Производное бициклической аминокислоты, способы его получения, производное гидантоина и фармацевтическая композиция

07 69/74, 61/12, 61 25/00 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ(71) Заявитель ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ(72) Авторы Дэвид Рид ХЕЛТОН Джеймс Аллен МОНН Даррил Дарвин ШЕПП Джозеф Патрик ТИЦЦАНО(73) Патентообладатель ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ(57) 1. Производное бициклической аминокислоты общей формулы 2 где Х представляет собой (СН 2),2 представляет собой 24, а 3 водород или 2 представляет собой водород, а 324,1 и 4 каждый независимо представляют собой водород, С 1-С 10-алкил, С 2-С 10 алкенил, С 6-С 12-арил или С 6-С 12-арил-1-4-алкил, равно 1,или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п. 1, представляющее собой стереоизомер относительной конфигурации или его фармацевтически приемлемая соль. 3. Соединение по любому из пп. 1-2, где 1 и 4 независимо представляют собой водород, С 1-С 4-алкил, С 6-С 12-арил или С 6-С 12-арил-1-4-алкил, или его фармацевтически приемлемая соль. 4. Соединение по п. 3, где 1 и 4 независимо представляют собой водород или С 1-С 4 алкил, или его фармацевтически приемлемая соль. 4921 1 5. Соединение по п. 2, представляющее собой -2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6 дикарбоновую кислоту, ее С 1-С 4-алкиловый, С 6-С 12-ариловый или С 6-С 12-арил-1-4 алкиловый эфир или фармацевтически приемлемую соль. 6. Соединение по п. 5, представляющее собой -2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6 дикарбоновую кислоту, ее С 1-С 4-алкиловый эфир или фармацевтически приемлемую соль. 7. Соединение по п. 6, представляющее собой -2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6 дикарбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль. 8. Соединение по п. 7, представляющее собой -2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6 дикарбоновую кислоту. 9. Способ получения производного бициклической аминокислоты по п. 1, заключающийся в том, что соединение формулы 2 где Х представляет собой (2), равно 1,2 представляет собой СО 24, а 3 водород или 2 представляет собой водород, а 3 СО 24,4 представляет собой карбоксизащитную группу,подвергают гидролизу с последующим необязательным удалением карбоксизащитной группы, необязательной этерификацией одной или обеих карбоксигрупп, необязательным отделением диастереоизомеров и/или разделением энантиомеров и необязательным получением фармацевтически приемлемой соли соединения по п. 1. 10. Способ получения производного бициклической аминокислоты по п. 1, заключающийся в том, что соединение формулы 2 где ,иимеют значения, указанные в п. 9,подвергают взаимодействию с цианидом щелочного металла и аммониевой солью, затем проводят гидролиз полученного промежуточного соединения с последующим необязательным удалением карбоксизащитной группы, необязательной этерификацией одной или обеих карбоксигрупп, необязательным отделением диастереоизомеров и/или разделением энантиомеров и необязательным получением фармацевтически приемлемой соли соединения по п. 1. 11. Способ получения производного бициклической аминокислоты по п. 1, заключающийся в том, что соединение формулы 2 4921 1 где 1 представляет собой карбоксизащитную группу и, 2 и 3 имеют значения, указанные в п. 9,подвергают гидролизу с последующим необязательным удалением карбоксизащитной группы, необязательной этерификацией одной или обеих карбоксигрупп, необязательным отделением диастереоизомеров и/или разделением энантиомеров и необязательным получением фармацевтически приемлемой соли соединения по п. 1. 12. Фармацевтическая композиция, воздействующая на отрицательно сопряженные цАМФ-зависимые метаботропные глутаматные рецепторы, содержащая фармацевтически эффективное количество соединения по п. 1 в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или наполнителями. 13. Производное гидантоина формулы 2 где Х представляет собой (2), равно 1,2 представляет собой СО 24, а 3 водород или 2 представляет собой водород, а 3 СО 24,4 представляет собой карбоксизащитную группу. 14. Соединение по п. 13, где 4 представляет собой С 1-С 6-алкил.(56)0500443 1, 1992.0376072 2, 1990.3532744 , 1970. У млекопитающих в центральной нервной системе (ЦНС) передача нервных импульсов регулируется за счет взаимодействия между нейротрансмиттером, который выделяется посылающим нейроном, и рецептором на поверхности принимающего нейрона, в результате чего происходит возбуждение данного принимающего нейрона.- глутамат, который является наиболее часто встречающимся нейротрансмиттером ЦНС, опосредует главные пути возбуждения у млекопитающих, и относится к аминокислотам возбуждения(ЕАА). Рецепторы, соответствующие глутамату,называются рецепторами аминокислот возбуждения (ЕАА рецепторы). См.. ., 11, 25 (1990). Аминокислоты возбуждения имеют важное физиологическое значение, играя роль в различных физиологических процессах, таких как длительное потенцирование (обучение и память), развитие синаптической пластичности, контроль моторики, дыхание, регуляции сердечно-сосудистой системы, эмоциональные состояния и сенсорное восприятие. Чрезмерная или несоответствующая стимуляция рецепторов аминокислот возбуждения приводит к повреждению или гибели нейрональных клеток за счет механизма, известного как токсическая возбудимость. Предполагают, что этот процесс опосредует в дегенерации нейронов в различных состояниях. Медицинские последствия такой дегенерации нейронов делают лечение таких дегенеративных нейрологических процессов важной терапевтической целью. 3 4921 1 Рецепторы аминокислот возбуждения подразделяются на два главных типа. Те рецепторы, которые непосредственно связаны с открытием катионных каналов в клеточных мембранах нейронов, называют ионотропными. Этот тип рецепторов подразделяется на,по крайней мере, три подтипа, которые определяются по деполяризующему действию селективного агониста -метиласпартата . -амино-3-гидрокси-5-метилизоксазол-4-пропионовой кислоты (АМРА) и каиновой кислоты (КА). Вторым главным типом рецептора является рецептор белка или метаботропный рецептор аминокислоты возбуждения, связанный с вторичным мессенджером. Этот второй тип сопряжен с множеством систем вторичных мессенджеров, которые приводят к повышенному гидролизу фосфоинозитидов, активации фосфолилазы , увеличению или уменьшению образования цАМФ и к изменениям в функционировании ионных каналов.,. ., 14, 13 (1993). Оба типа рецепторов, по-видимому, не только осуществляют нормальную синаптическую передачу по схеме возбуждения, но также участвуют в модификации синаптических связей в процессе развития и на протяжении всей жизни. ,. ., 11, 508 (1990),. 15,41 (1990). Метаботропные рецепторы глутамата представляют в высшей степени гетерогенное семейство глутаматных рецепторов, которые связаны с множественными путями вторичных мессенджеров. Обычно эти рецепторы модулируют пресинаптическое высвобождение глутамата и постсинаптическую чувствительность нейрональных клеток на возбуждение под действием глутамата. Метаботропные рецепторы глутаматабыли с фармакологической точки зрения подразделены на два подтипа. Одна группа рецепторов позитивно сопряжена с фосфолипазой С, которая вызывает гидролиз клеточных фосфоинозитидов (Р 1). Эту первую группу называют Р 1-связанными метаботропными рецепторами глутамата. Вторая группа рецепторов негативно связана с аденилциклазой, которая предотвращает форсколинстимулированное накопление циклического аденозинмонофосфата (цАМФ).,. ., 14, 13 (1993). Рецепторы этой второй группы называют цАМФ-связанными метаботропными рецепторами глутамата. Агонисты цАМФ-связанных метаботропных рецепторов глутамата должны быть полезны при лечении острых и хронических неврологических состояний и психиатрических состояний. Недавно были обнаружены соединения, которые влияют на метаботропные рецепторы глутамата, но не оказывают действия на ионотропные рецепторы глутамата. (1,3)-1 аминоциклопентан-1,3-дикарбоновая кислота (1,3-АСРД) является агонистом Р 1-связанных и цАМФ-связанных метаботропных рецепторов глутамата. , ,(1992). (2,3,4)-2-(карбоксициклопропил)глицин-(1) недавно был описан как селективный агонист цАМФ-связанного метаботропного рецептора глутамата однако, при более высоких концентрациях это соединение обладает активностью в отношении Р-связанных метаботропных рецепторов.., . . ., 184, 205 (1990)., . . , 107, 539 (1992)., . ., 63, . 769-772 (1994). Настоящее изобретение относится к соединениям, которые оказывают селективное воздействие на негативно-сопряженные связанные с цАМФ метаботропные рецепторы глутамата. Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы 2 2 гдепредставляет (СН 2) 2 представляет 24 и 3 представляет водород или 2 представляет водород и 3 представляет СО 24 4 4921 1 1 и 4, независимо, представляют водород, 1-С 10-алкил,1-С 10-алкенил, арил или арилалкил иравно 1 или их фармацевтически приемлемым солям. Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулыв сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или эксипиентами. Соединения по настоящему изобретению используются в способе воздействия на цАМФ-связанные метаботропные рецепторы глутамата, а также в способах лечения неврологических заболеваний или психиатрических заболеваний, которые связаны с рецепторами аминокислот возбуждения,которые включают введение соединения формулы . Примеры неврологических заболеваний, которые можно лечить с помощью соединения формулы , включают церебральные недостаточности, возникающие после коронарного шунтирования и пересадки органов,церебральную ишемию (например, инфаркт и остановку сердца) травмы спинного мозга травмы головы болезнь Альцгеймера хорею Хантингтона амиотрофический латеральный склероз вызванное СПИДом слабоумие спазмы мышц головные боли при мигрени недержание мочи конвульсии перинатальную гипоксию гипогликемическое повреждение нейронов толерантность к лекарствам синдром отмены и отказ от приема лекарств(то есть опиатов, бензодиазепинов, никотина, кокаина или этанола) отказ от курения зрительные повреждения и ретинопатию расстройства восприятия идиопатическую или вызванную лекарствами болезнь Паркинсона рвоту отек мозга хронические боли нарушения сна синдром Туретта нарушения внимания и двигательную заторможенность. Примеры психиатрических заболеваний, которые можно лечить с помощью соединений формулы , включают шизофрению, беспокойство и родственные расстройства (например,приступы паники и связанные со стрессами расстройства), депрессию, биполярные расстройства, психозы и синдром навязчивых состояний. Настоящее изобретение относится также к соединениям, которые используются для синтеза соединений формулы . Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы 2 гдепредставляет (СН 2)равно 1 2 представляет СО 24,3 представляет водород или 2 представляет водород, а 3 представляет СО 24 а, и 4 представляет водород или карбоксизащитную группу и их солям. Настоящее изобретение относится также к способу получения соединения формулы ,или его фармацевтически приемлемой соли, который включает 1). гидролиз соединения формулы 2 4921 1 гдепредставляет (СН 2)равно 1 2 представляет СО 24 и 3 представляет водород или 2 а представляет водород,3 а представляет СО 24, и 4 представляет водород или карбоксизащитную группу 2). взаимодействие соединения формулы где , 2 и 3 имеют указанные выше значения, с цианидом щелочного металла и солью аммония и гидролиз полученного промежуточного соединения как указано в (1) выше или 3). гидролиз соединения формулы 2, 2 гдепредставляет карбоксизащитную группу и , 2 а и 3 а имеют указанные выше значения и 4). необязательное удаление карбоксизащитной группы и 5). необязательное этерифицирование одной или обеих карбоксильных групп и 6). необязательное отделение диастереоизомеров и/или разделение энантиомеров и 7). необязательное получение фармацевтически приемлемой соли соединения формулы . Термин 1-С 10-алкил представляет неразветвленный, разветвленный или циклический алкил, содержащий от одного до десяти атомов углерода. Обычные разветвленные или неразветвленные 1-С 10-алкильные группы включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил,2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 2,2-диметилбутил, 2,3-диметилбутил, 3,3 диметилбутил, гептил, н-октил, 2,2-диметилгексил, 2,5-диметилгексил, 2-метилгептил, 4 метилгептил, 2,2,4-триметилпентил, 2,3,4-триметилпентил, нонил, 3,5,5-триметилгексил,децил, 3,7-диметилоктил и т.п. Термин 1-С 10-алкил включает термины 1-С 6-алкил и 1-4-алкил. Обычные циклические алкильные группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и т.п. Типичные 1-С 6-алкильные группы включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил,н-пентил, изопентил, неопентил и н-гексил. Термин 2-С 10-алкенил включает разветвленные или неразветвленные алкильные цепочки, содержащие от двух до десяти атомов углерода и имеющие одну или несколько углерод-углеродных двойных связей, такие как диены и триены. Эта группа включает также как Е, так иизомеры. Характерные радикалы этой группы включают винил, аллил, алленил, 1-бутенил, 2-бутенил, 2-метил-1-пропенил, 3-бутенил, 2-метил-2-пропенил,бутадиенил, 1-пентенил, 2-пентенил, 2-метил-2-бутенил, 4-пентенил, 3-метил-2-бутенил,3-метил-1,2-бутадиенил, 3-гексенил, 2-гексенил, 4-метил-3-пентенил, 4-гексенил, 5 гексенил, 3-метил-1-пентен-3-ил, 4-метил-3-пентенил, 6-метил-5-гептен-2-ил, 7-октенил,1-октен-3-ил, 3-ноненил, 2,4-диметил-2,6-гептадиенил, 3,7-диметил-6-октенил, 5-деценил,9-деценил, 2,6-диметил-7-октенил и т.п. Термин 2-С 10-алкенил включает термин С 2 С 6-алкенил. 1 а 4921 1 Фраза стереоизомерное соединение представляет оптический изомер соединения формулы . Характерные стереоизомерные соединения включают 1, 2, 5, 6 изомер,1, 2, 5, 6 изомер, 1, 2, 5, 6 изомер, 1, 2, 5, 6 изомер, 1, 2, 5, 6 изомер,1, 2, 5, 6 изомер, 1, 2, 5, 6 изомер и 1, 2, 5, 6 изомер. Фраза диастереоизомерное соединение обозначает смесь двух не налагаемых стереоизомеров соединения формулы . Характерные диастереоизомерные соединения включают смесь 1, 2, 5, 6, смесь 1, 2, 5, 6, смесь 1, 2, 5, 6 и смесь 1, 2, 5, 6. Предпочтительным диастереоизомерным соединением является смесь 1, 2, 5, 6. Предпочтительным энантиомером является 1, 2, 5, 6. Термин карбоксизащитная группа в том смысле, как здесь использован, относится к одному из производных сложного эфира группы карбоновой кислоты, которые обычно используют для блокирования или защиты карбоксильных групп, когда проводят реакции на других функциональных группах. Защита карбоксильных групп в целом описана,, 2 .,, , 1991. Примеры таких карбоксизащитных групп включают метил, этил, метоксиметил, метилтиометил, трифенилметил, бензил, 4-нитробензил, 4-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил, 2,4 диметоксибензил, 2,4,6-триметоксибензил, 2,4,6-триметилбензил, бензгидрил, трет-бутит,трет-амил, тритил, триметилсилил, трет-бутилдиметилсилил, аллил, 1-(триметилсилилметил)проп-1-ен-3-ил и т.п. Конкретными предпочтительными карбокси защитными группами являются (1-С 6)-алкильные группы, такие как метил и этил. Термин защищенная карбокси относится к карбоксильной группе, содержащей карбоксизащитную группу. Термин азотзащитная группа в том смысле, как он здесь использован, относится к заместителям на аминогруппах, которые обычно используют для блокирования или защиты функциональных аминогрупп при проведении реакции на других функциональных группах. Защита аминогрупп описана в целом ,, , 1973 и,2,, , 1991. Примеры защищающих азот групп включают бензил, трет-бутил, аллил, трифенилметил, трет-бутилдиметилсилил, трифенилсилил, формил, тритил, фталимидо, трихлорацетил, хлороацетил, фталоил, 2-нитрофеноксиацетил,бензилоксикарбонил, метоксикарбонил, 2-метил-бензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, аллилоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил и т.п. Термин защищенный амино относится к первичному или вторичному амину, содержащему аминозащитную группу. Термин С 1-С 4-алкокси представляет такие группы, как метокси, этокси, н-пропокси,изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси и трет-бутокси. Термин галоген относится к фтору, хлору, брому и иоду. Термин алкоксикарбонил означает карбоксильную группу, имеющую 1-С 6-алкильную группу, присоединенную к карбонильному углероду через атом кислорода. Представители этой группы включают метоксикарбонил, этоксикарбонил, н-пропоксикарбонил,н-бутоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил и т.п. Предпочтительной алкоксикарбонильной группой является метоксикарбонил. Термин замещенный фенил в том смысле, как здесь использован, представляет фенильную группу, замещенную одним или двумя фрагментами, выбранными из группы,включающей из галогена, гидрокси, циано, нитро, 1-6-алкил, 1-4-алкокси, алкоксикарбонил, защищенную карбокси, карбоксиметил, гидроксиметил, амино, защищенную амино,аминометил или трифторметил. Примеры замещенных фенильных групп включают 4 хлорфенил, 2,6-дихлорфенил, 2,5-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 3-хлорфенил, 3-бромфенил, 4-бромфенил, 3,4-дибромфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-фторфенил, 4-гидроксифенил,3-гидроксифенил, 2,4-дигидроксифенил, 3-нитрофенил, 4-нитрофенил, 4-цианофенил, 4 метилфенил, 4-этилфенил, 4-этоксифенил, 4-карбоксифенил, 4-(гидроксиметил)фенил, 4 аминофенил, 4-пропилфенил, 4-бутилфенил, 4-трет-бутилфенил, 3-фтор-2-метилфенил, 2,3 дифторфенил, 2,6-дифторфенил, 2,6-диметилфенил, 2-фтор-5-метилфенил, 2,4,6-трифтор 7 4921 1 метил, 2-трифторметилфенил, 2-хлор-5-трифторметилфенил, 2,4-бис(трифторметил)фенил,3,5-бис(трифторметил)фенил, 2-метоксифенил, 3-метоксифенил, 3,5-диметоксифенил, 4 гидрокси-3-метилфенил, 3,5-диметил-4-гидроксифенил, 4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил,2-амино-5-метилфенил, 4-амино-3-трифторметил-фенил, 3-амино-4-гидроксифенил, 2-метил 4-нитрофенил, 4-метокси-2-нитрофенил, 2,4-динитрофенил, 3-циано-4-нитрофенил и т.п. Термин арил представляет такие группы, как фенил, замещенный фенил и нафтил. Термин арилалкил представляет 1-С 4-алкильную группу, содержащую одну или несколько арильных групп. Представители этой последней группы включают бензил, 2 нитробензил, 4-нитробензил, 1-фенилэтил, 2-фенилэтил, 3-фенилпропил, 4-фенилбутил, 2 метил-2-фенилпропил, (4-хлорфенил)метил, (2,6-дихлорфенил)метил, бис(2,6-дихлорфенил)метил, (4-гидроксифенил)метил, (2,4-динитрофенил)метил, трифенил, метил, (4 метоксифенил)дифенилметил, бис(4-метоксифенил)метил, -нафтилдифенилметил, бис(2 нитрофенил)метил и т.п. Термин влияющий относится к соединению формулы , которое действует как агонист на рецептор аминокислоты возбуждения. Термин рецептор аминокислоты возбуждения относится к метаботропному рецептору глутамата, рецептору, который сопрягается с клеточными эффекторами через СТР-связывающие белки. Термин цАМФсвязанный метаботропный рецептор глутамата относится к метаботропному рецептору,который сопряжен с ингибированием активности аденилатциклазы. Термин неврологические расстройства относится как, к активным, так и хроническим нейродегенеративным состояниям, которые включают церебральную недостаточность после коронарного шунтирования и пересадки, церебральную ишемию (например,инфаркт, приводящий к остановке сердца), травму спинного мозга, травму головы, болезнь Альцгеймера, хорею Хантингтона, амиотрофический латеральный склероз, вызванное СПИДом слабоумие, перинатальную гипоксию, гипогликемическое повреждение нейронов, повреждения зрения и ретинопатию, расстройства восприятия, идиопатическую и вызванную лекарствами болезнь Паркинсона. Этот термин включает также другие неврологические состояния, которые вызваны глутаматной дисфункцией, включая мышечные спазмы, мигрени, недержание мочи, толерантность к лекарствам, синдром отмены и отказ от приема (то есть опиатов, бензодиазепинов, никотина, кокаина или этанола), отказ от курения, рвоту, отек мозга, хронические боли, нарушения сна, конвульсии, синдром Туретта, нарушения внимания и двигательную заторможенность. Термин психиатрические расстройства относится как к острым, так и хроническим психиатрическим состояниям, включая шизофрению, беспокойство и родственные расстройства(например, приступы паники и вызванные стрессами сердечно-сосудистые расстройства), депрессию, биполярные расстройства, психозы и синдром навязчивых состояний. Настоящее изобретение включает фармацевтически приемлемые соли соединений формулы . Эти соли могут существовать в связи с кислотной или основной частью молекулы и могут существовать в виде солей присоединения кислот, солей первичного, вторичного, третичного или четвертичного аммония, щелочного металла или щелочноземельного металла. Обычно соли присоединения кислот получают путем взаимодействия кислоты с соединением формулы . Соли щелочных и щелочно-земельных металлов обычно получают путем взаимодействия гидроксидной формы желаемого металла с соединением формулы , где 1 и/или 4 представляет водород. Кислоты, обычно используемые для получения таких солей, включают такие неорганические кислоты, как хлористоводородная, бромистоводородная, иодистоводородная,серная и фосфорная кислота, а также такие органические кислоты, как паратолуолсульфоновая, метансульфоновая, щавелевая, пара-бром-фенилсульфоновая, угольная, янтарная, лимонная, бензойная и уксусная кислоты, и близкие неорганические и органические кислоты. Таким образом, такие фармацевтически приемлемые соли включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, аммоний, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат,8 4921 1 деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капрат, гептаноат, пропиолат, оксалат,малонат, сукцинат, суберат, себакат, фумарат, гиппурат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин 1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, инитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, -гидроксибутират, гликолят, малеат, тартрат, метансульфонат,пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат, соли магния,тетраметиламмония, калия, триметиламмония, натрия, метиламмония, кальция и т.п. Соединения формулыпо настоящему изобретению имеют четыре асимметрических атома углерода. Асимметрическими центрами являются атомы углерода, замещенные амино- и карбоксигруппами, атом углерода, которому присоединены 2 и 3, и атом углерода, принадлежащий двум конденсированным кольцам. Асимметрические атомы углерода находятся в положениях 2, 6, 1 и 5, соответственно. Поэтому соединения по настоящему изобретению могут существовать как практически чистые оптические изомеры, как смесь двух энантиомеров (включая рацемические модификации) и как смеси двух диастереоизомеров. Если 2 представляет СО 24,1, 3 и 4 представляют водород, то биологически активный и наиболее предпочтительный стереоизомер, по данным анализа связывания с рецептором, имеет положительное оптическое вращение . С помощью рентгеновского анализа была определена структура отдельного кристалла наиболее предпочтительного энантиомера, что позволяет представить относительную стереохимическую конфигурацию следующим образом 2 Было установлено, что абсолютная стереохимическая конфигурация этого наиболее предпочтительного энантиомера соответствует 1, 2, 5, 6 форме. Поэтому настоящее изобретение включает стереоизомерные соединения формулы , имеющие ту же предпочтительную стереохимическую конфигурацию, смеси энантиомеров, имеющих эту предпочтительную стереохимическую конфигурацию (включая рацематы) и смеси диастереоизомеров, имеющих эту предпочтительную стереохимическую конфигурацию. Хотя считается, что все соединения формулынастоящего изобретения селективно воздействуют на негативно-сопряженные цАМФ-связанные метаботропные рецепторы глутамата, некоторые соединения по настоящему изобретению предпочтительны для такого использования. Предпочтительно, чтобы 2 представлял 24, 3 представлял водород,1 и 4, независимо, представляли бы водород, 1-С 6-алкил, арил или арилалкил. Характерные соединения этой предпочтительной группы формулывключают 2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновую кислоту, диметил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, дибутил 2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, дигексил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан 2,6-дикарбоксилат, дифенил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, и дибензил 2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат. Некоторые соединения по настоящему изобретению являются наиболее предпочтительными для целей воздействия на метаботропные рецепторы глутамата, связанные с цАМФ. Более предпочтительно, чтобы 1 и 4 были, независимо, водородом, С 1-С 4-алкилом, арилом или арилалкилом. Характерные соединения этой наиболее предпочтительной группы соединений включают 2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновую кислоту, диметил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан 2,6-дикарбоксилат, диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, дибутил-2 аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, дифенил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6 дикарбоксилат и дибензил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат. 9 4921 1 Некоторые соединения являются наиболее предпочтительными для использования для воздействия на метаботропные рецепторы глутамата, связанные с цАМФ. Наиболее предпочтительные 1 и 4, независимо, представляют водород или С 1-С 4-алкил. Характерные соединения этой группы наиболее предпочтительных соединений включают 2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикароковую кислоту, диметил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан 2,6-дикарбоксилат, диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, дибутил-2 аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, и дипропил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан 2,6-дикарбоксилат. Наиболее предпочтительным соединением формулыявляется -2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота, ее 1-4-алкильный, аралкильный или арильный сложные эфиры или ее фармацевтически приемлемые соли. Хотя все соединения формулыпо настоящему изобретению, как считают, пригодны для синтеза соединений формулы , некоторые соединения являются предпочтительными. Предпочтительно, чтобы 2 а представлял бы 24 и 3 представлял бы водород. Более предпочтительно, чтобы 4 представлял водород или 1-С 6-алкильную группу, например этильную группу. Соединения формулыпо настоящему изобретению обычно синтезируют за счет циклопропанирования 2-циклоалкен-1-она, соединения формулы , гдеимеет указанные для формулызначения. Соединения формулы , в которых 3 представляет водород и 2 представляет 24, получают в соответствии со схемой . 4921 1 Обычно соединение формулыподвергают взаимодействию с (защищенный карбокси)метилдиметилсульфонийбромидом с получением бициклического производного формулы , в котором 4 представляет карбоксизащитную группу. Это соединение превращают в аминокислоту по реакцииилис последующим гидролизом и этерифицируют с получением соединений формулыв виде смеси изомеров. Эту изомерную смесь разделяют с получением соединений формулыи формулы . Эти соединения затем гидролизуют с получением соединений формулы , где 2 представляет С 24,1 и 4 представляет водород. Более конкретно, 2-циклоалкен-1-он подвергают взаимодействию с (защищенный карбокси) метилдиметилсульфонийбромидом с получением бициклицеского производного формулы . Такое циклопропанирование обычно проводят в органическом растворителе в присутствии аминового основания. Подходящие для этой реакции растворители включают ацетонитрил, дихлорметан, бензол, толуол и ксилол предпочтительно, ацетонитрил или дихлорметан. Аминовые основания, пригодные для использования в этой реакции, являются ненуклеофильными основаниями, такими как 1,8-диазабицикло 5.4.0 ундец-7-ен, пиридин и коллидин. Предпочтительным аминовым основанием для использования в этой реакции является 1,8-диазабицикло 5.4.0 ундец-7-ен. Предпочтительно, карбоэтоксиметилдиметилсульфонийбромид подвергают взаимодействию с основанием амина, получая этил (диметилсульфуранилиден) ацетат. Полученную смесь обрабатывают 2-циклоалкен-1 оном. Примеры 2-циклоалкен-1-онов включают 2-циклопентен-1-он, 2-циклогексен-1-он, 2 циклогептен-1-он и 2-циклооктен-1-он. Реакцию обычно проводят при температуре от около 25 С до около 50 С, предпочтительно при температуре от около 25 С до около 30 С. Реакция обычно завершается за промежуток времени от около 18 часов до около трех дней. Бициклическое промежуточное соединениепревращают в бициклическую аминокислоту по реакцииили - с последующим гидролизом промежуточных соединений.,, 76 (1964) (см. имеющиеся там ссылки). Предпочтительно, бициклический кетонподвергают взаимодействию с водным раствором цианида натрия и карбонатом аммония с получением гидантоиновых промежуточных соединений. Эту реакцию обычно проводят в спиртовом растворителе, таком как этанол или метанол. Реакцию обычно осуществляют при температуре от около 25 С до температуры кипения с обратным холодильником растворителя, предпочтительно около 50 С. Реакция обычно завершается примерно через 18 часов. Изомерные гидантоины можно выделить и очистить, как это будет описано далее. Смесь изомерных гидантоинов предпочтительно гидролизовать, используя гидроксид натрия, а затем превращать в сложный эфир без выделения или очистки с получением соединения формулыили соединения формулы . Этот гидролиз обычно ведут при температуре кипения с обратным холодильником растворителя в течение от около 15 часов до около 20 часов. Продукты гидролиза, смесь изомерных соединений формулы , в которых 1 представляет водород, предпочтительно превращают в сложные эфиры перед разделением диастереоизомеров и энантиомеров. Если карбоксизащитные группы удаляют в процессе гидролиза, после этого получают сложный диэфир. Раствор карбоновой кислоты или дикарбоновой кислоты в таком спирте, как метанол, этанол, изо-пропанол или н-бутанол,обрабатывают тионилхлоридом и нагревают до кипения с обратным холодильником. Обычно перед добавлением тионилхлорида раствор продукта гидролиза охлаждают до около 0 С. Превращение в сложный эфир обычно завершается примерно за 48 часов. Диастереоизомерные продукты, соединения формулыи , разделяют, используя стандартные методики. Предпочтительными способами разделения являются кристаллизация и/или хроматография. Соединения формулыиможно селективно кристаллизовать за счет образования соли присоединения кислоты, такой как оксалат. Эту соль получают, обрабатывая раствор этилацетата, содержащий смесь соединений формулыи, щавелевой кислоты и этанолом. Можно добавлять дополнительное количество этанола для кристаллизации одного из диастереоизомеров. Этот способ позволяет получить кри 11 4921 1 сталлический материал, обогащенный одним из изомеров, и фильтрат (маточный раствор),обогащенный другим изомером. Эти соединения можно подвергнуть дальнейшей очистке,используя такую хроматографию, как хроматографическая обработка на силикагеле. Соединения формулыигидролизуют, при необходимости, и карбоксизащитные группы удаляют до получения соединений формулы , где 1 и 4 представляют водород. Эти соединения обычно гидролизуют, обрабатывая раствор соединений формулыилив таком органическом растворителе, как тетрагидрофуран, таким водным основанием,как гидроксид натрия. Этот гидролиз обычно ведут при комнатной температуре, и для его завершения обычно необходимо около 48 часов. Карбоксизащитные группы удаляют, используя стандартные способы синтеза. См.. Энантиомеры каждой из пар диастереоизомеровиразделяют, используя стандартные методики разделения. См. , ,, ,(1981). Предпочтительным способом разделения энантиомеров является образование диастереоизомерных солей рацемических модификаций и оптически активных(хиральных) разрешающих агентов , ,,5. Соединения формули , в которых 4 представляет карбоксизащитную группу,можно разделить, используя кислотные хиральные разрешающие агенты. Примеры подходящих кислотных хиральных разделяющих агентов включают -камфорную кислоту,и(-)-дибензоилвинную кислоту, диацетонкетогулоновую кислоту, лазалоцид,и (-)миндальную кислоту,и (-)-яблочную кислоту,и (-)-хинную кислоту,и (-)-винную кислоту,и (-)-ди-п-толуолвинную кислоту, и (-)-ди-р-толуолвинную кислоту. Предпочтительные кислотные разделяющие агенты для разделения соединений формули, в которых 4 а представляет карбоксизащитную группу, являются -ди-п-толуоил-винной кислотой и (-)-ди-п-толуоилвинной кислотой. Соединения формули , в которых 4 представляет водород, можно разделить, используя основные хиральные разрешающие агенты. Примером основных разрешающих агентов является -1-фенилэтиламин. В другом варианте, бициклическое соединение формулыможет быть преобразовано в смесь диастереоизомерных гидантоинов, как это представлено на схеме . 4921 1 Бициклическое промежуточное соединение , полученное как указано ранее, подвергают взаимодействию с раствором цианида калия или цианида натрия и карбоната аммония с получением диастереоизомерных гидантоиновых промежуточных соединений,соединений формулыи . Эту реакцию осуществляют в смеси воды и спирта, такого как метанол или этанол. Реакцию осуществляют при температуре от около 55 С до около 60 С, и реакция обычно завершается за промежуток времени от около 18 часов до около 4 дней. Диастереоизомерные продукты разделяют, используя стандартные методы,такие как кристаллизация и/или хроматография. Предпочтительно, чтобы соединения формулыиразделяли путем кристаллизации. Соединения формулыи , в которых 4 представляет водород, можно разделить, используя основной хиральный разделяющий агент. Примером такого основного хирального разделяющего агента (Р)-1-фенилэтиламин. Гидантоиновое производное, соединение формулыили , преобразуют в соединение формулы , где 1 и 4 представляют водород, путем гидролиза. Гидантоиновую группу и группу сложного эфира гидролизуют, используя водное основание, такое как гидроксид натрия, или водную кислоту, такую как соляная кислота. Этот гидролиз обычно осуществляют при температуре от около 100 С до около 150 С. Полученное соединение формулыочищают путем ионобменной хроматографии. Соединения формулы , где 2 представляет водород,3 представляет С 24, получают, как представлено на схеме 24 2-Циклоалкен-1-он подвергают взаимодействию с карбоксизащищенным (диметилсульфуранилиден)ацетатом с получением изомерных бициклических промежуточных соединенийи . Такое циклопропанирование осуществляют в органическом растворителе при температуре от около 45 С до около 85 С. Подходящие растворители включают бензол, толуол, ксилол и ацетонитрил. Предпочтительно реакцию проводят в бензоле при 50 С. Диастереоизомерные продукты разделяют путем хроматографии на силикагеле. Соединение формулыпреобразовывают в соединение формулыпо способам, описанным выше для преобразования соединений формулы . Соединения формулы , гдепредставляет СН 2, можно также получить, как показано на схеме 13 Соединение формулыподвергают взаимодействию с (защищенный карбокси) метилдиметилсульфонийбромидом с получением соединения формулы , где 4 а представляет карбоксизащитную группу. Реакцию обычно ведут способом, аналогичным способу, описанному здесь для циклопропанирования соединения формулы . Полученное в результате соединение формулыпреобразуют затем в соединение формулыпутем нагревания, например при температуре в интервале от 160 до 500 С, предпочтительно от 180 до 300 С. Нагревание соединения формулывысвобождает циклопентадиен. Этот способ обычно осуществляют в таком инертном газе, как азот, и в присутствии такого инертного органического растворителя, как дихлорбензол. Полученное соединение формулыпреобразуют затем в соединение формулыпутем восстановления, например гидрирования, в присутствии палладия на угле. Такое восстановление обычно осуществляют при температуре в интервале от 0 до 50 С. Подходящие растворители для реакции восстановления включают такие спирты, как этанол, такие сложные эфиры, как этилацетат, такие ароматические углероды, как толуол, и такие амиды, как диметилформамид. Следует учесть, что при использовании в качестве исходных продуктов оптически активных соединений формулыможно получить оптически активные соединения формулы . Предполагается, что соединения формулыявляются новыми соединениями, и они представляют следующий аспект изобретения. Соединения формулы(включая оптически активные формы) можно получить по способу, описанному.,., 1986, 27, 2543., ,1991, 636. Соединения формулы , где 1 и 4 представляют 1-С 10-алкил, С 2-С 10-алкенил, арил или арилалкил, получают из соответствующих соединений, где 1 и 4 представляют водород. Эти соединения обычно получают, используя стандартные методы синтеза. В ти 14 4921 1 пичном примере соединение формулы , где 1 и 4 представляют водород, можно подвергнуть взаимодействию с 1-С 10-алкильным, С 2-С 10-алкенильным, арильным или арилалкильным спиртом в присутствии кислоты с получением соответствующего сложного эфира. Обычно эту реакцию осуществляют в избытке спирта в присутствии каталитического количества концентрированной серной кислоты. Соединения формулы , где 1 и 4 неодинаковы, можно получить из дикислот, 1 и 4 представляют водород, используя обычные методы органического синтеза. Так, например, можно использовать химическую схему, разработанную для селективной функционализации карбоксильных групп глутаминовой и аспарагиновой кислот. В другом варианте можно селективно манипулировать с карбоксильными группами, выбирая такие карбоксизащитные группысоединений формулы , которые оказываются стабильными в условиях гидролиза гидантоиновой группы. Соединения формулыпо настоящему изобретению являются агонистами некоторых метаботропных рецепторов аминокислот возбуждения. Более конкретно, соединения формулыявляются агонистами негативно-сопряженных связанных с цАМФ-метаботропных рецепторов глутамата. Поэтому другой аспект настоящего изобретения относится к способу воздействия на рецепторы аминокислот возбуждения у млекопитающих, который включает введение млекопитающему, нуждающемуся в модуляции нейротрансмиссии аминокислот возбуждения, фармацевтически-эффективного количества соединения формулы . Термин фармацевтически эффективное количество используют для определения такого количества соединения по настоящему изобретению, которое способно воздействовать на рецепторы аминокислот возбуждения. За счет такого воздействия соединение по настоящему изобретению действует как агонист. Если соединение по настоящему изобретению действует как агонист, взаимодействие этого соединения к ЕАА рецептором имитирует реакцию взаимодействия этого рецептора с его природным лигандом (т.е. глутаматом). Конкретная доза вводимого соединения, естественно, должна определяться конкретными обстоятельствами каждого конкретного случая, включая вводимое соединение, способ введения, конкретное состояние, подлежащее лечению, и аналогичные условия. Соединения можно вводить различными способами, включая пероральный, ректальный,трансдермальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный или назальный. В другом варианте соединение можно вводить путем непрерывных вливаний. Обычная дневная доза составляет от около 0,001 мг/кг до около 100 мг/кг активного соединения по настоящему изобретению. Предпочтительно, чтобы дневная доза составляла от около 0,05 мг/кг до около 50 мг/кг, более предпочтительно от около 0,1 мг/кг до около 20 мг/кг. Было показано, что различные физиологические функции подвергаются воздействию избыточной или неправильной стимуляции трансмиссии аминокислот возбуждения. Соединения формулыпо настоящему изобретению, как полагают, обладают способностью лечить различные неврологические расстройства у млекопитающих, связанные с такими состояниями, которые включают острые неврологические расстройства, как церебральную недостаточность после коронарного шунтирования и пересадки органов, церебральную ишемию (например, инфаркт и остановка сердца), травму спинного мозга, травму головы, перинатальную гипоксию, гипогликемические повреждения нейронов. Соединения формулы , как полагают, обладают способностью лечить такие различные неврологические расстройства, как болезнь Альцгеймера, хорею Хантингтона, амиотрофический латеральный склероз, вызванное СПИДом слабоумие, окулярные повреждения и ретинопатию расстройства восприятия и идопатическую или вызванную лекарствами болезнь Паркинсона. Соединения формулыпо настоящему изобретению, как полагают, обладают способностью лечить такие другие неврологические расстройства у млекопитающих, которые 15 4921 1 связаны с глутаматной дисфункцией, включая мышечные спазмы, конвульсии, мигрени,недержание мочи, психозы, лекарственную толерантность, синдром отмены и отказ от приема лекарств (т.е. опиатов, бензодиазепинов, никотина, кокаина или этанола), отказ от курения, беспокойство и родственные состояния (например, приступы паники и связанные со стрессом расстройства), рвота, отек мозга, хронические боли, нарушения сна, синдром Туретта, нарушения внимания и двигательную заторможенность. Соединения по настоящему изобретению являются агонистами связанных с цАМФ метаботропных рецепторов глутамата. Эти соединения негативно сопряжены посредством рецептора с аденилциклазой, ингибируя образование циклического аденозинмоно-фосфата. Поэтому считают, что соединения по настоящему изобретению формулыобладают способностью лечить такие различные психиатрические заболевания, как шизофрению,беспокойство и родственные состояния (например, приступы паники и связанные со стрессом расстройства), депрессию, биполярные расстройства, психозы и синдром навязчивых состояний. Были проведены эксперименты для демонстрации способности соединений формулывоздействовать на рецепторы аминокислот возбуждения. Аффинность соединений по отношению к метаботропным рецепторам глутамата была продемонстрирована путем избирательного вытеснения (1,3)-1-аминоциклопентан-1,3-дикарбоновой кислотой чувствительного 3 глутаматного связывания с клеточными мембранами мозга крыс. Связывание 3 глутама 3 проводят на грубом мембранном препарате переднего мозга крыс как описано., 145, 100-104 (1992),, . , 63, 938-945 (1994). Концентрация соединения формулы , которая ингибирует на 50 связывание (50),или процент замещения 3 Нпри концентрации 10 мкМ или 100 мкМ соединения формулы , представлена в таблице . ТаблицаСвязывание рецепторами соединений формулыа) Соединение 50 /мкМ/) номера соединений соответствуют экспериментальному разделу) тестированное соединение представляет смесь энантиомеров) тестированное соединение представляет чистый энантиомер) тестированное соединение представляет смесь диастереоизомеров Соединения 3, 6, 7 и 8 являются дикарбоновыми кислотами. Вообще, было обнаружено, что производные сложных эфиров (те соединения формулы , в которых один из или оба 1 и 4 не представляют водород) оказываются неактивными в тесте по связыванию с рецепторами. Однако полагают, что эти соединения являются гидролизуемымидо соответствующих кислот, и поэтому могут функционировать как пролекарственные формы. Следует учитывать, что в настоящем изобретении предложены активные дикарбоновые кислоты, а также пролекарственные формы, которые способны вырабатывать активные кислоты. Соединения формулыоказываются эффективными при воздействии на метаботропные рецепторы глутамата, связанные с цАМФ. Характерные соединения исследовали по их способности снижать форсколин-стимулированное образование цАМФ в гиппокампе крыс и в коре мозга крыс по способу, описанному,. . 22, 277-283(1993). Результаты этих экспериментов представлены в таблице . 16 4921 1 ТаблицаИнгибирование форсколин-стимулированного образования цАМФ ЕС 50 /мкМ/ 6 7 Кора мозга крыс 0,0550,017 22,03,4 Гиппокамп крыс 0,0350,015 29,43,04 Способность соединений формулылечить беспокойство или родственные расстройства можно продемонстрировать, используя хорошо известную модель жира, потенциируемого страхом, и модель подъемалабиринт, описанную соответственно у Дэвиса(1987). В модели потенциируемого страхом испуга животных подвергают воздействию такими нейтральными раздражителями, как свет (условный раздражитель), с таким отрицательным раздражителем, как шок (безусловный раздражитель). После привыкания, когда животные существуют с громким акустическим раздражителем, более сильные реакции испуга вырабатываются, если пугающий раздражитель включают после света. Модель подъемлабиринт основана на природном отвращении грызунов к повышенным и открытым пространствам. Клинически доказано, что диазепам и бушпиронгидрохлорид являются анксиолитиками, которые эффективны при уменьшении страха(усиленная реакция испуга), связанного с наличием света в потенциируемой страхом модели испуга, и для уменьшения страха перед открытым пространством в модели подъемлабиринт. Самцов крыс(180-400 г) или самцовмышей (18-35 г) получают от-, , ,и подвергают акклиматизации в течение 3 дней перед тестированием. Животных помещают в среду с температурой 232 С (относительная влажность 30-70 ) и дают корм Раи воду по необходимости. Фотопериод составляет 12 часов света и 12 часов темноты, при наступлении темноты примерно в 18.00 часов. Исследуемые соединения растворяют в дистиллированной воде и нейтрализуют 5 ндо рН 7-8 в момент использования. Диазепам (, . ,МО) суспендируют в очищенной воде, прибавляя по каплям Твин 80. Контрольным животным дают соответствующий носитель. Испуг, потенциируемый страхом -(,, ) используют для периодов кондиционирования и для продуцирования и записи реакций испуга. Используют классическую процедуру кондиционирования для получения потенциирования реакций испуга. А именно, в первые два дня крыс помещают в темные испуговые камеры, в которых установлены шоковые решетки. После 5 минутного периода акклиматизации каждая крыса получает электрошок 1 мА (500 мс), которому предшествует 5 секундное включение света (15 ватт), который остается включенным во время действия шока. Во время каждого из периодов кондиционирования дают 10 раз свет и шок, затем крысам через желудочный зонд вводят раствор исследуемого соединения в воде и периоды тестирования испугом продолжают. Осуществляют блок из 10 актов акустического испугового раздражителя (110 дб, без включения света) в начале периода для того, чтобы свести к минимуму влияние начальной быстрой фазы привыкания к раздражителю. После этого следует 20 чередующихся испытаний одного звука или звука, которому предшествует свет. Исключая блок начальных испытаний, амплитуды испуговой реакции для каждого типа испытаний (один звук против светзвук) были усреднены для каждой из крыс по всем тестовым периодам. Данные представляют разницу между одним звуком и светомзвуком. Полученные результаты представлены в таблице . 17 4921 1 ТаблицаПотенциируемый страхом испуг Исследуемое соединение ЕД 50 (мг/кг перорально) Соединение 6 0,3 Соединение 7 неактивно Диазепам 0,4 исследовано в более высокой дозе, 10 мг/кг перорально. Автоматизированный подъемлабиринт Конструкция подъемлабиринт основана на конструкции для мышей, предложенной Листером ( 1987). Весь лабиринт сделан из прозрачного плексигласа. Лабиринт состоит из двух открытых рукавов (3050,25 см) и двух закрытых рукавов (30515 см). Пол в каждом из рукавов лабиринта сделан рифленым для придания текстуры. Рукава простираются от центральной платформы под углами в 90 друг к другу. Лабиринт поднят на высоту 45 см над полом и освещен красным светом. Отдельные инфракрасные фотоячейки смонтированы вдоль каждого рукава лабиринта для регистрации активности закрытия,открытия или толчка носом. Мышей по отдельности помещают на центральную платформу лабиринта и подсчитывают и регистрируют количество актов закрытых рукавов, открытых рукавов и толчков носом (просовывание только головы в открытый рукав из закрытого рукава лабиринта), что используют как меру проникновения в рукав и времени,потраченного в различных отделах лабиринта, в течение пятиминутного периода опыта. Пероральное введение соединения 6 приводит к значительному усилению активности в открытых рукавах в дозах 1, 3 и 10 мг/кг. Количество толчков носом значительно возрастает при 3 мг/кг. Активность в закрытых рукавах заметно не изменяется ни при одной из доз соединения 6. Способность соединений формулызащищать теплокровных животных от синдрома отмены лекарств или отказа от приема можно продемонстрировать, используя звуковую модель испуга. В этой модели животным вводят дозы лекарства (никотина или диазепама), затем введение доз прекращают. Такое прекращение введения доз лекарств вызывает усиление реакций испуга на звуковые раздражители. Затем животным вводят исследуемые соединения для того, чтобы определить способны ли они ослабить повышенную реакцию испуга. Крыс(200-400 г,, , ) п отдельности помещают в контролируемое окружение на 12-ти часовой цикл свет-темнота и дают свободный доступ к пище и воде. Затем крыс анестезируют изофураном и подкожно имплантируют осмотические насосы( ). Исследуемые соединения растворяют в носителе из очищенной воды и нейтрализуют 5 ндо рН 7-8 при применении. Диазепам (, . , МО) суспендируют в носителе, состоящем из 40-300, 10 ЕтОН, 2 бензилового спирта, 1 Твин 80 и 47 очищенной воды. Никотин (., .) растворяют в физиологическом растворе. Контрольным животным вводят соответствующий носитель. Синдром отмены никотина Насосы заполняют никотином (6 мг/кг / день, подкожно),диазепамом (10 мг/кг/день, подкожно), исследуемым соединением (0, 1, 3, 10 мг/кг, подкожно) или носителем. После 12 дней подкожной имплантации насосов крыс анестезируют изофураном и насосы удаляют. Во время синдрома отмены (после удаления насосов) регистрируют звуковые реакции испуга (пиковую амплитуду, макс) для отдельных крыс используяиспуговые камеры ( , ). Испуговый период состоит из 5-минутного адаптационного периода при уровне фонового шума (звука) 702 дВА,после которого сразу следует 25 представлений звуковых раздражений (1202 дВА звук,50 мсек длительность), создаваемых с 8-ми секундными интервалами. Затем пиковые испуговые амплитуды усредняют для всех 25 представлений раздражений для каждой серии 18 4921 1 и все данные представляют как среднее за серию. Значения для звуковых раздражений оценивают ежедневно в 1, 2, 3, 4 или 5 дни синдрома отмены. Базовая испуговая реакция оценивается перед удалением насоса на 12 день. Звуковая испуговая реакция значительно возрастает в первые три дня после прекращения хронического введения никотина по сравнению со значениями для контрольных крыс, которым вводят воду. Крысы, которым вводили заменяющую дозу никотина 0,03 мг/кг внутрибрюшинно, или более высокую, не демонстрируют такого же повышения испуговой реакции, которая наблюдается у животных без никотинового замещения. Предварительная обработка соединением 6 вызывает дозо-зависимую блокаду вызываемого синдромом отмены повышения испуговой реакции. Заметное ослабление повышения испуга наблюдается при дозе 3 мг/кг перорально, доза соединения 6 при сравнении с никотиновым контролем (ЕД 500/7 мг/кг, внутрибрюшинно). Синдром отмены диазепама Звуковая испуговая реакция значительно возрастает в первые четыре дня после синдрома отмены хронического введения диазепама по сравнению с контрольными крысами, которым вводят носитель. Заменяющие дозы 3 и 10 мг/кг диазепама внутрибрюшинно не блокируют повышенную испуговую реакцию и, в некоторых случаях, происходит дальнейшее повышение реактивности, что указывает на толерантность. Крысы, которым вводят 30 мг/кг диазепама внутрибрюшинно ежедневно за 60 минут до проведения оценки испуговой реакции, не демонстрируют повышения реактивности после отмены диазепама на 1-4 день по сравнению с диазепамовым контролем. Предварительная обработка соединением 6 блокирует ожидаемое повышение испуговых реакций, которые следуют после отмены введения диазепама. Дозы в 0,1 и 0,3 мг/кг перорально соединения 6 значительно ослабляют усиление испуга по сравнению с контрольными реакциями (ЕД 500,1 мг/кг, перорально). Соединения по настоящему изобретению перед введением предпочтительно включают в состав композиций. Поэтому другим аспектом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, содержащие соединение формулыв сочетании с одним или более из фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или эксипиентов. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению получают известными способами, используя хорошо известные и легко доступные ингредиенты. При получении композиции по настоящему изобретению активный ингредиент обычно смешивают с носителем, или разбавляют носителем, или заключают в носитель, и композиции могут быть в виде капсул, облаток, бумажных или других контейнеров. Если носитель служит в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который действует как носитель, эксипиент или среда для активного ингредиента. Композиции могут быть в виде таблеток, пилюль, порошков, облаток, пастилок, эликсиров, суспензий,эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей, мазей, содержащих, например, вплоть до 10 мас. активного ингредиента, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций, кожных пластырей, подкожных имплантатов и стерильных упаковок порошков. Некоторые примеры подходящих носителей, эксипиентов и разбавителей включает лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, смолу, акацию, фосфат кальция,альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, водный сироп, метил-целлюлозу, метил- и пропилгидроксибензоаты, тальк, стеарат магния, стеариновую кислоту и минеральное масло. Композиции могут дополнительно содержать скользящие агенты, смачивающие агенты(поверхностно-активные соединения), эмульгаторы и суспендирующие агенты, консерванты, подслащивающие агенты или отдушки. Композиции по настоящему изобретению могут быть получены таким образом, чтобы обеспечить быстрое, замедленное или длительное выделение активного ингредиента после введения пациенту, за счет использования известных специалистам способов. 19 4921 1 Композиции предпочтительно готовят в виде стандартных дозированных форм, причем каждая форма содержит от около 1 мг до около 500 мг, предпочтительно от около 5 мг до около 200 мг, активного ингредиента. Термин стандартная дозированная форма относится к физически дискретной единице, пригодной в качестве единичной дозы для людей и других млекопитающих, причем каждая единичная доза содержит заранее определенное количество активного материала, рассчитанного таким образом, чтобы вызывать желаемый терапевтический эффект, вместе с подходящим фармацевтическим носителем,разбавителем или эксипиентом. Нижеприводимые примеры композиций приведены лишь с целью иллюстрации и не должны ограничивать объем изобретения никоим образом. Состав 1 Твердые желатиновые капсулы приготавливают, используя следующие ингредиенты Количество (мг/капсулу) 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 250 Высушенный крахмал 200 Стеарат магния 10 Всего 460 мг Вышеуказанные ингредиенты перемешивают и заполняют ими твердые желатиновые капсулы в количестве 460 мг/капсулу. Состав 2 Таблетки получают, используя следующие ингредиенты Количество (мг/таблетку) 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 250 Микрокристаллическая целлюлоза 400 Двуокись кремния (мелкодисперсная) 10 Стеариновая кислота 5 Всего 665 мг Все компоненты смешивают и прессуют в таблетки, каждая весом 665 мг. Состав 3 Получают аэрозольный раствор, содержащий следующие компоненты Мас.2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 0,25 Этанол 29,75 Пропеллант 22 70,00(хлордифторметан) Всего 100,00 Активное соединение смешивают с этанолом и полученную смесь добавляют к части пропелланта 22, охлажденной до -30 С, и переносят в заполняющее устройство. Затем необходимое количество подают в контейнер из нержавеющей стали и разбавляют клапанным устройством. Состав 4 Таблетки, каждая из которых содержит 60 мг активного ингредиента,приготавливают следующим образом 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 60 мг Крахмал 45 мг Микрокристаллическая целлюлоза 35 мг Поливинилпирролидон 4 мг Натрийкарбоксиметилкрахмал 4,5 мг Стеарат магния 0,5 мг Тальк 1 мг Всего 150 мг 20 4921 1 Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито 45 меш и тщательно смешивают. Раствор поливинилпирролидона смешивают с полученным порошком, и все это затем пропускают через сито 14 меш Полученные таким образом гранулы сушат при 50 С и пропускают через сито 18 меш Затем добавляют натрийкарбоксиметилкрахмал, стеарат магния и тальк, пропущенные заранее через сито 60 меш ., к полученным гранулам, которые после перемешивания прессуют на таблетирующей машине с получением таблеток, каждая из которых весит 150 мг. Состав 5 Капсулы, каждая из которых содержит 80 мг активного ингредиента,приготавливают следующим образом 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 80 мг Крахмал 59 мг Микрокристаллическая целлюлоза 59 мг Стеарат магния 2 мг Всего 200 мг Активный ингредиент, целлюлозу, крахмал и стеарат магния смешивают, пропускают через сито 45 и заполняют в твердые желатиновые капсулы по 200 мг/капсулу. Состав 6 Суппозитории, каждый из которых содержит 225 мг активного ингредиента,можно приготовить следующим образом 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 225 мг Насыщенные глицериды жирных кислот 2000 мг Всего 2225 мг Активный ингредиент пропускают через сито 60 меш и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных, используя минимальный необходимый нагрев. Затем полученную смесь вливают в форму для суппозиториев номинальной емкостью 2 г и оставляют остывать. Состав 7 Суспензии, содержащие по 50 мг активного ингредиента на дозу в 5 мг,приготавливают следующим образом 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 50 мг Натрийкарбоксиметилцеллюлоза 50 мг Сироп 1,25 мл Раствор бензойной кислоты 0,10 мл Вкусовой агент Очищенная вода до 5 мл. Препарат пропускают через сито 45 меш и смешивают с натрийкарбоксиметилцеллюлозой и сиропом до получения однородной пасты. Ароматизирующий агент и краситель разбавляют некоторым количеством воды и добавляют при перемешивании к раствору бензойной кислоты. Затем добавляют достаточное количество воды до требуемого объема. Состав 8 Внутривенную композицию можно получить следующим образом 2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота 100 мг Маннит 100 мг 5 н гидроксид натрия 200 мкл Очищенная вода до 5 мл. 21 4921 1 Нижеследующие примеры иллюстрируют далее соединения по настоящему изобретению и способы их получения. Эти примеры не следует рассматривать как каким-то образом ограничивающие объем настоящего изобретения. Все эксперименты проводились при положительном давлении сухого азота или аргона. Все растворители и реагенты являются коммерческими и используются как таковые, если нет других указаний. Сухой тетрагидрофурат (ТГФ) получают путем перегонки под натрием или натрийбензофенонкетилом перед использованием. Спектры ядерного магнитного резонанса получены на спектрофотометре-300 при частоте 300,15 МгГц, на спектрофотометреАМ-500 на частоте 500 МгГц или спектрофотометреАС-200 Р на частоте 200 МгГц. сспектрометрию путем бомбардировки быстрыми атомамиосуществляют на приборе 2. Масс-спектры с полевой десорбцией получили на приборе 70 Е или 731. Оптическое вращение определено на поляриметре -241. Хромографическое разделение на 500(препаративная жидкостная хроматография) обычно осуществляют, используя линейный градиент растворителей, указанных в тексте. За завершением реакции обычно следят с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ). Тонкослойную хроматографию осуществляют, используя пластины .60 254 размером 5 см 10 см и толщиной 0,25 мм. Пятна определяют, используя УФ и химическое детектирование (пластины погружают в раствор аммониймолибдата церия (75 г молибдата аммония и 4 г церийсульфата в 500 мл 10 водной серной кислоты), а затем нагревают на горячей пластине). Флешхроматографию осуществляют по способу , , ,а, . . ., 43,2923 (1978). Элементный анализ углерода, водорода и азота определяют на элементном анализаторе 400 или определяют в университетском аналитическом центре (,, , ). Температуры плавления определяют в открытых стеклянных капиллярах на банес горячим воздухом для определения температуры плавления или на приборедля определения точки плавления и даны без поправок. Числа в скобках после названия соединения относятся к номеру соединения. Получение 1 Карбоэтоксиметилдиметилсульфонийбромид Раствор этилбромацетата (265 г) и диметилсульфида (114 г) в 500 мл ацетона перемешивают при комнатной температуре. Спустя три дня указанное в заголовке соединение выделяют путем фильтрования реакционной смеси. Т. плавления 88-90 С. Пример 1(1,5,6)-Этил-2-оксобицикло 3.1.0 гексан-6-карбоксилат Суспензию карбоэтоксиметилдиметилсульфонийбромида (45,5 г) в 350 мл толуола обрабатывают 1,8-диазабицикло 5.4.0 ундец-7-еном (30,2 г). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре. Через час реакционную смесь обрабатывают 2 циклопентен-1-оном (19,57 г). Еще через 18 часов реакционную смесь добавляют к раствору 1 н соляной кислоты/хлорида натрия. Полученную смесь экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают путем хроматографической обработки на силикагеле, элюируя линейным градиентом 10 этилацетат/гексан до 50 этилацетат/гексан с получением 22,81 г указанного в заголовке соединения. Т.плавления 3638 С. Масс-спектр с полевой десорбцией /168 (М). Элементный анализ для С 9 Н 123 Вычислено С 64,27 Н 7,19 Найдено С 64,54 Н 7,11. 22(1, 2, 5, 6)-диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат (2) Раствор соединения, полученного по примеру 1 (22,81 г), в 200 мл этанола обрабатывают водным раствором цианида калия (9,71 г) и карбоната аммония (21,2 г) в воде(200 мл). Полученную смесь нагревают до около 50 С. После около 18 часов реакционной смеси дают остыть до комнатной температуры и обрабатывают гидроксидом натрия(16,2 г). Полученную смесь нагревают до кипения с обратным холодильником. Примерно через 18 часов реакционной смеси дают остыть до комнатной температуры, затем охлаждают до 0 С. рН холодной смеси доводят до рН 1, добавляя концентрированную соляную кислоту. Эт смесь концентрируют досуха в вакууме. Остаток растворяют в этаноле, охлаждают до 0 С и обрабатывают тионилхлоридом (80,6 г). Полученную смесь кипятят с обратным холодильником. После примерно 48 часов реакционную смесь концентрируют досуха в вакууме. Остаток обрабатывают 1 н гидроксидом, а полученную смесь экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные экстракты сушат над карбонатом калия, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением 24,6 г смеси указанных в заголовке соединений. Пример 3(1,2,5,6)-Диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат (2) Раствор соединений, полученных как указано в примере 2 (20,71 г), в 200 мл этилацетата обрабатывают раствором щавелевой кислоты (15,46 г) в 50 мл этанола. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре. Спустя один час реакционную смесь обрабатывают дополнительным этанолом (50 мл). Спустя 18 часов полученную смесь фильтруют и полученный фильтрат выпаривают досуха в вакууме. Остаток обрабатывают 1 н гидроксидом натрия и полученную смесь экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные эфирные экстракты промывают рассолом, сушат над карбонатом калия, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем, элюируя смесью метиленхлорид 5 гидроксид аммония/метанол (973) с получением 15,41 г указанного в заголовке соединения. Масс-спектр с полевой десорбцией /242 (МН) Элементный анализ для С 12 Н 194 Вычислено С 59,74 Н 7,945,81 Найдено С 59,78 Н 8,135,77. Пример 4(1,2,5,6)-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота (3) Раствор соединения, полученного как указано в примере 3 (3,1 г), в 2 н гидроксиде натрия (25 мл) и тетрагидрофуране (25 мл) перемешивают при комнатной температуре. Спустя около 18 часов тетрагидрофуран удаляют при пониженном давлении и рН полученного раствора доводят до рН 9. Указанное соединение очищают, используя ионообменную хроматографию (- 1-8), элюируя 50 уксусной кислотой/водой с получением 2,12 г. Т.плавления 250 С (разл.). Масс-спектр с полевой десорбцией /186 (МН). Элементный анализ для С 8114 Вычислено С 51,89 Н 5,997,56 Найдено С 51,74 Н 6,157,45. Пример 5 Гидрохлоридная соль (1,2,5,6)-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилата (2) Раствор соединения, полученного как указано в примере 3 (2,41 г), в 75 мл диэтилового эфира перемешивают при комнатной температуре при пропускании над поверхностью 23 4921 1 газообразной хлористоводородной кислоты до тех пор, пока больше не происходит образования соли. После дополнительных пяти минут полученную соль отфильтровывают,промывают холодным диэтиловым эфиром и сушат в вакууме при 60 С в течение около 18 часов с получением 2,75 г указанного в заголовке соединения. Т. плавления 189-191 С. Масс-спектр с полевой десорбцией / 242 (МН) Элементный анализ для С 12 Н 204 Вычислено С 51,89 Н 7,265,04 Найдено С 52,03 Н 7,485,06. Пример 6(-)-Диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат (4) Раствор рацемической смеси соединений, полученных как указано в примере 3 (6,56 г),в 100 мл этилацетата обрабатывают раствором -ди-р-толуоилвинной кислоты (2,0 г) в 100 мл этилацетата. После отстаивания в течение ночи при комнатной температуре кристаллическую твердую часть удаляют фильтрованием и сушат с получением 14,7 г. Дополнительное твердое кристаллическое вещество получают, охлаждая фильтрат до 0 С. Объединенные кристаллические твердые продукты растворяют в горячем этилацетате, содержащем достаточное количество 2-пропанола, чтобы завершить растворение. После охлаждения до 0 С кристаллическую твердую часть выделяют фильтрованием с получением 2,3 г твердого вещества с энантиомерным избытком 95 . Свободное основание получают, распределяя соль между водным бикарбонатом натрия и этилацетатом. Выделяют органическую фазу, сушат над карбонатом калия, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением 0,77 г указанного в заголовке продукта. Масс-спектр с полевой десорбцией /242 (МН) Оптическое вращение-5,15 (с 1, ЕтОН) Элементный анализ для С 12 Н 194 Вычислено С 59,74 Н 7,945,81. Найдено С 59,68 Н 8,135,58. Пример 7-Диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат (5) Маточные растворы из примера 6 объединяют и концентрируют в вакууме. Соль присоединения кислоты превращают в свободное основание, разделяя между водным бикарбонатом натрия и этилацетатом. Органическую фазу разделяют, сушат над карбонатом калия и концентрируют в вакууме с получением 3,7 г масла. Это масло обрабатывают (-)ди-п-толуоилвинной кислотой (7,14 г) в 100 мл этилацетата. После выдерживания при комнатной температуре в течение ночи кристаллы собирают фильтрованием и сушат. Кристаллический твердый продукт растворяют в горячем этилацетате, содержащем достаточное количество 2-пропанола, чтобы осуществилось полное растворение. После охлаждения до 0 С кристаллы выделяют фильтрованием с получением 2,25 г указанного в заголовке соединения с энантиомерным избытком более или равным 95 . Форму свободного основания, указанного в заголовке соединения, получают по существу, как описано ранее с получением 0,74 г. Масс-спектр с полевой десорбцией /242 (МН). Оптическое вращение 7,22 (с 1, ЕтОН). Элементный анализ для С 12 Н 194 Вычислено С 59,74 Н 7,945,81 Найдено С 59,81 Н 7,885,76. Пример 8-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота (6) Раствор соединения, полученного как указано в примере 6 (0,69 г), в тетрагидрофуране (10 мл) обрабатывают 1 н гидроксидом натрия (10 мл) и полученную смесь интенсивно 24 4921 1 перемешивают при комнатной температуре. Спустя несколько дней указанное в заглавии соединение выделяют с помощью анионообменной хроматографии (- 1-8),элюируя 50 уксусной кислотой/водой с получением 0,53 г указанного в заглавии соединения. Масс-спектр с полевой десорбцией /186 (МН) Оптическое вращение 21,32 (с 1, 1 н НС) Элементный анализ для С 81141,25 Н 2 О Вычислено С 46,26 Н 6,556,74 Найдено С 46,68 Н 6,476,49. Пример 9(-)-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота (7) Указанное в заголовке соединение получают п-существу по способу примера 8 из соединения, получение которого описано в примере 7 (0,59 г). После нескольких дней указанное в заголовке соединение выделяют путем анионообменной хроматографии (1-8), элюируя 50 уксусной кислотой/водой с получением 0,45 г указанного в заголовке соединения. Масс-спектр с полевой десорбцией /186 (МН) Оптическое вращение-22,72 (с 1, 1 н НС) Элементный анализ для С 8 Н 114 Вычислено С 47,29 Н 6,456,89 Найдено С 47,50 Н 6,626,31. Пример 10(1,2,5,6)-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота (8) Указанное в заголовке соединение получают из (1,2,5,6)-диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилата, по существу, как описано в примерах 3 и 4. Пример 11-Диэтил-2-аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоксилат, гидрохлорид Ток безводной газообразной НС пропускают при 0 С над поверхностью раствора соединения примера 6 в безводном диэтиловом эфире (375 мл) до тех пор, пока не прекращается образование белого осадка. Полученную суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром(100 мл) и твердую часть отфильтровывают в вакууме. Твердую часть промывают 2 О(250 мл) и сушат в вакууме при 70 С в течение 4 часов, получая указанное в заглавии соединение (2,32 г, 8,4 ммоль), 77 . Т.плавления 138-140 С. Масс-спектр с полевой десорбцией 242 М 1. Элементный анализ для С 12 Н 204 Вычислено С 51,89 Н 7,265,04 Найдено С 51,61 Н 7,324,99.35,52 (с 0,09, Н 2 О). Пример 12 Этиловый эфир -1-(1,2,5,5,6)-1,1,1,2,5,5,6,6-октагидро-6-оксо 2,5-метаноциклопропаинден-1-карбоновой кислоты Взвесь карбоксиметилдиметилсульфонийбромида (8,46 г, 36,9 ммоль) в 27 мл ацетонитрида при комнатной температуре в атмосфере азота обрабатывают 1,8-диазабицикло 5.4.0 ундец-7-еном (5,52 мл, 36,9 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа полученную смесь желтого цвета обрабатывают (3)-3-4,7,7 а-тетрагидро-4,7 метано-1 Н-инден-1-оном (3,60 г, 24,6 ммоль) в твердом виде порциями за 3 минуты. Коричневый реакционный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакцию гасят 5 НС (13 мл), разбавляют насыщенным раствором соли (50 мл) и 25 4921 1 промывают метил-трет-бутиловым эфиром (350 мл). Объединенные органические экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением масла коричневого цвета (5,98 г). Путем хроматографической обработки (100 г флэшсиликагель, 81. затем 21 гексанэтилацетат) неочищенного масла получают 5,0 г (88 ) указанного в заглавии соединения в виде бесцветного масла, которое по данным ЖХВР оказывается отдельным диастереоизомером 25112(,39, ) 0,55 (гексанэтилацетат 21) ИК (СНС 3) 2982 (сл), 2938 (сл), 1720 (с), 1276 (ср), 1185 (ср), 1048 (сл) см-1 1 Н ЯМР (СС 3) 6,18 (дд, 1 Н,5,6, 2,9 Гц), 6,07 (дд, 1 Н,5,6, 2,9 Гц), 4,14 (кв,2 Н,7, Гц), 3,24 (шир. с, 1 Н), 3,13 (шир. с, 1 Н), 2,86 (дд, 1,6,9, 4,1 Гц), 2,64 (дд,1,6,9, 5,1 Гц), 2,21-2,16 (м, 2 Н), 1,88 (т, 1,3,0 Гц), 1,57 и 1,37 (АВ квартет, 2 Н,8,5 Гц), 1,26 (т, 3 Н,7,1 Гц) 13 С ЯМР (3) 213,31, 170,78, 135,59, 134,16, 61,56, 51,47, 51,17, 46,45 (2 углерода), 44,20, 39,76, 32,75, 25,76, 14,56. Элементный анализ для С 14 Н 16 О 3 Вычислено С 72,39 Н 6,94,Найдено С 72,63 Н 7,08. Пример 13 Этиловый эфир -,5,6 бицикло 3.1.0 гекс-3-ен-2-он-6-карбоновой кислоты Раствор продукта по примеру 12 (4,89 г, 21,1 ммоль) в 14 мл сухого диметилсульфоксида нагревают до кипения с обратным холодильником при одновременном перемешивании и продувании азотом (иглы под поверхностью) для удаления высвобождающегося циклопентадиена в течение 24 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют метил-трет.-бутиловым эфиром (100 мл) и промывают водой (150 мл). Водный слой промывают метил-трет.-бутиловым эфиром (125 мл) и объединенные органические экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением твердого вещества светло-желтого цвета. Неочищенный циклопентенон кристаллизуют из смеси гексан-метил-трет-бутиловый эфир с получением 1,91 г (55 ) указанного в заглавии соединения Т.пл. 96-98 С 25251 (с 1,12, МеОН),0,49 (гексанэтилацетат 21) ИК (КВг) 2997 (сл), 1728(с), 1747(с), 1696(с), 1292(ср), 1266(с), 1190(с), 1177(с) см-1 1 Н ЯМР(СС 3)7,61 (дд, 1 Н, 5,6, 2,5 Гц), 5,74 (д, 1,5,6 Гц), 4,15 (кв, 2 Н,7, Гц), 2,96-2,94 (м, 1 Н), 2,62 (шир. т, 1 Н,3,9 Гц), 2,26 (т, 1 Н,2,8 Гц), 1,27 (т,3 Н,7,1 Гц),13 С ЯМР(СС 3) 203,56, 168,28, 159,96, 129,99, 61,70, 46,19, 30,39, 29,28, 14,49 Элементный анализ для С 9 Н 10 О 3 Вычислено С 65,05 Н 6,07,Найдено С 64,78 Н 6,24. Пример 14 Этиловый эфир (-)-1,5,6-Бицикло 3.1.0 гексан-2-он-6-карбоновой кислоты Раствор продукта по примеру 13 (1,73 г, 10,4 ммоль) в 35 мл 95 этанола в атмосфере азота обрабатывают 10/ (87 мг, 5 мас. ). Колбу продувают азотом и реакционную смесь перемешивают, поддерживая атмосферу водорода (баллон под давлением) в течение 5 часов, причем за это время добавляют еще 35 мг (2 мас. ) 10/. Полученную смесь перемешивают в атмосфере водорода еще 50 минут. Колбу продувают азотом и катализатор удаляют путем фильтрования через целит, промывая этилацетатом. Полученный фильтрат и промывки концентрируют в вакууме до твердого вещества желтого цвета 26(1,75 г). Неочищенное твердое вещество кристаллизуют из смеси гексан-метил-трет.бутиловый эфир с получением 1,38 г (79 ) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 6365 С. 25 -60 (с 1,34, МеОН) 0,49 (гексан этилацетат 21) ИК(КВг) 2987 (сл), 1722 (с), 1410 (ср), 1193(с), 1009 (ср), 827 (ср) см-1 1 Н ЯМР (3) 4,16 (кв, 2 Н,7, Гц), 2,52 (кв, 1,4,9 Гц), 2,29-2,22 (м, 2 Н),2,17-2,00 (м, 4 Н), 1,28 (т, 3 Н,7, Гц) 13 С ЯМР (3) 212,07, 170,80, 61,64, 36,17,32,30, 29,59, 26,91, 22,87, 14,56. Элементный анализ для С 912 О 3 Вычислено С 64,27 Н 7,19. Найдено С 64,10 Н 7,31. Пример 15 Этиловый эфир -1,2,5,6,5-2-спиро-5-гидантоинбицикло-3.1.0 гексан 6-карбоновой кислоты Смесь продукта по примеру 14 (1,20 г, 7,13 ммоль), цианида калия (511 мг, 7,85 ммоль) и карбоната аммония (1,37 г, 7,13 ммоль) в 7,1 мл 95 этанола и 2,9 мл воды оставляют при перемешивании при 36 С на 10 часов и при комнатной температуре на 13 часов. Мутно-желтый реакционный раствор охлаждают до 0 С и разбавляют 7,8 мл холодной воды. После перемешивания в течение 1,5 часа собирают твердое белое вещество,промывают холодной водой (25 мл). Твердую часть сушат в вакууме до получения 1,17 г(69 ) указанного в заглавии соединения в виде отдельного диастереоизомера по данным ЖХВР анализа Т.пл. 247-249 С. 25 23 (с 1,05, МеОН) ИК (КВг) 3504 (ср), 3262 (ср) 2983 (сл), 2766 (сл), 1771(ср), 1723 (с), 1415 (ср), 1182 (сл) см-1 1 НЯМР (ДМСО-6),10,58 (с, 1 Н), 7,93 (с, 1), 4,06 (кв, 2 Н,7, Гц), 2,08-2,01 (м,1 Н), 1,94-1,83 (м, 4 Н), 1,79 (дд, 1 Н,13,9, 8,5 Гц), 1,40-1,33 (м, 1), 1,20 (т, 3 Н,7,1 Гц) 13 С ЯМР (ДМСО-6) 178,30, 172,62, 157,01, 69,52, 61,04, 33,86, 30,37, 28,27, 26,49,20,95, 14,93. Элементный анализ для С 111424 Вычислено С 55,4 Н 5,92, 11,76 Найдено С 55,76 Н 5,9511,84. Пример 16(-)-1,2,5,6-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота Раствор продукта по примеру 15 (976 мг, 4,10 ммоль) в 8,2 мл 3 нкипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 24 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь вводят непосредственно в ионообменную колонку (приготовленную из 50 г - 1-8 ацетатной смолы, полученную путем промывания 50 мл 1 н , а затем 50 мл воды, после нанесения реакционной смеси еще 50 мл 1 н ), элюируя смесью 11 воды и уксусной кислоты, собирая фракции по 50 мл. Фракции 2 и 3, которые содержат продукт, объединяют и концентрируют в вакууме с получением 770 мг твердого вещества белого цвета. Этот твердый продукт суспендируют в 4 мл воды и фильтруют, промывают водой (14 мл). Твердый продукт сушат в вакууме при 40 С с получением 534 мг (76 ) указанного в заголовке соединения в виде белого порошка. ИК (КВг) 3235 (шир. с), 2971 (ср), 2016 (шир. сл), 1694 (ср), 1613 (с), 1509 (ср), 1237 С ЯМР (трифторуксусная кислота-) 179,43, 175,63, 69,53, 34,92, 31,75, 31,66,27,63, 23,04. Аналитический образец получают путем кристаллизации из воды Т.пл. 277-280 С (разл.) 25 -23 (с 1,35, 1 н НС). Пример 17 2-Оксобицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота Смесь 60 г этил-2-оксобицикло 3.1.0 гексан-6-карбоксилата и 300 мл 1 н гидроксида натрия перемешивают при температуре 25-30 С. Через 2,5 часа добавляют концентрированную соляную кислоту для установления рН 0,8-1,2. Полученный раствор экстрагируют этилацетатом. Экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют с получением 49,1 г (98 ) неочищенного материала. В результате перекристаллизации из 100 мл этилацетата получают указанное в заголовке соединение. Т.пл. 123,5-128 С./140 (М) Элементный анализ для С 7 Н 83 Вычислено С 60,00 Н 5,75,Найдено С 60,14 Н 5,79. Пример 18 Соль 2-оксобицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновой кислоты с -1-фенилэтиламином Раствор 14 г соединения, полученного по примеру 17, в 140 мл 24 этанола в этилацетате объединяют с -1-фенилэтиламином (1 эквивалент). После перемешивания в течение ночи выпавшую в осадок соль выделяют фильтрованием и сушат с получением 11,87 г (45,4 ) желаемой соли. Превращение этой соли в частично разделенную 2 оксибицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновую кислоту по способу примера 17 и результаты анализа показывают, что соль представляет собой на 68 ее. Энантиомерный избыток определяют путем превращения в метиловый сложный эфир с диазометаном с последующей обработкой с помощью хиральной ЖХВР на аколонке при 40 С, элюируя 10 изопропанолом (90 ) гексаном со скоростью 1 мл/мин и детектируя при 210 нм. Пример 19-2-Оксобицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота Смесь 1,31 г продукта по примеру 18 и 10 мл 1 н соляной кислоты перемешивают в течение 5 минут и экстрагируют этилацетатом. Экстракты сушат над сульфатом натрия,фильтруют и концентрируют до получения 0,61 г указанного в заголовке соединения,Т.пл. 110-115 С. По данным, полученным с помощью хиральной ЖХВР (метод по примеру 18), продукт представляет 68 ее./-141 Оптическое вращение 49,85. Пример 20(-)-2-Спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота Раствор соединения, полученного, как описано в примере 19 (68 ее, 1 экв.), цианида калия (1,25 экв.) и карбоната аммония (2,5 экв.) объединяют и перемешивают в смеси этанол/вода при 25 С в течение 40 часов. Полученную смесь подкисляют 6 н соляной кислотой, концентрируют, разбавляют водой и фильтруют с получением смеси диастереоизомеров 9010 с выходом 79 . Т.пл. 286-290 С. Смесь диастереоизомеров кристаллизуют из смеси изопропанол/вода с получением 48 выхода указанного в заголовке соединения со 100 диастереоизомерной и 100 энантиомерной чистотой (отношение энантиомеров, определенное с помощью хиральной ЖХВР на колонке 4,6150 мм- при элюировании 15 изопропанол) 85 гексаном со скоростью 1 мл/мин при 40 С и регистрировании при 220 нм соотношение диастереоизомеров определяют с помощью ЖХВР на колонке-фенил при 40 С и при элюировании 9010 бу 28 4921 1 фер/ацетонитрил со скоростью 2 мл/мин при регистрировании при 220 нм (буфер 0,1 М двухосновный натрийфосфат моногидрат, установленный при рН 2,1 фосфорной кислотой)./211. Оптическое вращение-25,98 Элементный анализ для С 9102 О 4 Вычислено С 51,43 Н 4,7913,38 Найдено С 51,38 Н 4,8013,26. Пример 21 Этил-2-спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоксилат Смесь 5,05 г этил-2-оксобицикло 3,1.0 гексан-6-карбоксилата, 2,15 г цианида калия,5,77 г карбоната аммония, 30 мл этанола и 12 мл воды перемешивают при 35 С до завершения реакции согласно данным ЖХВР. Через 15 часов реакционную смесь охлаждают до 0 С и к смеси добавляют 33 мл воды. Через 2 часа при 0 С осадок выделяют фильтрованием и сушат с получением 5,23 г (73 ) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 217220 С./238,1 Элементный анализ для С 11 Н 142 О 4 Вычислено С 55,46 Н 5,9211,76 Найдено С 55,75 Н 5,8811,50. Пример 22 2-Спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота Смесь 16,32 г продукта по примеру 21 и 137 мл 2 нперемешивают при 25 С. Спустя 1 час добавляют концентрированную соляную кислоту до установления рН 1,0. Полученный осадок отделяют фильтрованием и сушат с получением 13,70 г (95 ) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 277-279 С./210,1 (М) Элементный анализ для 91024 Рассчитано С 51,43 Н 4,7913,33 Найдено С 51,70 Н 4,9313,43. Пример 23 2-Спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота, соль -1-фенилэтиламина Смесь 1,05 г продукта по примеру 22 и 16,6 мл 1,61 раствора ацетон-вода перемешивают при 25 С, добавляя 1,53 г 1-фенилэтиламина. Полученную смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Кристаллы отфильтровывают,промывают ацетоном и сушат с получением 0,74 г (45 ) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 205-212 С. Оптическое вращение-31,88 (с 1, метанол). Пример 24(-)-2-Спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновая кислота Смесь 0,74 г продукта примера 23 и 10 мл воды перемешивают при 25 С, изменяя при этом рН с 6,81 до 1,0, используя 1 н НС. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа и продукт собирают фильтрованием, сушат с получением 0,35 г (75 ) указанного в заголовке соединения. Т.пл. 310 С (с разложением)./210,Оптическое вращение-24,22 (с 1, метанол) Элементный анализ для 91024 Вычислено С 51,43 Н 4,8013,33,Найдено С 51,67 Н 4,8713,61. 29-2-Аминобицикло 3.1.0 гексан-2,6-дикарбоновая кислота Раствор 184 г (-)-2-спиро-5-гидантоинбицикло 3.1.0 гексан-6-карбоновой кислоты и 1750 мл 3 ннагревают при кипении с обратным холодильником до тех пор, пока по данным ЖХВР реакция не завершается. Спустя 28 часов раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через стеклобумагу до удаления следов нерастворимого материала. рН раствора устанавливают равным 3,0, используя концентрированную НС 1. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре и два часа при 0 С. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 170 мл холодной воды и сушат с получением 152,5 г (86 ) указанного в заголовке соединения./186, . Оптическое вращение 23,18(с 1, 1 н НС). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.