Среда для созревания ооцитов

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СРЕДА ДЛЯ СОЗРЕВАНИЯ ООЦИТОВ(71) Заявитель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Голубец Леонид Викторович Шпаковская Ольга Анатольевна(73) Патентообладатель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(57) Среда для созревания ооцитов, включающая стандартную питательную среду ТС-199,пируват натрия, фолликулостимулирующий гормон, эстрадиол, антибиотик и компонент сыворотки крови крупного рогатого скота, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит буфер , гидрокарбонат натрия, эстральную сыворотку, в качестве антибиотика включает гентамицин, а в качестве компонента сыворотки крови крупного рогатого скота - бычий сывороточный альбумин при следующем соотношении компонентов,мас. пируват натрия фолликулостимулирующий гормон гентамицин эстрадиол гидрокарбонат натрия эстральная сыворотка буфербычий сывороточный альбумин питательная среда ТС-199(56) Культивирование ооцитов в синтетических питательных средах. Методические рекомендации по культивированию ооцитов и фолликулов коров. - Ленинград, 1989. - С. 13-15.5096822 , 1992.5213979 , 1993. 5699 1 Изобретение относится к животноводству, в частности к биотехнологии воспроизведения крупного рогатого скота и культивированию ооцитов вне организма животного. Известны синтетические среды для культивирования ооцитов вне организма, наиболее распространенной из которых является культуральная стандартная питательная среда ТС 199. Для повышения полноценности ооцитов при их созревании в исходную питательную среду добавляют эстрадиол, лютеинизирующий гормон (ЛГ), фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), инсулин, глютамин, лактат кальция, пируват натрия, антибиотик и сыворотка крови крупного рогатого скота (Культивирование ооцитов в синтетических питательных средах. Методические рекомендации по культивированию ооцитов и фолликулов коров. - Ленинград, 1989. - С. 13-15). Однако наличие указанных дефицитных гормонов делает среду дорогостоящей, а ее использование - малопригодным, поскольку созревание ооцитов вне организма в данной среде происходит слишком интенсивно, что затрудняет контроль за их стадиями развития. Задача изобретения - повышение эффективности использования среды для созревания ооцитов вне организма. Сущность изобретения. Среда для созревания ооцитов, включающая стандартную питательную среду ТС-199, пируват натрия, фолликулостимулирующий гормон, эстрадиол,антибиотик и компонент сыворотки крови крупного рогатого скота, причем она дополнительно содержит буфер , гидрокарбонат натрия, эстральную сыворотку, в качестве антибиотика включает гентамицин, а в качестве компонента сыворотки крови крупного рогатого скота - бычий сывороточный альбумин при следующем соотношении компонентов, мас.пируват натрия 0,20-0,25 фолликулостимулирующий 1,00-10,00 гормон гентамицин 0,05-0,06 эстрадиол 10,0-50,0 гидрокарбонат натрия 2,0-2,5 эстральная сыворотка 4,0-6,0 буфер 2,3-2,5 бычий сывороточный альбумин 9,0-11,0 питательная среда остальное. Опыты показали, что оптимальным соотношением среды оказался набор ингридиентов во 2-м составе, приведенном в табл. 1. Таблица 1 Испытываемые среды, мг/мл Контрольная Компоненты среда 1 2 3 Пируват натрия 0,20 0,22 0,25 ФСГ 1,00 5,0 10,0 Гентамицин 0,05 0,05 0,06 Эстрадиол 10,0 35,0 50,0 Гидрокарбонат натрия 2,0 2,0 2,5 Эстральная сыворотка 4,0 5,0 6,0 Буфер 2,3 2,4 2,5 Бычий сывороточный 9,0 10,0 11,0 альбумин 100 до 100 до 100 до 100 5699 1 Эффективность использования предлагаемой среды изучали в лабораторных условиях(736) по сравнению с существующей питательной средой ТС-199 (380) на жизнеспособных ооцитах крупного рогатого скота черно-пестрой породы. Результаты приведены в табл. 2. Таблица 2 Количество ис- Количество Количество морул Количество блаСреды пользованных дробящихся(-) стоцист (-) ооцитовзародышей Предлагаемая 736 373-50,7 150-20,4 129-17,5 Существующая 380 98-26,0 Таким образом, использование предложенной среды позволяет проводить созревание ооцитов крупного рогатого скота вне организма животного на 17-20,5 эффективнее по сравнению с питательной средой ТС-199, широко применяемой в практической работе специалистами. Упрощается контроль за сменой стадий созревания ооцитов вне организма для оптимального срока их трансплантации коровам-реципиентам. Источники информации 1. Культивирование ооцитов в синтетических питательных средах. Методические рекомендации по культивированию ооцитов и фолликулов коров. - Ленинград, 1989. - С. 1315. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.