Способ определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в пробах воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАССОВЫХ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДИФЕНОКОНАЗОЛА И ЦИПРОКОНАЗОЛА ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ПРОБАХ ВОЗДУХА РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ИЛИ СМЫВОВ С КОЖНЫХ ПОКРОВОВ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр гигиены(72) Авторы Новицкий Виктор Филиппович Новицкая Татьяна Викентьевна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр гигиены(56) МУК 4.1.1946-05. Методические указания по определению остаточных количеств дифеноконазола в воде, зерне и соломе зерновых колосовых злаков методом газожидкостной хроматографии. Методические указания по определению ципроконазола (альто) в воде,почве, растениях хроматографическими методами. //.//. - 2010. - . 85. - . 427-431. МУК 4.1.1961-05. Определение остаточных количеств дифеноконазола в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания..-..(57) Способ определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в пробах воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, содержащими оба указанных действующих вещества, при котором проводят подготовку к хроматографированию пробы воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, для чего фильтр, на который отобрана проба воздуха рабочей зоны, трижды обрабатывают смесью ацетона и метанола,взятых в соотношении 11, полученные экстракты объединяют и упаривают досуха, или обезжиренные марлевые тампоны, на которые отобрана проба смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, содержащими одновременно в своем составе дифеноконазол и ципроконазол, трижды обрабатывают смесью этилового спирта и воды, взятых в соотношении 11, полученные экстракты объединяют, упаривают спирт до получения остаточного водного раствора, из которого проводят трехкратную переэкстракцию действующих веществ в хлороформ и упаривают хлороформ досуха до исчезновения его запаха, полученный сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, отбирают аликвоту в 2-5 мкл,хроматографируют на газовом хроматографе, оснащенном детектором электронного за 16859 1 2013.02.28 хвата и стеклянной колонкой 1000,4 см, заполненной насадкой 5-30 на хроматоне-, при температуре термостата колонок 340 С, испарителя 280 С и детектора 270 С, и рассчитывают концентрацию дифеноконазола и ципроконазола. Изобретение относится к медицине, к разделу санитарно-химических исследований воздуха рабочей зоны и условий труда. Известны способы для определения массовой концентрации действующего вещества дифеноконазола препаратов Байфуцид, КЭ и Дорион, КС 1 и массовой концентрации действующего вещества ципроконазола препаратов Лаэрт, КЭ и Колзор трио, КЭ 2 в случаях их индивидуального присутствия в пробах воздуха рабочей зоны, основанные на извлечении действующих веществ с фильтров органическими растворителями (ацетоном и гексаном соответственно) и последующем определении в их сконцентрированных экстрактах с помощью газовой хромотографии на приборе, оснащенном детектором постоянной скорости рекомбинации, для дифеноконазола и детектором электронного захвата для ципроконазола. Однако, для гигиенической оценки условий труда при применении пестицидного препарата Дорион, КС гораздо удобнее, быстрее и дешевле было бы определять массовые концентрации каждого из присутствующих в нем действующих веществ дифеноконазола и ципроконазола одновременно раздельными пиками на одной хроматограмме при анализе проб воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, содержащими в своем составе оба указанных действующих вещества. Описанные методы их индивидуального определения не учитывают особенности поведения каждого из этих действующих веществ при их совместном присутствии в анализируемых пробах. Кроме того, одновременное определение массовых концентраций обоих действующих веществ при их совместном присутствии в пробах изучаемых объектов позволило бы вдвое сократить время проведения их анализа, по сравнению с их индивидуально раздельным определением, и существенно уменьшить расход используемых при этом химических реактивов, что весьма важно, учитывая большое количество проб, обычно анализируемых при проведении оценки условий труда с применением пестицидных препаратов, содержащих два и более действующих веществ. Заявителю не известен способ оценки одновременного определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в пробах воздуха рабочей зоны и смывов с кожных покровов, в силу чего не может быть указан объект,являющийся наиболее близким аналогом заявляемого способа. Задачей заявляемого изобретения является создание способа одновременного раздельного определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в пробах воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих. Поставленная задача решается следующим образом. Предложен способ определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в пробах воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, содержащими оба указанных действующих вещества, при котором проводят подготовку к хроматографированию пробы воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, для чего фильтр, на который отобрана проба воздуха рабочей зоны, трижды обрабатывают смесью ацетона и метанола, взятых в соотношении 11, полученные экстракты объединяют и упаривают досуха, или обезжиренные марлевые тампоны, на которые отобрана проба смывов с кожных покровов у работающих с пестицидами, содержащими одновременно в своем составе дифеноконазол и ципроконазол, трижды обрабатывают смесью этилового спирта и воды, взятых в соотношении 11, полученные экстракты объединяют, упаривают спирт до получения остаточного водного раствора, из которого проводят трехкратную переэкс 2 16859 1 2013.02.28 тракцию действующих веществ в хлороформ и упаривают хлороформ досуха до исчезновения его запаха, полученный сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона, отбирают аликвоту в 2-5 мкл, хроматографируют на газовом хроматографе, оснащенном детектором электронного захвата и стеклянной колонкой 1000,4 см, заполненной насадкой 5-30 на хроматоне -, при температуре термостата колонок 340 С, испарителя 280 С и детектора 270 С, и рассчитывают концентрацию дифеноконазола и ципроконазола. Отбор проб воздуха рабочей зоны и смывов с кожных покровов у работающих проводят в соответствии с методическими рекомендациями по измерению и оценке реального загрязнения пестицидами воздуха рабочей зоны и кожных покровов работающих 3. Пример 1. Для одновременного раздельного определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в анализируемой пробе воздуха рабочей зоны, отобранной на фильтр, последний помещают в коническую колбу объемом 100 мл, добавляют в колбу 15 мл приготовленной смеси ацетона и метанола в соотношении 11, плотно закрывают колбу стандартной пластмассовой пробкой и экстрагируют при механическом встряхивании 20 минут. Полученный экстракт декантируют с фильтра в грушевидную колбу объемом 100 мл, а фильтр повторно заливают 15 мл той же смеси растворителей и проводят вторую экстракцию тем же способом. Вновь полученный экстракт опять декантируют с фильтра в ту же грушевидную колбу, добавляют к первому экстракту, а фильтр в третий раз вновь заливают 15 мл исходной смеси растворителей и проводят третью экстракцию, а получаемый при этом экстракт добавляют к смеси первых двух экстрактов в грушевидной колбе. Объединенный экстракт, полученный с помощью трех последовательно проведенных экстракций, упаривают в грушевидной колбе под вакуумом на ротационном испарителе до полного испарения ацетона и метанола. К оставшемуся в колбе сухому остатку, содержащему оба анализируемых действующих вещества, добавляют пипеткой 1 мл ацетона, тщательно смывают им стенки колбы и получают при этом количественный концентрат экстракта дифеноконазола и ципроконазола в анализируемой пробе воздуха рабочей зоны. Затем его аликвоту (2-5 мкл) вводят в испаритель газового хроматографа, оснащенного детектором электронного захвата и стеклянной колонкой 1000,4 см, заполненной 5-30 на хроматоне -, при температуре термостата колонок 340 С, при температуре испарителя 280 С, температуре детектора 270 С и последующим количественным расчетом на хроматограмме пиков, индивидуально представляющих дифеноконазол и ципроконазол. Пример 2. Для одновременного раздельного определения массовых концентраций дифеноконазола и ципроконазола при их совместном присутствии в анализируемой пробе смыва с кожного покрова, отобранной у рабочих на обезжиренные марлевые тампоны, последние помещают в коническую колбу объемом 100 мл, добавляют в колбу 15 мл приготовленной смеси этилового спирта и воды в соотношении 11, плотно закрывают колбу стандартной пластмассовой пробкой и экстрагируют при механическом встряхивании 20 минут. Полученный экстракт декантируют с тампонов в грушевидную колбу объемом 100 мл, затем стеклянной палочкой дополнительно отжимают тампоны в той же конической колбе несколько раз и сливают полученные порции отжатого концентрата в грушевидную колбу к основной его массе. Отжатые тампоны вновь заливают 20 мл смеси в конической колбе и проводят повторную экстракцию тем же способом, что и первую. Декантировавшийся второй экстракт с тампонов, а затем и отжатые остатки его добавляют в грушевидную колбу к первичному экстракту, а к тампонам приливают третью порцию исходной смеси воды и спирт, проводят тем же способом экстракцию и получают с них третий экстракт. Объединенный суммарный экстракт, полученный с помощью трех последовательно проведенных экстракций тампонов, частично концентрируют в грушевидной колбе под вакуумом на ротационном испарителе до максимального удаления из него этилового спирта, а 3 16859 1 2013.02.28 оставшуюся его водную часть переносят в делительную воронку, где и проводят трехкратную переэкстракцию действующих веществ в хлороформ, добавляя каждый раз по 10 мл его в делительную воронку к водному раствору. Объединенный трехкратный хлороформенный переэкстракт дифеноконазола и ципроконазола вновь возвращают в грушевидную колбу и тщательно упаривают его ранее описанным способом под вакуумом с помощью ротационного испарителя досуха и до исчезновения запаха хлороформа. Полученный сухой остаток в колбе количественно смывают 1 мл ацетона и аликвоту (2-5 мкл) полученного при этом концентрата действующих веществ в анализируемой пробе смыва с кожного покрова работающего хроматографируют также, как это описано в примере 1. Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого способа заключается в сокращении времени проведения анализа до 1 часа, то есть вдвое быстрее, чем при раздельном определении, и, кроме того, в нем существенно уменьшен расход используемых химических реактивов. Данный способ может быть использован при санитарно-химических исследованиях воздуха рабочей зоны и условий труда для оценки фактического содержания дифеноконазола и ципроконазола в пробах воздуха рабочей зоны или смывов с кожных покровов у работающих с пестицидными преператами, содержащими одновременно дифеноконазол и ципроконазол в качестве действующих веществ, например Дорион, КС, а также других ему подобных для оценки реального загрязнения ими. Источники информации 1. Определение дифеноконазола, действующего вещества препаратов Байфуцид, КЭ,Дорион, КС, в воде, почве, воздухе рабочей зоны, растительных материалов методом газожидкостной хроматографии Инструкция по применению. -101.9 - 1010. - Минск,2010. 2. Определение ципроконазола, действующего вещества препаратов Лаэрт, КЭ и Дорион, КС, в воде, почве, воздухе рабочей зоны, растительных материалов методом газожидкостной хроматографии Инструкция по применению. -101.5 - 1010. - Минск,2010. 3. Метод оценки риска воздействия на работающих с пестицидами Методические рекомендации. - МР 2001. - М., 2001. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4