Способ определения стадии острого распространенного перитонита

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТАДИИ ОСТРОГО РАСПРОСТРАНЕННОГО ПЕРИТОНИТА(71) Заявитель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(72) Авторы Илюкевич Георгий Владимирович Хулуп Геннадий Яковлевич Канус Иван Иванович Русакович Валентина Адамовна Гаин Юрий Михайлович Гапанович Владимир Николаевич(73) Патентообладатель Государственное учреждение образования Белорусская медицинская академия последипломного образования(56) Гаин Ю.М. и др. Синдром энтеральной недостаточности при перитоните теоретические и практические аспекты,диагностика и лечение. - Молодечно,2001. - С. 99-101, 117-129.4666 С 1, 2002.2170435 С 2, 2001.2107914 С 1, 1998.2164353 С 2, 2001. Гаин Ю.М. и др. Новости хирургии. 1998. - Т. 9. -2. - С. 29-30. Гаин Ю.М. Новости хирургии. 1998. Т. 9. -2. - С. 32.(57) Способ определения стадии острого распространенного перитонита, отличающийся тем, что до оперативного вмешательства в плазме крови по реакции торможения гемагглютинации определяют титр рецепторных белков и при значениях титра выше 16000 и до 18000 диагностируют реактивную стадию, выше 18000 и до 124000 - токсическую стадию и выше 124000 - терминальную стадию острого распространенного перитонита. Изобретение относится к медицине, к разделу гнойной хирургии и лабораторной диагностики. Известен способ определения стадии острого распространенного перитонита путем определения концентрации конечных и промежуточных продуктов белкового метаболизма, так называемых средних молекул 1. Указанный способ является прототипом по отношению к заявляемому. Общим признаком для заявляемого способа и прототипа является возможность определения стадии острого распространенного перитонита путем лабораторного определения в плазме крови содержания так называемых олигопептидов и соотношение их концентрации и стадии патологического процесса. Однако способ прототипа обладает следующими недостатками 1. Ряд эндогенных веществ (аминокислоты, гормоны и т.д.), содержащихся в плазме,имеют близкий к средним молекулам молекулярный вес, в связи с чем могут определяться как последние и давать ложные цифры концентрации средних молекул 7834 1 2006.02.28 2. Рост содержания средних молекул в ряде случаев отстает от развития синдрома эндогенной интоксикации и не позволяет объективно установить стадию заболевания 3. В ряде клинических ситуаций, протекающих с расстройствами микроциркуляции,наблюдается секвестрация средних молекул в интраваскулярном пространстве. При исследовании их в крови определяются концентрации, не соответствующие истинным. Задачей заявляемого способа является повышение точности определения стадии острого распространенного перитонита. Поставленная задача достигается следующим образом до оперативного вмешательства в плазме крови по реакции торможения гемагглютинации определяют титр рецепторных белков и при значениях титра выше 16000 и до 18000 диагностируют реактивную стадию, выше 18000 и до 124000 - токсическую стадию и выше 124000 - терминальную стадию острого распространенного перитонита. Рецепторные белки представляют собой фрагменты клеточных рецепторов, накапливающиеся в плазме при их деструкции под действием микробного фактора. Уровень рецепторных белков определяют по торможению реакции гемагглютинации между антирецепторной сывороткой (сыворотка получена путем иммунизации кролика рецепторными белками человека) и эритроцитами человека 0. С соблюдением правил асептики в стерильный шприц из вены локтевого сгиба набирают 1,0 мл крови, затем переливают в пробирку, где находится 4 мкл 5 раствора ЭДТА и осторожно перемешивают. Кровь центрифугируют 10 мин при 2000 об/мин,затем определяют надосадочную жидкость. Полученную таким образом плазму используют в дальнейшем для определения рецепторных белков. Для определения рецепторных белков в плазме крови образцы плазмы предварительно разводят до 15000 в отдельных пробирках. В каждую лунку 12-луночного планшета,кроме второй, вносят по 0,05 мл физиологического раствора, во вторую - 0,1 мл плазмы в разведении 1500. Исследуемую плазму в объеме 0,05 мл из второй лунки переносят в третью лунку, перемешивают. Затем из третьей лунки плазму в объеме 0,05 мл переносят в четвертую и т.д. до двенадцатой лунки, т.е. приготовлена серия двухкратных разведений исследуемой пробы, начиная с третьей лунки по одиннадцатую включительно. Во все лунки, начиная с третьей, добавляют по 0,05 мл антирецепторной сыворотки в рабочем разведении 1200 или 1300 и по одной капле 1,3 суспензии эритроцитов человека. Тщательно перемешивают и оставляют на 6 часов при 4 С. Титром рецепторных белков считают последнее разведение исследуемой плазмы, которое визуально дает ингибицию тест-системы. Итак первая лунка - контроль вторая лунка - разведение исследуемой плазмы 1500 с третьей по одиннадцатую лунку - разведение исследуемой плазмы с 11000 до 1256000 двенадцатая лунка - контроль тестсистемы. Исследование рецепторных белков в плазме крови здоровых доноров показало,что их титр ниже 16000. При изучении соответствия уровня рецепторных белков и стадии острого распространенного перитонита установлено, что реактивная стадия соответствует титру выше 16000 и до 18000 (12,690,05-12,970,05), токсическая стадия - выше 18000 и до 124000 (12,970,05-14,240,06) и терминальная стадия выше 124000 ( 14,240,06). В таблице представлена динамика содержания рецепторных белков и традиционных маркеров интоксикации - лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) и уровня средних молекул (СМ). Доноры Больные с ОРП (18), сутки заболевания Показатели 7834 1 2006.02.28 Пример выполнения. Больная С., 64 лет поступила в хирургическое отделение ГК БСМП г. Минска с диагнозом Прободная язва 12-перстной кишки. Острый распространенный перитонит. Для определения стадии острого распространенного перитонита из локтевой вены производят забор 1 мл крови для определения уровня рецепторных белков и содержания средних молекул (контроль). Выполняют оперативное вмешательство ушивание прободной язвы 12-перстной кишки, лаваж и дренирование брюшной полости. Диагноз после операции Прободная язва 12-перстной кишки. Острый распространенный перитонит. На основании данных, полученных во время операции, предположительно устанавливают терминальную стадию. Уровень средних молекул - 0,58 г/л (у доноров 0,530,01 г/л), что не соответствует терминальной стадии заболевания. Титр рецепторных белков выше 124000. Устанавливают терминальную стадию заболевания и назначают соответствующее стадии заболевания комплексное интенсивное лечение с использованием активных методов детоксикации. Диагностировать терминальную стадию перитонита по уровню средних молекул, а значит, и предпринять соответствующую терапию не представлялось возможным, поскольку в раннем периоде заболевания метод оказался менее точным, чем заявляемый. Таким образом, по сравнению с прототипом заявляемый способ обладает следующими преимуществами - позволяет объективно, достоверно и в ранние сроки оценить тяжесть состояния больных с острым распространенным перитонитом и определить стадию заболевания. Источники информации 1. Гаин Ю.М., Леонович С.И., Алексеев С.А. Синдром энтеральной недостаточности при перитоните теоретические и практические аспекты, диагностика и лечение. - Молодечно, 2001. - С. 267 (прототип). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3