Нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли, обладающей антиагрегантным действием

Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

Изобретение относится к области биологичеСКН ЗКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ, НЗХОДЯЩИХ применение в медицине в качестве антиагрегантных средств.Известно антиагрегационное средство 2,6 Бис-бис- юкси-этил-амино -4,8-диН-пиперидино-пиримидо (ЗА-С) пиримндин(дипиридамол, курантил), Стимулирующее биосинтез просгациклина и ингибирующее синтез тромбоксанов 1 1.НЕДОСТЗТКОМ ИЗВЕСТНОТО СрВДСТВа ЯВЛЯЕТСЯ ограниченное антиагрегантное действие. Это выражается в том, что дипиридамол, например, НЕ ТОРМОЗНТ НГРСГЗЦИЮ ТрОМбОЦИТОВ ИНцуцированную тромбином 2 1. В связи с этим в клинической практике дипиридамол прихоДНТСЯ СОЧЕТЗТЬ С ЗСПИРИНОМ, ОКИСЛЗМИ ЗЗОТЭ И др. З.Известен препарат сульфинпирааон (антуран), который является конкурентным антагонистом арахидоновой кислоты, вызывающей агрегацию тромбоцитов. Этот препарат тормозит агрегацию тромбоцитов, в ответ на действие коллагена, но не тормозит агрегацию,вызванную тромбином. Максимальный антиагротационный эффект достигается лишь через 6 месяцев приема 4.Известно антиагрегационное средство-ацетилсалициловая кислота-асшгрин, оказывающее ингибирующее влияние на спонтанную и индуцированную агрегацию тромбоцитов. Также как и антуран, аспирин является конкурентным антагонистом арахидоновой кислоты,не оказывая влияния на агрегацию, вызванную другими индукторами (например, тромбином),что ограничивает его применение.Кроме этого, недостатком аспирина (ацетилсалициловая кислота - АЗА) является снижение антиагрегантной активности при увеличении дозы, что связано со снижением синтеза простациклинов в стенке сосудов. ЭтоИзвестные антиагреганты имеют ограниченный спектр действия.Так как процесс агрегации тромбоцитов в организме может протекать с участием различных механизмов, то необходимо оценить действие заявляемого соединения на агрегацию, вызванную различными индукторамиЗадачей изобретения является создание вещества (соединения), обладающего антиагрегантным действием в отношении АДФ,тромбин, ристомицин - индуцированной агрегации и агрегации, индуцированной арахидоновой кислотой.Поставленная задача достигается структурой ннтроэфтпра окисленного крахмала натриевой соли формулыСреди производных окисленного крахмала известна его натриевая соль, проявляющая антиаритмическое действие 8. Достоверно установленным антиагрегантным действием натриевая соль окисленного крахмала не обладает.Заявляемое соединение обладает выраженным антиагрегационным широкого спектра действием, чем известные, применяемые в профилактической и клинической медицине аналоги, например, аспирин.Заявляемое соединение получают следующим образом 20 г крахмала окисляют 740 ннм раствором Ы 2 О 4 в СС 14 в течение 24 часов при комнатной температуре. Окисленный крахмал отмывают дистиллированной водой до исчезновения в промывных водах НО и 1403- ионов (реакция с дифениламином), отфильтровывают на воронке Бюхнера, сушат на воздухе до воздушно-влажного состояния,определяют содержание карбоксильных групп барий - ацетатным методом, для чего точную навеску окисленного крахмала 00,2 г) заливают 40 мл 0,2 н раствора ацетата бария,выдерживают 2 часа, после чего аликвоту (10 мл р-ра) титруют 0,05 н раствором ОН. Содержание карбоксильнык групп рассчитывают по формуле.20 г окисленного крахмала помещают в нитрующую смесь, содержащую 49-70 масс. НЫОз, 25-50 Н 3 Р 04 и 1-5 Р 205 выдер 5 ВТ 851 С 1 оживают 10-60 мин при комнатной температуре, отфильтровывают на фильтре Шотта,промывают дистиллированной водой, сушат на воздухе до воздушно-влажного состояния. В полученном образце определяют содержание нитроэфирного азота методом Къедьдаля.В полученных образцах определяют содержание карбоксильных групп Ссоощр), для чего точную навеску образца заливают 40 мл 0,2 н р-ра ацетата бария и все последующие операции проводят как в случае определенияСсооншсхд- 15 г нитроэфира окисленного крахмала рас творяют в 60 мл водного раствора, содержащего 17-2,8 гидроксида натрия, доводят рН раствора до физиологического, после чего осаждают Ыа-соль нитрозфира окисленного ЙрЗХМЗЛЗ ЭЦСТОНОМ ИЛИ ИЗОПРОПВНОЛОМ. молекулярную массу Ма-соли нитроэфира окисленного крахмала определяют методом гель-хроматографии. В качестве калибрантов используют декстран с различной молекулярной массой. По результатам анализа рассчитывают зна чения ш, п и 1 по следующим формулам М С ФОН Р . 0512) 450022 С соон(Р 2141000 М 198252 К - тоВ СВЯЗИ С ТОМ, ЧТО ПОСЛДОВЗТСЛЬНОСТЬ ВСЕХ операций по получению Ыа-соли нитроэфира ОКНСЛСННОГО крахмала ОДИНЕКОВЗ, ВСЕ данные ПО УСЛОВИЯМ ПОЛУЧЕНИЯ И ЗЦЗЛИЗУ ЭЗЯБЛСННОГО соединения представлены в табл. 1.Анализ ИК-спектров образцов нитрованного ОКИСЛБННОЕО крахмала ПОКЗЗЫВНСТ наличие ИН тенсивных полос поглощения 840 см валентных колебаний О-Ы , 1280 см 1 симметричных валентных колебаний нитратных групп, 1660 см 1 - валентных колебаний двойных связей Ы 0, что однозначно указывает на то, что определяемый азот вэтих образцах находится в виде нитроэфирныхгрупп. Полоса поглощения 1660 см 1, присут ствующая на ИК-спектре окисленного крахма ла, может быть отнесена к присутствующей в нем воде. Нитрование окисленного крахмала в используемых нами условиях незначительно разрушает систему водородных связей окисленного крахмала, о чем свидетельствует отсутствие существенных различий в области 3100-3700 (см. ИК-спектры этих образцов). Исследование влияния предлагаемых соединений на агрегацию тромбоцитов йп уйго проводилось с применением установки с гелий-неоновым лазером в качестве источникаРабота с тромбоцитами проводилась с использованием Сад - содержащего буфера при температуре 37 С при постоянном перемешивании. Использовалась плазма, обогащенная тромбоцитами. а также отмытые тромбоциты 8 1. Количество тромбоцитов составляло обычно (3-4)107 клеток/мл.Вначале регистрировался исходный уровень ИНТЕНСИВНОСТИ СВЕТЕ, ПРОШВДШВГО через КЛЕточную суспензию неактивированных тромбоЦИТОВ. ПОСЛЕ ВНЕСЕНИЯ ВГРЕГЗНТЭ регистрировалась кинетика изменения светопропускания клеточной суспензии в ответ на действие индуктора агрегации.Антиагрегационное действие соединений нитроэфира окисленного крахмала натриевой соли изучалось с различными индукторами агрегации аденозиндифосфатом (АДФ) (Кеапа 1,ВНР), ристомицином (мосмедпрепарат), тромбином (Бйдша, США), арахидоновая кислотаИсследуемые вещества вносшш в суспензию тромбоцитов и преинкубировали в течение 3 минут при З 7 С, т.е. определяли их предупреждающее действие. Ингибирование агрегации оценивали по изменению скорости агрегации относительно контроля (У/Уо), где Уо - скорость агрегации тромбоцитов под влиянием индуктора У - скорость агрегации тромбоцитов после внесения изучаемых соединений с последующим введением индуктора.Действие индуктора без добавления антиагреганта принимали за 1.Было проведено сравнительное изучение эффективности ингибирующего действия аспирина. В качестве препарата сравнения (прототип) был взят аспирин (Вауег, ФРГ), так как по структуре он ближе других препаратов к нитроэфиру окисленного крахмала натриевой соли оба содержат карбоксильную группу. Кроме того, это один из препаратов, наиболее ЧЗСТО ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В ПраКТИЧВСКОй МЕДИЦИНЕ для антиагрегационной терапии 9,1 О.Все используемые соединения из табл. 1(нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли с различным содержанием нитроэфирных групп), добавленные к обогащенной тромбоцитами плазме за 3 минуты до начала агрегации,вызванной АДФ (3,5-105 М) значительно снижали агрегационную способность тромбоцитов.Результаты ингибирующего действия указанных соединений на АДФ-агрегацию представлены в таблице 2.Из приведенных данных видно, что заявленные соединения, содержащие 15-16 карбоксильных групп и 34 нитроэфирных групп,на модели АДФ-индуцированной агрегации оказывают выраженное антиагрегационное действие, достоверно превосходящее действиеаспирина. Дальнейшее увеличение количества карбоксильных групп не приводит к увеличению ингибирующего действия на агрегацию тромбоцитов (по данным табл. 2). Максимально возможное количество нитроэфирных групп, введенное в процессе нитрации, состав ляет 436. , Наибольшей активностью обладает соединение Не 14 из таблицы 1, которое уже в дозе 10 мг/мл полностью подавляет агрегацию тромбоцитов, вызываемую АДФ.В связи с этим все последующие эксперименты выполнялись с использованием соединения данного состава.Для дальнейшего изучения был взят нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли с содержанием карбоксильных групп 16,01 и нитроэфирных грушт 396, как наиболее активная на вышеописанной модели агрегации тромбоцитов. Изучаемое соединение, добавленное к обогащенной тромбоцитами плазме 38 3 МИНУТЫ ДО начала ЗГРГЕЦИИ, ВЫЗБЗННОЙ ристомицъсном (20 мг/мл), вызывает значительное снижение агрегации тромбоцитов. В таблице 3 представлены результаты ингибируЮЩСТО ДЕЙСТВИЯ СОЕДИНЕНИЯ На ПИСТОМИЦИНиндуцированную агрегацию.Чрезвычайно важным представляется купирующий эффект изучаемых соединений, содержащих нитроэфнрные группы РИСТОМИЦИН-ИНЦУЦИрОВВЕ-ЕНУЮ агрегацию ОНИ прерывают на любой стадии.исследуемое соединение (нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли с содержанием карбоксильных групп 1 б,01 и нитроэфирных групп 336), добавленное к суспензии отмытых тромбоцитов за 3 минуты до начала агрегации под действием тромбинаЛены результаты ингибирующего действия этого соединения на тромбин-индуцированную агрегацию.исследуемое соединение (нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли с содержанием карбоксильных групп 16,01 и нитроэфирных групп 336), добавленное к обогащенной тромбоцитами плазме за 3 мину 10ты до начала агрегации, вызванной арахидоновой кислотой (10 мг/ мл) снижало агрегацию тромбоцитов. В таблице 5 представлены результаты ингибирующего действия на агрегацию тромбоцитов, вызванную арахидоновой кислотой.Из приведенных в табл. 2-5 данных следует,что нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли, содержащий 15-16) карбоксильных групп и 34 нитроэфирных групп, обладает выраженным ингибирующим действием на АДФ-индуцировантгую агрегацию. Доза заявляемого соединения, необходимая для достижения максимального эффекта, в 2 раза меньше, чем аспирина. Для ингибирования агрегации, вызванной ристомицином, максимально эффективная доза аспирина превышает эффективную дозу заявляемого соединения в 12,5 раз. Кроме того, предлагаемые соединения обладают купирующим действием в отношении ристомицин-индуцированной агрегации. Аспирин этой способностью не обладает.Приведенные данные свидетельствуют о том,что заявляемые соединения в 10 раз эффективнее аспирина при тромбин-индуцированной агрегации.Максимальный ингибирующий эффект в отношении арахидоновой кислоты заявляемое соединение проявляет в дозе 10 мг/ мл, однако он не превосходит аналогичного действия аспирина.Таким образом, экспериментально установлено, что нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли имеет существенный антиагрегантный эффект широкого спектра,который достигает максимальной величины при содержании карбоксильных групп 15-16 и нитроэфирных групп 344 и по антиагрегатному действию на АДФ, тромбин, ристомицин превосходит такой широко применяемый В МСДИЦИНСКОЙ ПРЗКТИКЕ ЗНТИЗГПВГЕНТ как 3 С пирин.Предлагаемое соединение может быть использовано для предупреждения и лечения тромбоэмболических осложнений.В таблицах 2-5 представлены средние значения 3-5 независимых экспериментов. Порядковые номера соединения соответствуют номерам, использованным для обозначения аналогичных соединений в таблице 1.Таблица 1 Условия получения и результаты анализа заявленного соединенияанные химического анализа Кон-ция ч М 2 О 4 в МЕНЕ П/П окислил тельной смеси

МПК / Метки

МПК: C08B 31/18

Метки: крахмала, соли, окисленного, обладающей, натриевой, действием, нитроэфир, антиагрегантным

Код ссылки

<a href="https://by.patents.su/7-851-nitroefir-okislennogo-krahmala-natrievojj-soli-obladayushhejj-antiagregantnym-dejjstviem.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Нитроэфир окисленного крахмала натриевой соли, обладающей антиагрегантным действием</a>

Похожие патенты