Способ лечения раневой инфекции

(71) Заявитель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(72) Авторы Косинец Александр Николаевич Фролова Аэлита Валерьевна Бузук Георгий Николаевич(73) Патентообладатель Учреждение образования Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет(56) Теория и практика местного лечения гнойных ран. - Кив Здоровя, 1995. С. 197-202. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Харьков Торгсинг, 1997. Т. 2. С. 430.4406 С 1, 2002.2119345 С 1, 1998.2128054 С 1, 1999.00/72860 А 1.4590061, 1986. Гончарова Т.А. Энциклопедия лекарственных растений. - М. Изд. Дом МСП,1997. Ситников В.П. и др. Фундаментальные и прикладные вопросы медицины и фармации. Тезисы докладов 54-й научной сессии института. - Витебск, 1999. С. 121. Монастырская Б.И. и др. Фармакология и токсикология. - 1953. - Т. .2. - С. 30-32.(57) Способ лечения раневой инфекции, включающий обработку раневой поверхности антисептиком, отличающийся тем, что в качестве антисептика используют стерильный 3 настой на физиологическом растворе или стерильную присыпку, которые готовят из смеси травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого, взятых в соотношении 12 - 21. 7975 1 2006.04.30 Изобретение относится к области медицины и касается нового способа лечения гнойных ран. Успех лечения гнойной раны обусловлен одновременным воздействием препарата как на микробную флору, так и на основные факторы патогенеза раневого процесса 1. Известны и имеют широкое применение в практической хирургии для обработки раневой поверхности водные растворы антисептиков - хлоргексидина биглюконата, борной кислоты, гипохлорита натрия, фурацилина 1, 3, 5, 7, ферменты 2, 6, препараты из подорожника большого 4. Бактериологические исследования подтверждают, как правило, полиморфизм микрофлоры, высеваемой из ран пациентов хирургического профиля, использование растворов хлоргексидина и гипохлорита натрия не дает желаемого результата и требует включения дополнительных антисептических средств. К тому же они не обладают ранозаживляющим эффектом. Традиционно используемый в послеоперационном периоде в оториноларингологии раствор фурацилина снимает реактивные явления в глотке незначительно 2, требуя дополнительного применения анальгетиков, седативных, снотворных и антигистаминных препаратов 1. В качестве прототипа изобретения принят способ лечения гнойных ран путем наложения салфеток с раствором фурацилина 1, 3. Данных о применении инсуффляций лекарственных растений на раневую поверхность нами ни в патентной, ни в научной литературе не обнаружено. Задача изобретения - предложить экономически выгодный и эффективный способ, позволяющий сократить сроки лечения больных с гнойными ранами и послеоперационными осложнениями. Поставленная задача реализуется путем использования смеси из травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого, взятых в соотношении 1221,в виде настоя, приготовленного на стерильном физиологическом растворе, для смачивания в нем салфеток и/или в виде присыпки для инсуффляций на раневую поверхность. В предложенной смеси оптимальным образом сочетаются выраженный антимикробный, противогрибковый, противовоспалительный, обезболивающий, протеолитический,ранозаживляющий эффекты, что обеспечивает комплексное воздействие на основные звенья патогенеза раневого процесса 1, 4, 9. Способ приготовления присыпки заключается в следующем. Берут сухую траву маклеи мелкоплодной и сухой лист подорожника большого. На промышленном измельчителе сырье раздельно измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 0,25 мм, после чего смешивают в необходимом соотношении (1221). Готовую присыпку расфасовывают в полиэтиленовые пакетики и запаивают их. Затем проводят стерилизацию лекарственного препарата в цезиевой -установке с дозой облучения 1,5 Мрад. Настой готовят в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеииздания 5. В асептических условиях навеску стерильной присыпки в соотношении компонентов(сухой лист подорожника / трава маклеи мелкоплодной), необходимом для достижения желаемого эффекта, заливают требуемым объемом стерильного физиологического раствора, настаивают на кипящей водяной бане в течение 15 мин, охлаждают при комнатной температуре в течение 45 мин и процеживают (отжимая растительное сырье), затем добавляют стерильный физиологический раствор до первоначального объема 5. Готовый настой представляет собой прозрачную жидкость желто-бурого цвета с приятным запахом. Способ лечения осуществляется следующим образом. Гнойную рану моделируют на белых беспородных крысах-самцах массой 250 г, у которых в асептических условиях под эфирным наркозом в лопаточной области иссекают 2 7975 1 2006.04.30 кожный лоскут площадью 5520,8 мм 2. Рану контаминируют микробной взвесью госпитального штамма, содержащей 1 млрд. микробных тел в 1 мл. Лечение начинают через двое суток после заражения, к этому моменту у всех животных выявляются признаки гнойного воспаления отек и гиперемия краев раны и окружающих тканей, наличие гноя и некротических масс. Животные становятся малоподвижными, вялыми, наблюдается тахикардия и тахиапноэ, потеря массы составляет до 10 . Для продолжения эксперимента животных разделяют на три группы в первой (контрольной) лечение ран проводят ежедневными перевязками с раствором фурацилина, во второй(опытной) - с настоем из смеси травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого, взятых в соотношении 1221, на стерильном физиологическом растворе, в третьей (опытной) используют присыпку из смеси травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого. Условия содержания и кормления животных во всех группах одинаковы. Антимикробное действие препарата подтверждается бактериологическими исследованиями раневого содержимого и количественным контролем за его микрофлорой (метод исследования микробной обсемененности раневой поверхности по Радоману В.Е.). Наблюдения показывают, что в опытных группах в процессе лечения происходит быстрое снижение микробной обсемененности ран и исчезновение микрофлоры (фигура). Критериями заживления раны являются сроки очищения от гнойно-некротических масс, появление грануляций, эпителизации и уменьшение площади раны. В процессе лечения через день проводятся цитологические исследования раневых отпечатков (таблица). Динамика изменения площади раны и коэффициент суточного уменьшения раны Группа животных До лечения 3-и сутки контроль опыт 5-е сутки контроль опыт 7-е сутки контроль опыт 9-е сутки контроль опыт 12-е сутки контроль опыт Сутки 552,30,8 561,35,2 0 Р 0,001 4728,4 5 519,91,2 4 Р 0,001 357,36,3 12 471,95,2 5 Р 0,001 158,52,7 28 429,97,8 5 Р 0,001 84,72,4 24 336,123,7 6,4 Р 0,001 0,20,5 нежный рубец- достоверное отклонение среднего значения (- Стьюдента) по сравнению со значениями до лечения. Измерение площади раны проводят по методу Л.И. Поповой (1942). Процент уменьшения площади раны находят по формуле100 ,где- величина площади раны при предшествующем измерении, - величина площади раны в настоящий момент, - число дней между первым и последующим измерениями. Пример 1. В первой (контрольной) группе животных лечение ран проводят раствором фурацилина (15000). В мазках-отпечатках до лечения преобладали нейтрофильные гранулоциты, в 90 из них имелись признаки дегенеративных изменений (вакуолизация ядра и цито 3 7975 1 2006.04.30 плазмы, отсутствие зернистости, полихромазия, фрагментация и другие). Обнаружены единичные макрофаги с нечетко выраженными, незначительными включениями в цитоплазме. Нейтрофильный фагоцитоз не выявлялся. На третьи сутки наблюдалось увеличение размеров раны (561,35,2 мм 2) за счет отека и набухания тканей. Обильное гнойное отделяемое. В мазках-отпечатках несколько уменьшилось число разрушенных и дегенеративно измененных клеток по сравнению с показателями до лечения, выявились массивные скопления детрита и свободно лежащей микрофлоры. Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов не проявлялась. На 5-е сутки раны находились в фазе резко выраженной гидратации тканей со значительным гнойным отделяемым и отсутствием грануляций. Средняя площадь по сравнению с исходной уменьшилась только на 47 мм 2. Коэффициент суточного уменьшения значительно ниже, чем в опытной, составляет 4,13 . Цитологический состав раневого экссудата мало отличался от предыдущего, несколько повысилось количество макрофагов. Картина раневой поверхности такова содержимое грязно-серого цвета, обильное, с неприятным запахом. Вокруг раны прослеживался некроз, ткани отечны. Посевы по Радоману показали, что микробное число составляло 5107. Отмечалось медленное течение раневого процесса. К 7-му дню раны находились в фазе гидратации, происходило крайне медленное образование грануляций и эпителизация. Средняя площадь на 7-й день равна 471,95,2 мм 2, коэффициент суточного уменьшения раны 5 . Обнаружено скопление детрита, свободно лежащей микрофлоры, незначительное увеличение числа макрофагов, большая часть клеток раневого экссудата имела признаки дегенерации. Несколько улучшились цитологические показатели в отпечатках ран на 10-12 сутки снижение количества нейтрофильных гранулоцитов, макрофагов и появление профибробластов происходит в меньшей степени, чем в опытных группах, и подтверждает замедленный темп очищения и регенерации раны. Площадь составила 336,123,7 мм 2, а коэффициент суточного уменьшения раны 6,4 . Полный переход раневого процесса в фазу дегидратации и эпителизации ран происходил только к концу второй недели лечения. Заживление раны наступало к 20,30,7 суткам. Пример 2. Во второй группе животных, лечение ран у которых проводят настоем из смеси травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого, взятых в соотношении 1221,на стерильном физиологическом растворе, до лечения в мазках-отпечатках преобладали нейтрофильные гранулоциты, в 90 из них имелись признаки дегенеративных изменений(вакуолизация ядра и цитоплазмы, отсутствие зернистости, полихромазия, фрагментация и другие). Обнаружены единичные макрофаги с нечетко выраженными, незначительными включениями в цитоплазме. Нейтрофильный фагоцитоз не выявлялся. На 3-и сутки у подавляющего большинства животных рана несколько уменьшилась в размерах, отек тканей стал умеренным. Размер в среднем уменьшился на 76 мм 2. Суточное уменьшение площади раны составило 4,58 (5 ). В мазках-отпечатках определялось большое количество нейтрофильных гранулоцитов, лишь 11 клеток были дегенеративно изменены, большинство лейкоцитов имели четкие контуры с выраженным ядром и цитоплазмой. В 2 нейтрофильных гранулоцитов ярко прослеживался активный фагоцитоз. Появились незрелые мононуклеары и макрофаги, которых было в 4 раза больше, чем в контрольной группе. Встречались юные и зрелые фибробласты. Раневое содержимое имело степень микробной обсемененности 104. К 5-м суткам раны у животных очистились, покрылись грануляциями, отек тканей совершенно отсутствовал. По сравнению с исходными площадь раны уменьшилась на 193 мм 2 и составила 357,36,3 мм 2. Процент уменьшения раны по дням равен 12,3 . Значительно увеличилось число основных клеток соединительной ткани. Среди незрелых мононуклеаров преобладали клетки средних и крупных размеров, уменьшилось содержание макрофагов, продолжалась трансформация полибластов в профибробласты, свободно лежащая микрофлора не обнаруживалась. На седьмой день лечения 4 7975 1 2006.04.30 наступала фаза дегидратации тканей с усиленной эпителизацией. К этому времени проявилась статистически достоверная разница в скорости уменьшения площади ран. Средняя площадь уменьшилась до 158,52,3 мм 2, т.е. более чем в 3 раза по сравнению с исходной. Коэффициент суточного уменьшения оставался высоким (28 ). Выявлено увеличение числа всех клеток, особенно профибробластов их интенсивное созревание как показатель активного репаративного процесса. В последующем продолжалась быстрая эпителизация, и полное заживление наступало через 12,70,3 дня, что в 1,6 раза быстрее,чем в контрольной группе, формировался нежный рубец. Активная эпителизация ран сопровождалась следующей цитологической картиной снижение нейтрофильных гранулоцитов до 27 и 16 соответственно, практически полное исчезновение макрофагов,активная трансформация полибластов в профибробласты (20 и 24 соответственно). Пример 3. До начала лечения цитологическая картина ран животных, лечение у которых проводят нанесением присыпки из смеси травы маклеи мелкоплодной и листьев подорожника большого, представлена нейтрофильными гранулоцитами, в 90 имеющими признаки дегенеративных изменений (вакуолизация ядра и цитоплазмы, отсутствие зернистости,полихромазия, фрагментация и другие), единичными макрофагами с нечетко выраженными, незначительными включениями в цитоплазме. Нейтрофильный фагоцитоз не выявлялся. На 3-и сутки размер ран в среднем уменьшился на 82 мм 2, составив суточное уменьшение площади 5,2 . В мазках-отпечатках определялось большое количество нейтрофильных гранулоцитов, 8 клеток были дегенеративно изменены, большинство лейкоцитов имели четкие контуры с выраженным ядром и цитоплазмой. Появились незрелые мононуклеары и макрофаги, которых было в 4 раза больше, чем в контрольной группе, встречались юные и зрелые фибробласты. В сравнении с ранами животных вигруппах, в данной группе рана имела подсушенный вид, присутствовал лишь налет гнойного отделяемого (микробное число составляло 103), что говорит о высоких адгезивных свойствах присыпки. К 5-м суткам раны у животных полностью очистились, заполнились сочными ярко-красными грануляциями, отек тканей совершенно отсутствовал. По сравнению с исходными площадь раны уменьшилась на 203 мм 2. Процент уменьшения раны по дням равен 13,7 . Значительно увеличилось число основных клеток соединительной ткани. Среди незрелых мононуклеаров преобладали клетки средних и крупных размеров, уменьшилось содержание макрофагов, продолжалась трансформация полибластов в профибробласты, свободно лежащая микрофлора не обнаруживалась. Фаза дегидратации тканей с усиленной эпителизацией наступала на шестой день лечения. К этому времени проявилась статистически достоверная разница в скорости уменьшения площади ран. Средняя площадь уменьшилась до 135,32,0 мм 2, т.е. более чем в 3 раза по сравнению с исходной. Коэффициент суточного уменьшения оставался высоким (30 ). Как показатель активного репаративного процесса выявлено увеличение числа и интенсивное созревание профибробластов. Активная эпителизация ран сопровождалась снижением нейтрофильных гранулоцитов до 13 , практически полным исчезновением макрофагов, активной трансформацией полибластов в профибробласты. Полное заживление наступало через 110,5 дней,что в 1,8 раза быстрее, чем в контрольной группе, при этом формировался нежный рубец. Данный состав сбора лекарственных растений обладает многонаправленным действием, проявляя выраженную адгезивную, антимикробную, протеолитическую, ранозаживляющую активность. Способ лечения ран этим составом позволяет избежать затрат на приобретение дорогостоящих лекарственных препаратов. При лечении пациентов смесь из травы маклеи мелкоплодной и листа подорожника большого возможно применять в виде стерильного настоя и стерильной присыпки для инсуффляции на раневую поверхность. В послеоперационном периоде после тонзиллэктомии использование этого способа позволит подвести биологически активные вещества лекарственного средства непосредственно к очагу патологии, существенно активизировав восстановительные, репаративные процессы. 5 7975 1 2006.04.30 Источники информации 1. Даценко Б.М. Теория и практика лечения гнойных ран. - 1991. - Киев Здоровя. С. 378. 2. Лобенко А.А., Коваленко П.Т., Плаценко М.Т. и др. Лечение гнойных ран протеолитическими ферментами, иммобилизированными на угольной ткани, в эксперименте // Клиническая хирургия. - 1990. -1. - С. 31-32. 3. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 14 изд., нов. Т. 2. - М. ООО Новая Волна, 2002. - С. 300. 4. Монастырская В.И., Петропавловская А.А. О кровоостанавливающем и ранозаживляющем действии подорожника // Фармакология и токсикология. - 1953. -2. - С. 30-32. 5. Палкин Н.Д., Чекашев В.В. Гипохлорит натрия в профилактике гнойных осложнений послеоперационных ран // Хирургия. - 2000. -4. - С. 56. 6. Толстых П.И., Титов А.И., Вартанян Ж.С. и др. Характеристика раневого процесса после высокоэнергетической лазерной обработки и ферментативного лечения // Хирургия. 1990. -6. - С. 12-13. 7. Торопова Л.А., Щербин Н.В. Использование гипохлоритадля лечения хронического гнойного среднего отита // Матер. 15-го Всерос. съезда оторинолар., 25-29 сент. 1995. - СПб. Т. 1. - С. 350-355. 8. Государственная Фармакопея СССРизд. Вып. 2. - М. Медицина, 1990. - С. 147150. 9.,,..// . . . - 1997. - . 35. - 2. . 99-104. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 6