Способ предварительной диагностики нестабильной стенокардии

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ НЕСТАБИЛЬНОЙ СТЕНОКАРДИИ(71) Заявитель Белорусский государственный университет(72) Авторы Горудко Ирина Владимировна Буко Инна Вацлавовна Шамова Екатерина Вячеславовна Черенкевич Сергей Николаевич Полонецкий Леонид Захарович(73) Патентообладатель Белорусский государственный университет(57) Способ предварительной диагностики нестабильной стенокардии, отличающийся тем, что у пациента осуществляют забор венозной крови, выделяют из нее тромбоциты,получают суспензию тромбоцитов, по величине светопропускания суспензии определяют агрегационную активность тромбоцитов, используя в качестве индуктора агрегации лектин омелы белой в концентрации 2,5 мкг/мл, и диагностируют возможное наличие нестабильной стенокардии при значении величины светопропускания от 18 до 60 или отсутствие нестабильной стенокардии при значении величины светопропускания от 61 до 90 . Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии, и предназначено для предварительной диагностики нестабильной стенокардии. Нестабильная стенокардия - это период обострения ишемической болезни сердца(ИБС), характеризующийся высокой опасностью развития крупноочагового инфаркта миокарда (ИМ) и выражающийся в качественном изменении приступов стенокардии,прежде всего в появлении стенокардии покоя. Вне приступов боли в этом периоде на протяжении суток и более отмечаются изменения конечной части желудочкового комплекса ЭКГ 1. Выделение нестабильной стенокардии как особого состояния вызвано необходимостью разработки организационных и лечебных мероприятий, которые могли бы если не предупредить развитие ИМ, то, по меньшей мере, сделать его течение более благоприятным, а также уменьшить частоту внезапной смерти. Известен способ диагностики стенокардии 2, основанный на анализе жалоб больного, интенсивности и длительности ангинозных болей, их иррадиации, связи с физической нагрузкой, наблюдаемых при приступе ишемии миокарда. Главным из перечисленного для диагностики нестабильной стенокардии является изменение характера приступов. По 16034 1 2012.06.30 этому нестабильным признают состояние больного, у которого приступы стенокардии редки (1 раз в 6-7 дней), если они отличаются от имевшихся ранее или появились впервые в жизни и если в межприступном периоде отмечается изменение конечной части желудочкового комплекса на ЭКГ. Недостатками этого способа является субъективность оценки больным своих ощущений и, вследствие этого, недостаточная объективность получаемых данных. Известен также электрокардиографический способ диагностики стенокардии 3, заключающийся в регистрации электрических потенциалов с поверхности тела пациента,использующий в качестве объективных критериев ишемии миокарда признаки, указывающие на нарушение электрофизиологических и обменных процессов в зонах недостаточного кровоснабжения миокарда. Недостатком данного способа является необъективность, так как указанные изменения кратковременны, частота их выявления невысока. К тому же, в силу интегральности отражения биоэлектрической активности клеток миокарда, трудности интерпретации изменений конечной части желудочкового комплекса на ЭКГ у больных гипертонической болезнью, особенно у лиц, имеющих на ЭКГ признаки гипертрофии ЛЖ, не позволяют дифференцировать ишемию от повреждения и достаточно четко объективизировать это разделение. Известен также сцинтиграфический метод диагностики ишемии миокарда при стенокардии 4, заключающийся во внутривенном введении радиоактивного индикатора 201 Т 1 (или его аналогов) и оценке накопления и перераспределения его в мышце сердца. Недостатками данного способа являются зависимость выявляемых дефектов перфузии от локализации коронарного стеноза, степени и числа атеросклеротически стенозированных коронарных артерий лучевая нагрузка на пациента, ограничивающая кратность проведения исследований в динамике необходимость применения специализированного дорогостоящего детектирующего устройства - гамма-камеры. Известен способ диагностики нестабильной стенокардии 5, при котором периодически повторяют забор крови пациента в течение суток, готовят пробы сыворотки крови,определяют значения концентрации миоглобина в них радиоиммунным методом и фиксируют их в динамике, выбирают из полученного значимые величины концентрации миоглобина и сравнивают их с контрольными, по которым судят о наличии и виде патологии,при этом забор крови, приготовление проб и последовательно другие вышеуказанные процедуры проводят непосредственно после поступления пациента в медицинское учреждение первый раз с последующим периодическим повторением их в течение первых шести часов и судят о наличии нестабильной стенокардии при сохранении величин концентрации миоглобина в диапазоне от 80 до 200 нг/мл в течение первых шести часов. Однако способ является дорогостоящим, требующим наличия радиоспектрометра, который имеется не в каждой клинической больнице, его осуществление требует выполнения большого числа подготовительных операций. Известен способ диагностики нестабильной стенокардии 6 - прототип, заключающийся в клиническом обследовании больных и биохимическом исследовании крови (исследуют уровень фибриногена и фибринолитическую активность плазмы). Измеряют уровни фибриногена и фибринолитическую активность плазмы в течение 4 недель от дня поступления в стационар. При снижении уровня фибриногена и высокой фибринолитической активности плазмы относительно уровня при стабильной стенокардии до нормальных значений (и ниже для фибриногена) в течение всего срока измерения диагностируется нестабильнаястенокардия. Недостатком способа-прототипа является необходимость продолжительного исследования (4 недели) для определения стабильности значений контрольных показателей, полученных в первые 3 дня. 16034 1 2012.06.30 Задачей заявляемого изобретения является повышение объективности и упрощение способа определения нестабильной стенокардии. Сущность изобретения заключается в том, что в способе предварительной диагностики нестабильной стенокардии, включающем забор венозной крови, выделение из нее изолированных тромбоцитов, по величине светопропускания определяют агрегационную активность тромбоцитов, используя в качестве индуктора агрегации лектин омелы белой в концентрации 2,5 мкг/мл, и диагностируют возможное наличие нестабильной стенокардии при значении величины светопропускания от 18 до 16 или отсутствие нестабильной стенокардии при значении величины светопропускания от 61 до 90 . Сущность изобретения поясняется фиг. 1, 2, где на фиг. 1 показана кинетика лектин-индуцированной агрегации тромбоцитов здорового человека на фиг. 2 показана кинетика лектин-индуцированной агрегации тромбоцитов больного нестабильной стенокардией. Предлагаемый способ осуществляют следующим образом у больного осуществляют забор крови из локтевой вены в центрифужную пробирку, содержащую стабилизатор 3,8 раствор цитрата натрия в соотношении 91, пробирку центрифугируют при 200 в течение 7-10 мин, получают обогащенную тромбоцитами плазму. Отмытые тромбоциты получают центрифугированием ОТП при 3000 об/мин в течение 3 мин. Суспензию тромбоцитов получают двукратным отмыванием осадка клеток буферными растворами, как описано в работе 7. Агрегацию тромбоцитов в конечной концентрации 2,5108 кл/мл в фосфатно-солевом буфере, содержащем 10 мМ 24/24, 137 мМ , 2,7 мМ КС 1, 0,9 мМ СаС 2, 0,5 мМ 2,7,3, исследуют с применением компьютеризированного анализатора агрегации тромбоцитов АР 2110 научно-производственного центра Солар (Минск, Беларусь). В качестве индуктора агрегации использовали лектин омелы белой в концентрации 2,5 мкг/мл. Поскольку при агрегации клеток уменьшается светопропускание изолированных тромбоцитов, то, измеряя величину светопропускания исследуемых образцов, можно оценить способность тромбоцитов к агрегации при действии лектина омелы белой. Сущность изобретения поясняется примерами. Пример 1. Больной Х. Жалобы на момент осмотра беспокоит головная боль, слабость, дискомфорт в прекардиальной области. Боли в грудной клетке нет. Предварительный диагноз ИБС нестабильная (прогрессирующая) стенокардия (май-июнь 2006 г.). Постинфарктный(1998 г., 2004 г.) кардиосклероз, ПМА (по анамнезу). Атеросклероз аорты, стенозирующий венечных артерий. АКШ (январь 2005 г.)( ), АГ - ст., риск , МКБ. На 1-й день поступления в стационар был сделан анализ лектин-индуцированной агрегации тромбоцитов. Величина светопропускания суспензии тромбоцитов составила 19,2 . Эти данные позволили предположить наличие нестабильной стенокардии. Данный диагноз позднее верифицирован путем оценки биохимических показателей, коагулограммы, ОАК, ОАМ, клинического состояния и результатов инструментальных обследований. Окончательный диагноз ИБС нестабильная (прогрессирующая) стенокардия (майиюнь 2006 г.) с исходом в стенокардию напряжения ФК . Атеросклеротический кардиосклероз. Атеросклероз аорты, коронарных артерий. Суправентрикулярная и желудочковая экстрасистолия.( ). АГст., риск . МКБ. Энцефалопатия сложного генеза (атеросклеротическая, гипертоническая) 2 ст., субкомпенсация с выраженным вестибулоатаксическим синдромом, правосторонней пирамидной недостаточностью. Пример 2. Больной К. Жалобы на момент осмотра отмечает неинтенсивные сдавливающие боли в области сердца (загрудинные боли после инъекции морфина практически купированы). В течение последних трех дней отмечает учащение приступов, снижение ТФН, за четыре 3 16034 1 2012.06.30 пять часов до поступления в приемное отделение - боли за грудиной интенсивные, жгучие, в покое иррадиировали в обе руки, не уменьшались на фоне приема НГ. Предварительный диагноз ИБС нестабильная (прогрессирующая) стенокардия от 19-20.05.06 г. Постинфарктный (по данным ЭКГ) и атеросклеротический кардиосклероз. Атеросклероз аорты, стенозирующий венечных артерий.( ). Ампутация правой нижней конечности. На 1-й день поступления в стационар был сделан анализ лектин-индуцированной агрегации тромбоцитов. Величина светопропускания суспензии тромбоцитов составила 46,3 . Эти данные позволили предположить наличие нестабильной стенокардии. Данный диагноз позднее верифицирован путем оценки биохимических показателей, коагулограммы, ОАК, ОАМ, клинического состояния и результатов инструментальных обследований. Окончательный диагноз ИБС нестабильная (прогрессирующая) стенокардия от 19-20.05.06 г. с исходом в стенокардию напряжения ФК . Постинфарктный (по данным ЭКГ) и атеросклеротический кардиосклероз, короткие пароксизмы наджелудочковой тахикардии, желудочковая и наджелудочковая экстрасистолия. Атеросклероз аорты, стенозирующий венечных артерий, атеросклероз церебральных артерий. Ангиопластика и стентирование ПКА 1, 2, 3 сегментов от 29.05.2006 г. Сочетанный митральный порок сердца с преобладанием недостаточности, стеноз и недостаточность АоК склеротического генеза.( ). Артериальная гипертензияст., риск . Проведено клиническое обследование 18 пациентов в возрасте от 43 до 71 года. Все больные были госпитализированы по поводу обострения основного заболевания. Для уточнения характера патологии проведено комплексное обследование, включающее методику суточного мониторирования ЭКГ эхокардиографическое и допплерэхокардиографическое исследование оценка КДО, КСО и ФВ ЛЖ производилась на основании результатов, полученных при обследовании в М-режиме, ФВ дополнительно оценивалась методом Симпсона определение липидного спектра, фибриногена и С-реактивного белка. Контрольную группу составили 18 человек в возрасте от 38 до 60 лет, проживающих в г. Минске (данные приведены в таблице). Показатели агрегационной способности тромбоцитов людей с нестабильной стенокардией при действии лектина омелы белой в концентрации 2,5 мкг/мл Концентрация лектина Степень агрегаГруппа людей омелы белой, мкг/мл ции,Контроль 18 2,5 70,93,4 Нестабильная стенокардия 18 2,5 55,64,7- уровень значимости не более чем 0,05 (0,021). Таким образом, предлагаемый способ позволяет быстро, безболезненно и достоверно осуществить предварительную диагностику нестабильной терапии, что способствует своевременному корректированию медикаментозной терапии у людей. Источники информации 1. Грацианский Н.А. Нестабильная стенокардия. Диагностика, клинические варианты,принципы лечения. Методические рекомендации. - М., 1988. - 19 с. 2. Стенокардия / Под ред. Д. Джулиана. - М. Медицина, 1980. - С. 53-95. 3..,.( ). - -., 1933. - С. 122-134. 4. Лишманов Ю.Б., Чернов В.И. Сцинтиграфия миокарда в ядерной кардиологии. Томск Изд-во Том. ун-а, 1997. - С. 140-186. 5. Патент РФ 2111697, 1998. 6. А. с. СССР 1282005. 16034 1 2012.06.30 7. Самаль А.Б. и др. Образование лактозорезистентных агрегатов тромбоцитов под действием лектина омелы и различные сигнальные ответы клеток на лектин и тромбин // Биохимия, 1998. - Т. 635. - С. 611-619. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 5