Способ оценки интенсивности репаративного процесса в легких при туберкулезе с множественной лекарственной устойчивостью

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ ИНТЕНСИВНОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ПРОЦЕССА В ЛЕГКИХ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ С МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ(71) Заявитель Государственное учреждение Научно-исследовательский институт пульмонологии и фтизиатрии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(72) Авторы Дюсьмикеева Марина Игоревна Суркова Лариса Константиновна Скрягина Елена Михайловна(73) Патентообладатель Государственное учреждение Научно-исследовательский институт пульмонологии и фтизиатрии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(56) Ловачева О.В. Бронхоальвеолярный лаваж в диагностике и оценке эффективности лечения у больных туберкулезом легких. Автореферат диссертации. - М.,1993. - С. 25-28. Лепеха Л.Н. Сурфактантная система легких при экспериментальном туберкулезном воспалении и оценка ее морфо-функционального состояния у человека. Автореферат диссертации. - М.,1995. - С. 27-29. Суркова Л.К. и др. Патоморфология опухолей и инфекционных заболеваний человека. МатериалыРеспубликанской научной конференции патологоанатомов Беларуси. - Мн., 2000. С. 85-86.(57) Способ оценки интенсивности репаративного процесса в легких при туберкулезе с множественной лекарственной устойчивостью, включающий определение морфофункционального состояния и количества макрофагов в бронхоальвеолярном смыве, отличающийся тем, что при значениях количества фагоцитирующих макрофагов от 54 до 69 , биосинтезирующих макрофагов от 26 до 42 и лимфоцитов более 16 интенсивность протекания репаративного процесса в легких оценивают как замедленную, а при значениях количества фагоцитирующих макрофагов от 69 до 83 , биосинтезирующих макрофагов от 9 до 26 , лимфоцитов менее 15 , нейтрофилов менее 5 и фагоцитарного показателя альвеолярных макрофагов от 22 до 46 интенсивность протекания репаративного процесса в легких оценивают как нормальную. Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности химиотерапии больных туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза. 10148 1 2007.12.30 Цель изобретения - повышение эффективности способа. В современных условиях формирование лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза является одной из главных причин недостаточной эффективности проводимого лечения, что лежит в основе рецидивов, обострения и развития прогрессирующих форм туберкулеза легких. Наиболее низкая эффективность лечения отмечается при множественной лекарственной устойчивости возбудителя. Лечение данной категории больных проводится комбинацией основных и резервных препаратов. В условиях современной химиотерапии возрастает актуальность исследования репаративных и компенсаторно-приспособительных реакций, способствующих излечению и возвращению организма в состояние структурного гомеостаза. Клеточный состав бронхоальвеолярного смыва хорошо изучен при целом ряде легочных заболеваний. Основные усилия были направлены на сопоставление клеточного состава бронхоальвеолярного смыва с клиническими аспектами и патогенетическими механизмами заболеваний легких. Результаты этих исследований успешно используются для диагностики активности процесса, контроля за эффективностью лечения, служат одним из критериев при выборе терапевтической тактики и прогнозирования рецидивов 1. Однако бронхоальвеолярный смыв мало изучен при туберкулезе легких в основном из-за инфекционного характера процесса. Изучению функциональной способности альвеолярных макрофагов у больных туберкулезом легких также посвящены единичные исследования 3. Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому методу является метод исследования клеточного состава бронхоальвеолярного смыва при туберкулезе легких,предложенный Лепехой Л.Н. 2 и Ловачевой О.В. 1. Основной задачей данного метода явилось изучение особенностей клеточного состава бронхоальвеолярного смыва у больных туберкулезом легких при различных его клинических проявлениях. Установлено достоверное различие в частоте и выраженности клеточных реакций. Большинство клинических аспектов, свидетельствующих о прогрессирующем течении туберкулеза (деструкция,обильное бактериовыделение), или присоединение отягощающих факторов (неспецифические эндобронхиты) находили свое отражение в увеличении частоты и выраженности нейтрофильной реакции (увеличение доли нейтрофилов более 5 ). Однако при использовании данного метода не проводился комплексный анализ количественных и функциональных характеристик эффекторных клеток легких и сопоставление их с морфологическими изменениями в легких при туберкулезе. Задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, состоит в изучении морфофункционального состояния популяций эффекторов клеточного иммунитета легких при туберкулезе легких с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза. Задача решается способом изучения состояния популяций эффекторов клеточного иммунитета в сопоставлении с морфологическими особенностями репаративных процессов при химиотерапии туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью. Способ осуществляется следующим образом. Полученный путем бронхоальвеолярного лаважа во время бронхоскопии бронхоальвеолярный смыв исследуют с помощью цитологических методов. Профильтрованный бронхоальвеолярный смыв центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 1500 об/мин. Из осадка готовят мазки, высушивают и фиксируют смесью Никифорова, а затем окрашивают по Романовскому-Гимзе. Производят подсчет общего количества клеток в 1 мл бронхоальвеолярного смыва, определение жизнеспособности альвеолярных макрофагов методом прижизненного окрашивания трипановым синим, дифференцированный подсчет клеточных элементов в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, на основании подсчета не менее 500 клеток, дифференцируя альвеолярные макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы, эозинофилы и другие клетки. Функциональное состояние альвеолярных макрофагов, выделенных из бронхоальвеолярного смы 2 10148 1 2007.12.30 ва, оценивают путем определения поглотительной способности макрофагов. Для определения поглотительной способности альвеолярных макрофагов учитывают фагоцитарный показатель (процент фагоцитирующих клеток из числа сосчитанных макрофагов) в тестах с частицами латекса и суспензией суточной культуры стафилококка. Наряду с базовыми уровнями оценивается стимулированный фагоцитарный показатель после инкубации с продигиозаном для выявления резервных функциональных возможностей альвеолярных макрофагов. Наряду с отмеченными показателями определяют относительное процентное содержание в популяции альвеолярных макрофагов биосинтезирующих, фагоцитирующих, секретирующих макрофагов. Предлагаемый способ был применен при исследовании бронхоальвеолярного смыва 78 больных с туберкулезом легких, в том числе с инфильтративным туберкулезом - 32,с диссеминированным - 9 и с фиброзно-кавернозным - 37. При этом у 59 больных туберкулезом легких отмечалась фаза прогрессирования, а у 19 - фаза стабилизации процесса. Контрольную группу составили 5 практически здоровых лиц. Пример 1. Больная Р., 47 лет, клинический диагноз фиброзно-кавернозный туберкулез легких с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза (устойчивость к стрептомицину, изониазиду, рифампицину), больна туберкулезом с 1997 года, неоднократно получала стационарное лечение. Направлена в клинику ГУ НИИ пульмонологии и фтизиатрии МЗ РБ в связи с ухудшением состояния, жалобами на кашель, одышку, боли в грудной клетке. Рентгенологически в верхней доле левого легкого на фоне фиброзных изменений разновеликие очаговые тени, в верхней доле правого легкого на фоне очаговых фокусов,фиброзных изменений - полость. Нарушение функции внешнего дыхания по рестриктивному типу. Общий анализ крови лейкоциты - 8,4109/л, моноциты - 15 , сегментоядерные нейтрофилы - 40 , лимфоциты - 38 , СОЭ - 60. В эндопульмональной цитограмме фагоцитирующих макрофагов - 57,81,7 , биосинтезирующих макрофагов - 39,71,7 , лимфоцитов - 33,11,9 . Прогнозирована замедленная интенсивность протекания репаративного процесса в легких, что подтверждено рентгенологическим исследованием - динамики не обнаружено. Пример 2. Больной М., 27 лет, клинический диагноз фиброзно-кавернозный туберкулез легких с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза (устойчивость к стрептомицину, изониазиду, рифампицину, канамицину, этамбутолу), болен туберкулезом с 2001 года. Направлен в клинику ГУ НИИ пульмонологии и фтизиатрии МЗ РБ в связи с ухудшением состояния, жалобами на кашель, слабость, одышку, боли в грудной клетке,снижение веса. Нарушение функции внешнего дыхания - замедленная скорость выдоха в средних и мелких бронхах. Общий анализ крови лейкоциты - 3,2109/л, моноциты - 11 , сегментоядерные нейтрофилы - 54 , лимфоциты - 29 , СОЭ - 8. В эндопульмональной цитограмме фагоцитирующих макрофагов - 65,81,7 , биосинтезирующих макрофагов - 28,71,7 , лимфоцитов - 25,11,9 . Прогнозирована замедленная интенсивность протекания репаративного процесса в легких, что подтверждено рентгенологическим исследованием - динамики не обнаружено. Пример 3. Больная С., 33 года, клинический диагноз инфильтративный туберкулез верхней доли правого легкого с множественной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза (устойчивость к стрептомицину, изониазиду, рифампицину). Направлена в клинику ГУ НИИ пульмонологии и фтизиатрии МЗ РБ в связи с жалобами на кашель с мокротой,одышку, боли в грудной клетке, слабость. 3 10148 1 2007.12.30 Рентгенологически в верхней доле правого легкого на фоне сгущенного деформированного легочного рисунка разновеликие очаговые тени и фокусные тени неоднородной структуры. Нарушение функции внешнего дыхания смешанного типа. Общий анализ крови лейкоциты - 7,8109/л, моноциты - 4 , сегментоядерные нейтрофилы - 49 , лимфоциты - 32 , СОЭ-12. В эндопульмональной цитограмме фагоцитирующих макрофагов - 75,71,8 , биосинтезирующих макрофагов - 14,71,7 , лимфоцитов - 8,11,9 , нейтрофилов 3,90,7 , фагоцитарный показатель - 33,52,5 . Прогнозирована нормальная интенсивность протекания репаративного процесса в легких, что подтверждено рентгенологическим исследованием - получена положительная рентгенологическая динамика. Источники информации 1. Ловачева О.В. Бронхоальвеолярный лаваж в диагностике и оценке эффективности лечения у больных туберкулезом легких Автореф. дис. - М., 1993. - С. 25-28. 2. Лепеха Л.Н. Сурфактантная система легких при экспериментальном туберкулезном воспалении и оценка ее морфо-функционального состояния у человека Автореф. дис. М., 1995. - С. 27-29. 3. Суркова Л.К. и др. Патоморфология опухолей и инфекционных заболеваний человека. МатериалыРеспубликанской научной конференции патологоанатомов Беларуси. - Мн., 2000. - С. 85-86. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4