Способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в I-II триместрах

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ УГРОЗЫ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В - ТРИМЕСТРАХ(71) Заявитель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(72) Авторы Исмаил Марианна Николаевна Михалевич Станислава Иосифовна(73) Патентообладатель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(56) Тетраушвили Н.К. и др. Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. - 1999. -3. - С. 37-45... - 2000. - .7.1. - Р. 45-48.94033677 1, 1997.(57) Способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в - триместрах по концентрации интерлейкина-1 в вагинальном содержимом, отличающийся тем, что к вагинальному содержимому в массовом соотношении 14 добавляют 0,9 раствор натрия хлорида, полученную смесь гомогенизируют в шейкере в течение 15-30 мин, центрифугируют в течение 10-15 мин со скоростью 7-8 тысяч оборотов в минуту, отделяют осадок и в полученном растворе с помощью стандартного иммуноферментного анализа определяют концентрацию интерлейкина-1, и при концентрации интерлейкина-1 1000 пг/мл и выше судят о высокой степени угрозы прерывания беременности, от 700 до 1000 пг/мл - о потенциально высокой возможности возникновения угрозы прерывания беременности, а до 700 пг/мл - о низкой степени риска угрозы прерывания беременности. Изобретение относится к медицине, к разделу акушерства и гинекологии, а также лабораторной диагностики. Известен способ прогнозирования прерывания беременности втриместрах путем определения в вагинальном содержимом концентрации интерлейкина(ИЛ)-1, когда к вагинальному содержимому, охлажденному до температуы -4 С, добавляют буфер, ингибиторы протеаз и другие компоненты с последующим центрифугированием. Указанный способ является прототипом по отношению к заявленному 1. Общим признаком для заявленного способа и прототипа является определение концентрации ИЛ-1 в вагинальном содержимом. Однако способ-прототип обладает следующими недостатками 1. Нуждается в добавлении дорогостоящих реагентов, которые могут привести к снижению точности конечного результата. 2. Требует значительных временных затрат (до суток). 9376 1 2007.06.30 Задачей заявленного изобретения является повышение точности за счет более полного выявления маркеров воспалительного процесса и упрощение способа. Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в - триместрах по концентрации интерлейкина-1 в вагинальном содержимом, к которому в массовом соотношении 14 добавляют 0,9 раствор натрия хлорида, полученную смесь гомогенизируют в шейкере в течение 15-30 мин, центрифугируют в течение 15 мин со скоростью 7-8 тысяч оборотов в минуту, отделяют осадок и в полученном растворе с помощью стандартного иммуноферментного анализа определяют концентрацию интерлейкина-1, и при концентрации интерлейкина-1 1000 пг/мл и выше судят о высокой степени угрозы прерывания беременности, от 700 до 1000 пг/мл - о потенциально высокой возможности возникновения угрозы прерывания беременности, а до 700 пг/мл - о низкой степени риска угрозы прерывания беременности. Данный технологический прием позволяет более полно выявлять маркеры воспалительного процесса, так как при гомогенизации в шейкере достигается максимальное измельчение слизистого компонента вагинального содержимого, что обеспечивает максимальный выход ИЛ-1 в раствор 0,9 натрия хлорида. Добавление ингибиторов протеаз,применяемое в прототипе, может увеличить конечную концентрацию ИЛ-1, что приведет к ошибочным результатам. Заявленный способ сохраняет пропорциональный количественный состав компонентов исследуемого биологического субстрата и максимально нивелирует влияние температуры (в прототипе используют низкий температурный режим 4 С, тогда как температура вагинального содержимого около 37 С, в заявленном способе 23-25 С) на компоненты исследуемого биологического субстрата при одновременном ускорении технологического процесса. Пример 1. Пациентка Т., 25 лет, д-з беременность 32 недели. Угрожающие преждевременные роды. Для подтверждения угрозы прерывания беременности в пластиковую стерильную пробирку типа Эппендорфа шпателем или ложечкой Фолькмана берут свободно лежащее вагинальное содержимое. Предварительно пробирку взвешивают на электронных весах. Затем на тех же весах взвешивают пробирку с вагинальным содержимым. Разницу в весе автоматически регистрируют электронные весы. К содержимому пробирки автоматической пипеткой добавляют стерильный 0,9 раствор натрия хлорида в соотношении 14 весовых частей соответственно. Затем пробирку помещают в шейкер на 15-30 мин. После гомогенизации проводят центрифугирование на 7-8 тысячах оборотах в минуту в течение 15 минут. Полученный раствор отделяют от осадка и исследуют на предмет содержания ИЛ-1. Получают результат 1242 пг в 1 мл. Диагноз угрозы преждевременных родов подтверждают, пациентку относят к группе высокого риска угрозы прерывания беременности и назначают соответствующее лечение этого осложнения. Пример 2. Пациентка С., 27 лет, д-з беременность 29 недель. Угрожающие преждевременные роды. Для подтверждения угрозы прерывания беременности в пластиковую стерильную пробирку типа Эппендорфа шпателем или ложечкой Фолькмана берут свободно лежащее вагинальное содержимое. Предварительно пробирку взвешивают на электронных весах. Затем на тех же весах взвешивают пробирку с вагинальным содержимым. Разницу в весе автоматически регистрируют электронные весы. К содержимому пробирки автоматической пипеткой добавляют стерильный 0,9 раствор натрия хлорида в соотношении 14 весовых частей соответственно. Затем пробирку помещают в шейкер на 15-30 мин. После гомогенизации проводят центрифугирование на 7-8 тысячах оборотах в минуту в течение 15 мин. Полученный раствор отделяют от осадка и исследуют на предмет содержания 2 9376 1 2007.06.30 ИЛ-1. Получают результат 400 пг в 1 мл. Диагноз угрозы преждевременных родов не подтверждают, пациентку не относят к группе риска угрозы прерывания беременности и рекомендуют дальнейшее наблюдение и повторное исследование содержания ИЛ-1 через 10-14 дней, если возникает клиническая необходимость. Пример 3. Пациентка Я., 30 лет, д-з беременность 20 недель. Угрожающий выкидыш позднего срока. Для подтверждения угрозы прерывания беременности в пластиковую стерильную пробирку типа Эппендорфа шпателем или ложечкой Фолькмана берут свободно лежащее вагинальное содержимое. Предварительно пробирку взвешивают на электронных весах. Затем на тех же весах взвешивают пробирку с вагинальным содержимым. Разницу в весе автоматически регистрируют электронные весы. К содержимому пробирки автоматической пипеткой добавляют стерильный 0,9 раствор натрия хлорида в соотношении 14 весовых частей соответственно. Затем пробирку помещают в шейкер на 15-30 мин. После гомогенизации проводят центрифугирование на 7-8 тысячах оборотах в минуту в течение 15 мин. Полученный раствор отделяют от осадка и исследуют на предмет содержания ИЛ 1. Получают результат 850 пг в 1 мл. Диагноз угрозы прерывания беременности не подтверждают и не опровергают, пациентку относят к пограничной группе риска угрозы прерывания беременности, проводят лечение угрозы прерывания. Рекомендуется дальнейшее наблюдение и повторное исследование содержания ИЛ-1 через 10-14 дней, если возникает клиническая необходимость. Таким образом, заявленный способ позволяет получить следующие преимущества 1) достигается максимальный выход ИЛ-1 из слизистого компонента в жидкую часть биологического субстрата 2) ускоряется технологический процесс 3) даются количественные прогностические показатели, позволяющие судить о высоте риска угрозы прерывания беременности или об его отсутствии. Источники информации 1..С.,,,К, . а.Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3