА/носителем мышей анестезировали и дважды выполняли бронхоальвеолярный лаваж путем введения в легкие 0,5 мл охлажденного льдом фосфатно-солевого буферного раствора. Общие подсчеты клеток и дифференциальные подсчеты выполняли на основе идентификации эозинофилов, моноцитов/альвеолярных макрофагов, лимфоцитов и нейтрофилов. Инфильтрацию эозинофилов в легочную ткань оценивали гистохимическими методами на замороженных частях легких,применяя диаминобензидин-тетрагидрохлорид. Тератогенные эффекты у крыс Соединения вводили подкожно самкам крыс от 8 до 14 дня беременности. На 20-й день после оплодотворения крысам делали кесарево сечение и аутопсию. Плоды обследовали на внешние и внутренние отклонения от нормы. Болевой синдром бигл Соединения вводили внутривенно собакам породы бигл (коротконогие гончие). Дозирование производилось в течение пяти последующих дней. Собаки оценивались по клиническим и лабораторным признакам болевого синдрома, например лихорадочному состоянию, повышенной степени оседания эритроцитов, щелочному фосфату, индукции белков в острой стадии и васкулиту. Предпочтенные соединения -метил(4-трифторметил-фенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-метокси-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид и -метил(2,4-дифторфенил)-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1-метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид названы ниже соединениями А и В соответственно. -метилфенил-1,2-дигидро-4-гидрокси-5-хлор-1 метил-2-оксо-хинолин-3-карбоксиамид и рохинимекс включены сюда в качестве контрольных препаратов и названы ниже соединениямиисоответственно. ПодавлениеПодавление ЕАЕ,Доза, мг/кг(изобретение) 6 4 0 37 не испыт. 10 не испыт. не испыт. не испыт. 9 30 2 30 Эффективные количества соединений с формулойпредпочтительно вводят пациентам при необходимости такого лечения в соответствии с обычными способами введения и формируют обычные фармацевтические композиции, содержащие эффективное количество активного ингредиента и соответствующий приемлемый в фармакологии носитель. Такие композиции могут иметь разнообразные формы растворы, взвеси, эмульсии, таблетки, капсулы и порошки, предназначенные для перорального приема, аэрозоли для ингаляции, стерильные растворы для парентерального введения, суппозитории для ректального введения или соответствующие локальные формации. Обычные процедуры выбора и приготовления соответствующих фармацевтических композиций описаны, например, в-, ,, 1988. Соответствующие суточные дозы для лечения рассеянного склероза могут изменяться от 0,0005 мг/кг до 10 мг/кг веса тела, обычно от 0,005 мг/кг до 1 мг/кг веса тела, в зависимости от конкретных условий лечения, возраста и веса конкретного пациента и чувствительности пациента к лекарственному средству. Точное индивидуальное дозирование, как и суточное дозирование, будет определяться обычными медицинскими принципами по предписанию врача. Предполагается введение различных добавок для повышения стабильности или облегчения приема лекарственного средства. Фармацевтическая композиция может также содержать иные, чем соединение с формулой , добавочные терапевтически эффективные вещества. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.