Способ прогнозирования эффективности химиотерапии туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью

(51) МПК (2009) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ХИМИОТЕРАПИИ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ С МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ(71) Заявитель Государственное учреждение Республиканский научнопрактический центр пульмонологии и фтизиатрии(72) Авторы Шпаковская Наталья Савельевна Суркова Лариса Константиновна Скрягина Елена Михайловна Дюсьмикеева Марина Игоревна Чалый Юрий Владимирович Антонова Наталья Петровна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Республиканский научно-практический центр пульмонологии и фтизиатрии(57) Способ прогнозирования эффективности химиотерапии туберкулеза легких с множественной лекарственной устойчивостью, заключающийся в том, что в плазме крови в утренние часы определяют уровень растворимого рецептора фактора некроза опухолей ФНО Р 55 до и после проведения химиотерапии и при уровне ФНО Р 55 5105 пг/мл или выше до и после 4-х месяцев химиотерапии прогнозируют ее неэффективность и неблагоприятное течение туберкулеза, а при уровне ФНО Р 55 3600 пг/мл или ниже до химиотерапии и снижении уровня до 2338 пг/мл или ниже после 4-х месяцев химиотерапии эффективность лечения и благоприятное течение туберкулеза. Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии и иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности химиотерапии больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) микобактерий туберкулеза. Наличие у больного туберкулезом легких лекарственно-резистентных микобактерий существенно снижает эффективность лечения, приводит к появлению хронических и неизлечимых форм, а в ряде случаев и к летальным исходам. Поиск критериев прогноза течения и исхода заболевания, в том числе и иммунологических, позволяет осуществить своевременную коррекцию схемы химиотерапии и тем самым повысить эффективность лечения. Важную роль в противотуберкулезной защите играет секретируемый макрофагами и моноцитами цитокин - фактор некроза опухолей (ФНО-). 13512 1 2010.08.30 Известно, что центральную роль в развитии воспалительных процессов в органах дыхания играют противовоспалительные цитокины, а ФНО- является основным медиатором воспаления, стимулирует выделение каскада медиаторов - ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8,интерферонов, колониестимулирующих факторов из различных клеток. ФНО- усиливает фагоцитарную активность нейтрофилов, оказывает прямое воздействие на дифференцировку Т и В-клеток. В организме человека ФНО является центральным патогенетическим фактором развития системных и местных воспалительных процессов и заболеваний, при которых активация макрофагов играет важную роль, особенно при туберкулезе легких. Биологическая активность ФНО- опосредуется двумя клеточными рецепторами - Р 55 и Р 75. Связывание со специфическими рецепторными белками, главным образом с Р 55,приводит к его отщеплению с поверхности и переходу в растворимую форму. Растворимые рецепторы ФНО- являются чувствительными и стабильными маркерами воспалительных реакций, опосредованных ФНО-. Исследование растворимого рецептора Р 55 ФНО- рассматривается как чувствительный показатель, отражающий биологическую активность ФНО-. Известно, что повышение уровня Р 55 ФНО- свидетельствует об его активности, а снижение является своего рода показателем эндогенной недостаточности противовоспалительного (анти-ФНО- потенциала продукции Р 55. Уровень Р 55 ФНОможет явиться новым критерием мониторинга клинического состояния больных и использоваться как маркер иммунодефицита и неадекватности воспалительной реакции, требующей иммунокоррекции. Уровень продукции и содержания растворимых рецепторов ФНО- в биологических жидкостях свидетельствует о функциональном состоянии организма и изменяется при различных заболеваниях. Цитокины выделяются в самостоятельную систему регуляции основных функций организма, связанную в первую очередь с поддержанием иммунного гомеостаза при внедрении патогенов и развитии инфекционного процесса. Известен способ определения спонтанной и индуцированнойФГА продукции Р 55 ФНО-, повышение которой отмечено при хроническом вирусном гепатите , что коррелировало со снижением способности ИКК к продукции ФНО- 1. Известно определение Р 55 ФНО- в сыворотке крови больных ишемической болезнью сердца, осложненной хронической сердечной недостаточностью 2, и у больных ревматоидным артритом 3. Известен способ изучения продукции цитокинов мононуклеарами крови в ответ на контакт с туберкулином у больных разными формами туберкулеза легких на сыворотке крови 4. Показано, что спонтанная и индуцированная ЛПС и ППД продукции ФНОбыла выше и достоверно чаще выявлялась у больных диссеминированным туберкулезом. Наиболее низкими показатели были при казеозной пневмонии. Данный способ указывает на то, что у больных этой самой тяжелой формой туберкулеза наблюдается выраженная дефектность клеточного специфического иммунного ответа. Однако известные способы пригодны для туберкулеза, вызванного типичными микобактериями, и не позволяют прогнозировать характер течения и эффективность полихимиотерапии МЛУ туберкулеза легких. Задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в прогнозировании неблагоприятного течения туберкулеза легких с МЛУ МБТ для соответствующей коррекции химиотерапии. Поставленная задача решается предлагаемым способом прогнозирования эффективности химиотерапии легких с множественной лекарственной устойчивостью, включающим определение уровня растворимого рецептора фактора некроза опухолей ФНО- Р 55 в утренние часы в плазме крови больного до и после проведения химиотерапии и при уровне ФНО- Р 55 5105 пг/мл или выше до и после 4-х месяцев химиотерапии прогнозируют ее неэффективность и неблагоприятное течение туберкулеза, а при уровне ФНО 2 13512 1 2010.08.30 Р 55 3600 пг/мл или ниже до химиотерапии и снижении уровня до 2338 пг/мл или ниже после 4-х месяцев химиотерапии - эффективность лечения и благоприятное течение туберкулеза. Способ осуществляется с помощью твердофазного иммуноферментного анализа, в котором для прогнозирования эффективности химиотерапии МЛУ туберкулеза определяется более узкий и строго специфичный спектр цитокинов, что позволяет повысить чувствительность и специфичность анализа, снизить затраты на выполнение и повысить его достоверность, а также осуществить своевременную коррекцию схемы лечебных мероприятий и точное определение дальнейшей тактики ведения больного. Способ осуществляется следующим образом. В утренние часы у больного отбирают пробу периферической или венозной крови и с помощью метода иммуноферментного анализа (ИФА) в плазме крови определяют уровень растворимого рецептора ФНО- Р 55. И если его значение составляет от 5105 пг/мл и выше, остающимися высокими к 4 месяцам лечения, прогнозируют неблагоприятное течение заболевания, его прогрессирование и неэффективность химиотерапии, а при уровне ФНО Р 55 3600 пг/мл или ниже до химиотерапии и снижении уровня до 2338 пг/мл или ниже после 4-х месяцев химиотерапии эффективность лечения и благоприятное течение туберкулеза. Предлагаемый способ был успешно применен у 43 больных. Пример 1. Больная И., 41 год. Клинический диагноз инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада МЛУ МБТ (к стрептомицину, тубазиду, рифампицину, канамицину, микобутину), впервые выявленный. Жалобы на кашель, одышку, боли в грудной клетке. Рентгенологические исследования выявили в верхней доле правого легкого сливного характера очаги, инфильтрацию с участками неоднородности. Усилен и деформирован легочной рисунок. Общий анализ крови лейкоциты - 7,2109 л, моноциты - 5 , сегментоядерные нейтрофилы - 67 , лимфоциты - 28 , СОЭ - 7. Уровень растворимого Р 55 ФНО- в начале лечения составил 3800 пг/мл, через 4 месяца лечения - 5450 пг/мл. Прогнозирована неэффективность химиотерапии, что подтверждено рентгенологическим исследованием - динамики не обнаружено. Пример 2. Больной К., 58 лет. Клинический диагноз инфильтративный туберкулез верхней доли левого легкого в фазе распада. Резистентность МВТ (к стрептомицину, тубазиду, рифампицину). Жалобы на кашель, слабость, одышку, боли в грудной клетке, снижение веса. Общий анализ крови лейкоциты - 10,9109 л, моноциты - 12 , сегментоядерные нейтрофилы - 70 , лимфоциты - 10 , СОЭ - 61. Уровень растворимого Р 55 ФНО- в начале лечения был 5425 пг/мл, через 4 месяца химиотерапии он оставался на прежнем уровне. Прогнозирована неэффективность химиотерапии, что подтверждено рентгенологическим исследованием - динамики не обнаружено. Пример 3. Больной И., 47 лет. Клинический диагноз двусторонняя казеозная пневмония, фаза распада, прогрессирующее течение. Рентгенологические исследования выявили в верхних долях обоих легких массивную инфильтрацию с равновеликими полостями деструкции. Корни инфильтрированы, не дифференцируются. В верхних латеральных зонах с обеих сторон плевральные наслоения. Общий анализ крови лейкоциты - 15,0109 л, моноциты - 10 , сегментоядерные нейтрофилы - 40 , лимфоциты - 12 , СОЭ - 65. Уровень растворимого Р 55 ФНО- в начале лечения был 9750 пг/мл. Прогнозирована неэффективность химиотерапии. 3 13512 1 2010.08.30 Несмотря на проводимое лечение, отмечен летальный исход. Пример 4. Больной Н., 40 лет. Клинический диагноз инфильтративный туберкулез верхней доли левого легкого, МЛУ МВТ (к стрептомицину, тубазиду, рифампицину, этионамиду, этамбутолу), рост МВТ обильный в 3-х посевах, впервые выявленный при профосмотре. Рентгенологические исследования выявили в верхней доле левого легкого инфильтрацию с деструкцией. Общий анализ крови лейкоциты - 8109 л, моноциты - 11 , сегментоядерные нейтрофилы - 45 , лимфоциты - 39 , СОЭ - 10. Уровеньрастворимого Р 55 ФНО- в начале лечения составил 2475 пг/мл, через 4 месяца химиотерапии - 2100 пг/мл. Прогнозировано благоприятное течение заболевания и эффективная химиотерапия, что подтверждено рентгенологическим исследованием уменьшение объема инфильтрации и закрытие полостей деструкции. Источники информации 1. Рязанцева Н.В., Наследникова И.О., Зима А.П. и др. Молекулярные механизмы изменения продукции ФНО- мононуклеарами крови при хроническом вирусном гепатите// Бюлл. экспериментальной биологии и медицины.- 2005.- Т. 139.-2.- С. 191-195. 2. Сорока Н.Ф., Зыбалова Т.С. Растворимые рецепторы Р 55 альфа-фактора некроза опухоли у больных с хронической сердечной недостаточностью и признаками сердечной кахексии // Известия национальной академии наук Беларуси.- 2007.-4.- С. 26-30. 3. Степанец О.В., Чичасова Н.В., Насонова М.Б. и др. Растворимые рецепторы ФНОс молекулярной массой 55 кДа при ревматоидном артрите клиническое значение // Клиническая медицина.- 2003.-4.- С. 42-46. 4. Кноринг Б.Р., Фрейдлин И.С., Симбирцев А.С. и др. Характер специфического иммунного ответа и продукция цитокинов мононуклеарами крови больных разными формами туберкулеза легких. Медицинская иммунология.- 2001.- Т. 3.-1.- С. 61-68. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4