Способ направления клеточного иммунного ответа против ВИЧ-инфицированной клетки у млекопитающих, вектор экспрессии, ДНК

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что СВ 4-фрагмент удален от мембраны указанной терапевтической клетки по меньшей мере на 48 ангстремов или по меньшей мере на 72 ангстрема, 4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что внутриклеточный участок представляет собой сигналопреобразующий участок белка Т-гслсточного рецептора, белка В-клеточпого рецептора или белка Рс-клеточного рецептора.5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что указанный белок Г-клеточного рецептора представляет собой С белок, представленный в виде последовательности ЗЕО 113 ЫО 37.6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что терапевтическую клетку выбирают из группы, состоящей из (а) Т-лимфоцитов (Ь) цитотоксических Т-лимфоцитов (с) натуральных киллеров (а) нейтрофилов (е) гранулоцитов (Г) макрофагов (д) мастоЦитов (11) клеток Не 1 а (1) эмбриональных стволовых клеток.7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что трансмембрап-тньтй участок представляет собой СВЗ-трансмембранный домен или СВ 34-трансмембранный домен.8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что СВ 4-фрагмент отделен от мембраны указанной терапевтической клетки с помощью одной или более белковой альфа-спирали.9. Вектор экспрессии для клеток млекопитающих, который экспрессирует белковый мембраносвязанный химерный рецептор, включающий (а) внеклеточный участок, содержащий СВ 4-фрагмент, состоящий из аминокислот 1-3 94, представленных в виде последовательности ЗЕО Ш НО 29, или аминокислот 1-200, представленных в виде последовательности БЕО Ш МО 31, который способен специфически распознавать и связывать ВИЧ-инфицированную клетку, но который не является посредником ВИЧинфекции, (Ь) трансмембранный участок, и (с) внутриклеточный участок, который способен передавать указанной клетке сигналы о разрушении связанной рецептором ВИЧинфицированной клетки.10. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что указанный трансмембранный участок включает последовательность, представленную в виде ЗЕО П) МО 33 или 35.11. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что СВ 4-фрагмент удален от мембраны указанной клетки по меньшей мере на 48 ангстремов или по меньшей мере на 72 ангстрема.12. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что внутриклеточный участок представляет собой сигналопреобразующий участок белка Т-клеточного рецептора, белка В-клеточного рецептора или белка Рс-клеточного рецептора.13. Вектор по п. 12, отличающийся тем, что белок Т-клеточного рецептора представ ляет собой Д белок, представленный в виде последовательности ЗЕО 113 ЫО 37.14. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что указанный рецептор включает СВЗтрансмембранный домен или СВ 34-трансмембранньтй домен.15. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что СВ 4-фрагмент отделен от мембраны указанной клетки с помощью одной или более белковой альфаспирали.16. ДНК, кодирующая мембраносвязанный белковый химерный рецептор, включающий внеклеточный участок, содержащий С 1)4-фрагмент, представленный в виде последовательностей ЗЕО 113 МО 29 или 31, который способен специфически распознавать и связывать ВИЧ-инфицированную клетку, но который не является посредником ВИЧинфекции, трансмембраннь 1 й участок, представленный в виде последовательности ЗЕО Ю ЫО 33 или 35, и внутриклеточный участок, содержащий сигналопреобразующий участок белка Г-клеточного рецептора, белка В-клеточного рецептора или белка Рс-клеточного рецептора.17. Вектор экспрессии для клеток млекопитающих, включающий ДНК по п. 16.Изобретение касается функциональных химер между СПАТЬ-фрагментами И рецепторами иммунных клеток, которые способны направлять иммунные клетки для лизиса ВИЧ-инфицированных клеток, но, которые не делают иммунные клетки восприимчивыми к ВИЧ-инфекции. Изобретение направлено также на новый и эффективный способ терапии ВИЧ.Распознавание Т-клетки антигена через рецептор Т-клетки является основой ряда иммунологических явлений. Т-клетки управляют так называемым опосредованным клетками иммунитетом. Он вызывает разрушение клеткамииммунной системы чужеродных тканей или инфицированных клеток. Существуютмодулируют иммунную реакцию, И цитотоксические клетки (или клетки-киллеры), КОТОрЫВ МОГУТ НЭПОСрЭДСТВВННО убивать аномальные клетки.Т-КЛЭТКЭ, которая РЭСПОЗНЭЭТ И СВЯЗЫВЭЭТ уникальный антиген,представленный на поверхности другой КЛЕТКИ, становится активизированнойзатем ОНЗ МОЖЕТ размножаться, И если ЭТО - ЦИТОТОКСИЧЭСКЭЯ КЛЭТКЗ, ТО она можетВ 1984 г. ВИЧ был признан этиологическим агентом СПИДа. Начиная с того времени, определение СПИДа неоднократно пересматривалось в отношении тех критериев, которые должны быть включенЬ в диагноз. Однако, несмотря на колебания диагностических параметров, неизменным общим знаменателем для СПИДа является инфицирование ВИЧ и последующее развитие постоянных симптомов, свидетельствующих о генерализации патологических процессов и болезней, вызываемых СПИДом, таких, как вторичные инфекции, неоппазмы иневрологические болезни. Нагпзогтз Ргйпсйрез от Пптегпа Меойсйпе, 12 Нт ее, МсСЗгаи/ НШ (1991).ВИЧ - это ретровирус человека из группы лентивирусов. Четыре обнаруженных человеческих ретровируса относятся к двум различным группам к Тлимфотропным (или лейкозным) ретровирусам человека, НТ/-1 и НТЦ/-2 и вирусам иммунодефицита человека, ВИЧ -1 и ВИЧ -2. Первые представляют собой трансформирующиеся вирусы, в то время как последние являютсяцитопатическими ВИ руса М И.ВИЧ -1 был идентифицирован как наиболее общая причина СПИДа во всеммире. Гомология последовательности между ВИЧ-2 и ВИЧ-1 составляетпредставителями группы вирусов иммунодефицита обезьян (5/). См. Сиггап, 1. е а. Зсйепсе, 32921357-1359 (1985) //е 1 эз, Н ет а. Машге, 3242572-575 (1986).ВИЧ имеет обычные ретровирусные гены (епу, 999, и щ), а также шесть дополнительных генов, участвующих в репликации и другой биологическойСПИДа является глубокая иммуносупрессия, в основном промежуточного клеточного иммунитета. Такая иммуносупрессия вызывает разнообразные заболевания, вызванные условно-патогенными микроорганизмами, в частностиОсновной причиной иммунного нарушения при СПИДе является количественный и качественный дефицит субпопуляции вырабатываемых тимусомТ-лимфоцитов, т.е. Т 4-популяции. Эту субпопуляцию клеток определяютфенотипично по наличию поверхностной СПИ-молекулы, которая, как доказано, является клеточным рецептором для ВИЧ. Ва 9 ейзл е а., Машге 3122763 (1984). Хотя Т 4-клетка является основным видом клетки, инфицируемой ВИЧ, по существу любая клетка человека, которая экспрессирует СПИ-молекулу на своейповерхности, способна связываться с ВИЧ и может быть инфицирована ВИЧ.Обычно СВ 4 Т-клетки выполняют роль хелпера/индуктора, функция которых заключается в передаче сигнала активации к В-клеткам, либо в стимулировании превращения Т-лимфоцитов с реципрокным СВЗ-маркром в цитотоксические/супрессорные клетки. Кейппегг апс Зстоззтап, СеН 192821-827ВИЧ связывается специфически и с высоким сродством через фрагмент секвенирования аминокислот в вирусной оболочке (9 р 12 О) с частью /1 региона СВ 4-молекулы, расположенной около е М-концов. После связывания вирус сливается с мембраной клетки-мишени и интернализируется. После интернализации вирус использует обратную транскриптазу энзима для транскрибирования своей геномной РНК в ДНК, которая интегрируется в клеточнуюДНК, где она существует в течение жизни клетки как провирус.Провирус может оставаться скрытым либо активизироваться для транскрибирования мРНК и геномной РНК, что вызывает синтез белка, сборку,формирование нового вириона и отпочковывание вируса от поверхности клетки. Хотя точный механизм, с помощью которого вирус вызывает гибель клетки, не установлен, считается, что основной механизм заключается в массивном отпочковывании вируса от поверхности клетки, которое приводит к разрушениюПЛЭЗМЭННОЙ мембраны И ВЫЗЫВЭЭТ нарушение осмотического равновесия.