Способ дифференциальной диагностики злокачественных и доброкачественных заболеваний щитовидной железы

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ(71) Заявитель Научно-исследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(73) Патентообладатель Научно-исследовательский клинический институт радиационной медицины и эндокринологии Министерства здравоохранения Республики Беларусь(57) Способ дифференциальной диагностики злокачественных и доброкачественных заболеваний щитовидной железы путем пункционной биопсии опухолевого образования, забора материала, промывки пункционной иглы в физиологическом растворе и обработки смыва трипсином, отличающийся тем, что иглу промывают в 0,6 мл физиологического раствора, смыв разделяют на две равные части, одну из которых обрабатывают трипсином, определяют комплексообразующую способность с помощью ПЭГ 6000 по величине оптической плотности в исходном пунктате и в обработанном трипсином с последующим расчетом величины отношения оптической плотности исходного пунктата к обработанному трипсином пунктату и в случаях, когда величина отношения менее 1,0, диагностируют злокачественное заболевание, а при значениях свыше 1,0 - доброкачественное. Изобретение относится к области медицины, к разделам эндокринологии и онкологии. Рак щитовидной железы (ЩЖ) составляет 1-1,5 среди всех злокачественных заболеваний и в последнее время отмечается рост этой патологии. Нередко рак ЩЖ может иметь сходство с доброкачественными узловыми образованиями (узловым зобом, аутоиммунным тиреоидитом или аденомой). Дифференциальная диагностика таких состояний затруднена и основывается на комплексе параметров. Способ послеоперационного морфологического исследования удаленного образования является окончательным методом диагностики рака ЩЖ. Однако для этого этапа необходимо произвести отбор пациентов. С этой целью используют способ сонографического исследования ЩЖ, выявляющего наличие узлового образования в железе и его структурные по данным ультразвукового сканирования особенности. Доступность оборудования и простота способа делает его скриннинговым, но не позволяет отнести к ведущим вследствие схожести сонографических признаков при аденоме, аутоиммунном тиреоидите или узловом зобе. 4092 1 Предложен для диагностики узловых образований ЩЖ способ сканирования с радиоактивными изотопами, в основе которого лежит способность новообразованиями поглощать радиофармпрепараты. Однако этот способ редко бывает полезным из-за того, что только 1/10 узлов - горячие, являющиеся доброкачественными. Большинство же - холодные, среди которых имеются как злокачественные (менее 35 ) и доброкачественные. Кроме того, этот метод требует специального дорогостоящего оборудования, очистительных сооружений и мер радиоизотопной защиты, что позволяет использовать его в специализированных учреждениях. Также предлагают использовать определение концентрации интратиреоидного йода методом рентгенофлюоресценции, которая снижается при раке. Этот метод имеет те же ограничения, что и сканирование ЩЖ радионуклидами. Поэтому предложенный способ, выбранный за аналог, не может быть использован в качестве дооперационного способа диагностики в медицинских учреждениях различного уровня. Известен способ тонкоигольной аспирационной биопсии с последующим цитологическим исследованием для дифференцирования доброкачественных и злокачественных новообразований в ЩЖ. В то же время этот способ имеет ряд ограничений из-за неадекватности забора вследствие присутствия элементов крови и фибротических нарушений (7-10 ), неадекватности забора из-з окружения злокачественных клеток доброкачественными (около 16 ) и малой частотой ложно-негативных результатов (1-6 ). Существенное значение вносит квалификация цитолога и оценка им препарата, что также дает возможность использовать этот метод в ограниченном числе учреждений. В результате до 19 мазков без сомнения могут быть отнесены к злокачественным. Также возможно сочетание доброкачественных и злокачественных заболеваний. Указанный способ служит прототипом по отношению к заявляемому. Задачей настоящего изобретения является упрощение способа дооперационной диагностики заболеваний щитовидной, сопровождающиеся узлообразованием. Предложенный способ заключается в проведении пункционной биопсии опухолевого образования, забора материала, промывки пункционной иглы в физиологическом растворе и обработки смыва трипсином, отличающийся тем, что иглу промывают в 0,6 мл физиологического раствора, смыв разделяют на две равные части, одну и ктрых обрабатывают трипсином (0,125 мкг), определяют комплексообразующую способность с помощью 3,5 ПЭГ 6000 по величине оптической плотности в исходном пунктате и в обработанном трипсином пунктате с последующим расчетом величины отношения оптической плотности исходного пунктата к обработанному трипсином пунктату и в случаях, когда величина отношения менее 1,0, диагностируют злокачественное заболевание, а при значениях свыше 1,0 - доброкачественное. Приводим конкретные примеры использования способа. Для способа необходим только свежий пунктат. 1. Больная Г., история болезни 8829. Диагноз папиллярный рак ЩЖ. Проводят пункционной биопсии узлового образования щитовидной железы, после чего иглу промывают в 0,6 мл физиологического раствора, который разделяют на 2 части по 0,3 мл, в одну из которых добавляют 0,3 мл 1 М трипсина. Из последней пробы (обработанный трипсином пунктат) используется 0,3 мл. Затем к обеим пробам (0,3 мл исходного пунктата и 0,3 мл обработанного трипсином пунктата) приливают 3,5 ПЭГ на боратном буфере (боратный буфер 3,41 г борной кислоты и 4,275 буры растворить в 500 мо воды,подогретой до 50 С хранится в холодильнике), инкубируют их в течение часа при комнатной температуре. Спустя этот период времени измеряют величину оптической плотностиобеих проб на спектрофотометре или ФЭК при длине волны 450 нм. Далее рассчитывают величину отношения оптической плотности исходного смыва пунктата к оптической плотности обработанного трипсином пунктата. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,04. Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0,09. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,04/0,090,57 (1). 2. Больная Е., история болезни 20614. Диагноз папиллярный рак ЩЖ. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,07. Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0,13. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,07/0,130,70 (1). 3. Больная М., история болезни 14155. Диагноз папиллярный рак ЩЖ. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,35. Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0,39. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,35/0,390,89 (1). 4. Больной С., история болезни 14865. Диагноз узловой фолликулярно-коллоидный зоб. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,10. 2 4092 1 Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0.09. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,10/0,091,11 (1). 5. Больная Г., история болезни 13403. Диагноз узловой зоб. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,90. Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0,10. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,90/0,109,00 (1). 6. Больная В., история болезни 14059. Диагноз аутоиммунный тироидит. Оптическая плотность ( исх) в исходной пробе (пунктат) составила 0,80. Оптическая плотность ( трипс) в обработанном трипсином пунктате составила 0,50. Величина отношения ( исх)/ ( трипс)0,80/0,501,60 (1). Как следует из вышеприведенных примеров, у больных с раком щитовидной железы величина предлагаемого соотношения ниже, чем у пациентов с доброкачественными заболеваниями (узловой зоб, аутоиммунный тиреоидит). В последней группе значения отношения превышают 1,0. Эти же различия сохраняются между группами больных со злокачественными (8) и доброкачественными (14) заболеваниями ЩЖ 0,700,12 и 4,551,51 соответственно (Р 0,05). Таким образом, по сравнению с прототипом заявляемый способ имеет преимущества за счет получения результата при минимальном количестве пункционного материала, использование отечественного оборудования, имеющегося в медицинских учреждениях различного уровня, и возможность произведения замеров любым лаборантом. Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.