Дипептиды с мнемотропной активностью и фармацевтическая композиция для профилактики и лечения когнитивных нарушений

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ДИПЕПТИДЫ С МНЕМОТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ КОГНИТИВНЫХ НАРУШЕНИЙ(71) Заявитель Государственное учреждение Научно-производственный центр Институт фармакологии и биохимии Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Романовский Дмитрий Иосифович Кравченко Елена Валериевна Дубовик Борис Валентинович Максимова Лейла Вагиф кызы(73) Патентообладатель Государственное учреждение Научно-производственный центр Институт фармакологии и биохимии Национальной академии наук Беларуси(56) ГУДАШЕВА Т.А. и др. Химико-фармацевтический журнал, 2006. - Т. 40.1. - С.18-22. ОСТРОВСКАЯ Р.У. и др. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1991. - Т. . -5. - С. 498-500.2007/055388 2.1619684 , 1995.2131743 1, 1999.10157 1, 2008.96115174 , 1998.2009/033806 2.939440, 1982.(57) 1. Применение глутаматсодержащего дипептида, выбранного из группы, включающей аспартил-глутамат, глутамил-глутамат и гаммаглутамилцистеин, для профилактики и лечения нарушений памяти и способности к обучению. 2. Фармацевтическая композиция с мнемотропным действием, содержащая глутаматсодержащий дипептид, выбранный из группы, включающей аспартил-глутамат, глутамилглутамат и гаммаглутамилцистеин, в эффективном количестве, и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. 3. Фармацевтическая композиция с мнемотропным действием, содержащая аспартилглутамат и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. 4. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что предназначена для приема внутрь и выполнена в форме таблетки, капсулы, гранул или порошка. 5. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что предназначена для парентерального введения и выполнена в форме раствора, лиофилизированного порошка,стерильной сухой рассыпки или назальных капель. 6. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме таблетки и имеет следующий состав, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 15608 1 2012.04.30 7. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме твердой желатиновой капсулы, содержащей гранулы следующего состава, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 8. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме мягкой желатиновой капсулы с содержимым следующего состава, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0 масло растительное 0,01-1,0 лецитин очищенный 0,01-1,0 воск пчелиный 0,01-1,0. 9. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме порошка для приема внутрь и имеет следующий состав, г аспартил-глутамат 0,01-1,0 лактоза 0,01-150,0. 10. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме гранул для приема внутрь и имеет следующий состав, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0 лактоза 0,010-50,0 крахмал 0,010-50,0 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,3. 11. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме раствора для инъекций и имеет следующий состав аспартил-глутамат, г 0,0001-1,0-маннит, г 0,005-50,0 вода для инъекций, мл до 1-1000. 12. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме лиофилизированного порошка для инъекций и имеет следующий состав, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0-маннит 0,005-50,0. 13. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что выполнена в форме назальных капель и имеет следующий состав, г аспартил-глутамат 0,0001-1,0 нипагин 0,005-5,0 вода дистиллированная 1,0-1000,0. 14. Фармацевтическая композиция с мнемотропным действием, содержащая глутамил-глутамат в эффективном количестве и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. 15. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что выполнена в форме таблетки и имеет следующий состав, г глутамил-глутамат 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 16. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что выполнена в форме твердой желатиновой капсулы, содержащей гранулы следующего состава, г глутамил-глутамат 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 2 15608 1 2012.04.30 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 17. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что выполнена в форме раствора для инъекций и имеет следующий состав глутамил-глутамат, г 0,0001-1,0-маннит, г 0,005-50,0 вода для инъекций, мл до 1-1000. 18. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что выполнена в форме лиофилизированного порошка для инъекций и имеет следующий состав, г глутамил-глутамат 0,0001-1,0-маннит 0,005-50,0. 19. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что выполнена в форме назальных капель и имеет следующий состав, г глутамил-глутамат 0,0001-1,0 нипагин 0,005-5,0 вода дистиллированная 1,0-1000,0. 20. Фармацевтическая композиция с мнемотропным действием, содержащая гамма-глутамилцистеин в эффективном количестве и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. 21. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что выполнена в форме таблетки и имеет следующий состав, г гаммаглутамилцистеин 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 22. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что выполнена в форме твердой желатиновой капсулы, содержащей гранулы следующего состава, г гаммаглутамилцистеин 0,0001-1,0 лактоза 0,010-0,500 крахмал 0,010-0,450 поливинилпирролидон 0,004-0,200 магния стеарат 0,0005-0,03. 23. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что выполнена в форме раствора для инъекций и имеет следующий состав гаммаглутамилцистеин, г 0,0001-1,0-маннит, г 0,005-50,0 вода для инъекций, мл до 1-1000. 24. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что выполнена в форме лиофилизированного порошка для инъекций и имеет следующий состав, г гаммаглутамилцистеин 0,0001-1,0-маннит 0,005-50,0. 25. Фармацевтическая композиция по п. 20, отличающаяся тем, что выполнена в форме назальных капель и имеет следующий состав, г гаммаглутамилцистеин 0,0001-1,0 нипагин 0,005-5,0 вода дистиллированная 1,0-1000,0. Изобретение относится к области медицины (фармакологии, психиатрии) и фармацевтической промышленности и может быть использовано для профилактики и лечения нарушений когнитивных функций. 3 15608 1 2012.04.30 Терапевтически эффективное количество обозначает количество, которое способно обеспечить эффективную профилактику и лечение названных нарушений. В последнее десятилетие отмечается резкий рост числа исследований, посвященных изучению нарушений мнестических функций и способности к обучению. Интерес к проблеме фармакологической регуляции высших интегративных функций мозга вызван, с одной стороны, клиническими наблюдениями, подтверждающими рост когнитивных нарушений среди населения, с другой стороны - недостаточно выраженным эффектом известных мнемотропных средств. Спектр заболеваний, сопровождающихся нарушениями памяти и обучаемости, весьма разнообразен и включает возрастные изменения, отставание в развитии у детей, нейродегенеративные заболевания (болезнь Альцгеймера, болезнь Пика, хорея Хантингтона, болезнь Паркинсона, рассеянный склероз), сосудистые заболевания,черепно-мозговые травмы (субдуральная гематома), инфекции центральной нервной системы - ЦНС (энцефалит, сифилис, токсоплазмоз, СПИД, болезнь Крейцфельдта-Якоба),эндокринные и метаболические нарушения (гипотиреоидизм, гипоксия, сердечная, печеночная, почечная недостаточность), действие токсических повреждающих факторов (алкоголь, растворители, тяжелые металлы), дефицит нутриентов (витамина 12, фолиевой кислоты, тиамина). Кроме того, когнитивные дисфункции отмечаются при ряде эмоционально-поведенческих расстройств, включая синдром дефицита внимания и гиперактивности (СДВГ, развивающийся на фоне пониженной тревожности), типичные и атипичные панические расстройства, депрессивные состояния, тревожные расстройства. В настоящее время широкое применение получили мнемотропные средства, которые активизируют интегративные функции мозга, стимулируют обучение, память и умственную деятельность, повышают устойчивость мозга к действию повреждающих факторов. В англоязычной литературе для обозначения ноотропов нередко используется термин- усилитель когнитивных функций. Пирацетам - наиболее известный представитель мнемотропных препаратов, применяется на протяжении нескольких десятилетий. Вместе с тем, клинический эффект проявляется при назначении этого лекарственного средства в сравнительно высоких дозах терапевтическое действие отмечается через 2-3 недели, продолжительность курса лечения до 6 месяцев. При применении пирацетама возможно возникновение ряда побочных эффектов - диспепсия, обострение коронарной недостаточности. Препарат противопоказан при выраженной почечной недостаточности 1. Церебролизин - комплекс пептидов и аминокислот, полученных из головного мозга свиньи. Препарат обладает достоверным клиническим эффектом, может использоваться для лечения когнитивных нарушений 2. Вместе с тем, не удалось установить активное начало церебролизина. Действие церебролизина при когнитивных нарушениях является неспецифическим. Актовегин, представляющий собой высокоочищенный депротеинизированный гемодиализат, который получают методом ультрафильтрации из крови телят, предложен для лечения когнитивных нарушений 2. Для актовегина, как и для церебролизина, не установлено активное начало, эффект в отношении высших психических функций является неспецифическим. Известно лекарственное средство семакс, которое, как и заявляемые олигопептиды, обладает мнемотропными свойствами, улучшает когнитивные функции 1. Активное вещество семакса является синтетическим аналогом фрагмента адренокортикотропного гормона(АКТГ) (4-10) с аминокислотной последовательностью метионин-глутамин-гистидинфенилаланин-пролил-глицин-пролин . Семакс структурно родственен заявляемым глутаматсодержащим олигопептидам (содержит остаток глутаминовой кислоты), предложен в качестве стимулятора памяти пролонгированного действия 3, являющегося основой мнемотропного средства и фармацевтической композиции мнемотропного действия 1. Как для прототипа, так и для заявляемых олигопептидов охарактеризованы количественные и качественные характеристики активного начала лекарст 4 15608 1 2012.04.30 венного средства. Вместе с тем, семакс противопоказан к применению при расстройствах,сопровождаемых тревогой 4. В то же время разрабатываемые соединения улучшают память и не оказывают какого-либо отрицательного влияния на общее состояние у мышей 1/, для которых характерен патологически высокий уровень тревожности. Семакс противопоказан при наличии судорог в анамнезе пациента 4. Для заявляемых дипептидов показано мнемотропное действие и отсутствие побочных эффектов в экспериментах на мышах /, предрасположенных к развитию судорожного синдрома. Описан глутаматсодержащий дипептид (тимоген), обладающий иммуномодулирующей и антидиабетической активностью 5. Вместе с тем, этот препарат не обладает мнемотропным действием 2. Известно лекарственное средство деанола ацеглумат (-ацетилглутамат 2-(диметиламино) этанола, прототип), по химической структуре близкое к естественным метаболитам головного мозга (ГАМК - гамма-аминомасляная кислота, глутаминовая кислота). Препарат оказывает мнемотропное, церебропротективное, антиастеническое, антидепрессивное,гепатопротекторное действие 6. Вместе с тем, указанное лекарственное средство может вызывать увеличение спонтанной агрессивности и эмоциональной реактивности, способствовать возникновению анксиогеноподобного состояния. Деанола ацеглумат эффективен лишь при применении высоких доз (у человека разовая доза составляет 1-2 г, суточная до 10 г включительно 6, в эксперименте на животных - 150 мг/кг/сут) 7. Разрабатываемые глутаматсодержащие (аспартил-глутамат, глутамил-глутамат, гаммаглутамил-цистеин) дипептиды обладают более высокой активностью и оказывают в эксперименте на грызунах мнемотропное действие в дозах 0,1-0,5-5 мг/кг/сут (примеры 1-4). Курс лечения прототипом достаточно продолжительный - 1,5-2,5 мес, 2-3 раза в год. Заявляемые дипептиды обладают статистически достоверной мнемотропной активностью уже при 1-7-кратном введении (примеры 1-4). Деанола ацеглумат имеет значительное число противопоказаний - гиперчувствительность, инфекционные заболевания ЦНС, лихорадочные состояния, заболевания крови, психотические состояния, почечная и/или печеночная недостаточность, эпилепсия, беременность, период лактации. Выявлен достаточно широкий спектр побочных эффектов, которыми характеризуется прототип - аллергические реакции, головные боли, нарушения сна, запоры, снижение массы тела, зуд, в некоторых случаях - депрессии (у лиц пожилого возраста). Заявляемые дипептиды эффективны в эксперименте на мышах /, склонных к судорожным реакциям, используемых для моделирования тревожно-депрессивного состояния (пример 4), не оказывают заметного побочного действия. В период лечения деанола ацеглуматом необходимо соблюдать осторожность при вождении автотранспорта и занятии другими потенциально опасными видами деятельности, требующими повышенной концентрации внимания и быстроты психомоторных реакций. В противоположность прототипу, заявляемые дипептиды в терапевтических дозах не вызывают сонливости, не изменяют уровня поведенческой активности. К числу эффективных и безопасных средств коррекции когнитивных нарушений относятся нейропептиды, их фрагменты и синтетические аналоги, которые играют важную роль в регуляции синаптической передачи, нейродегенеративных процессов. Класс дипептидов характеризуется специфической биодоступностью для мозга, низкой токсичностью и эффективностью при приеме внутрь вследствие сравнительно высокой устойчивости к действию ферментов щеточной каймы энтероцитов кишечника. Настоящее изобретение направлено на выявление у глутаматсодержащего дипептида,выбранного из группы, включающей аспартил-глутамат, глутамил-глутамат, гамма-глутамилцистеин, новых, ранее неизвестных мнемотропных свойств и на разработку фармацевтической композиции, включающей названный глутаматсодержащий дипептид и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. Такая композиция может использоваться в качестве лекарственного средства для повышения умственных способностей,профилактики и лечения нарушений памяти и способности к обучению, интеллектуальных расстройств, в т.ч. когнитивных нарушений при деменции легкой и умеренной степе 5 15608 1 2012.04.30 ни выраженности. Фармацевтическая композиция содержит в качестве основного действующего вещества глутаматсодержащий дипептид, выбранный из группы, включающей аспартил-глутамат, глутамил-глутамат, гаммаглутамилцистеин, в диапазоне доз 0,0001-1,0 г. Предпочтительно, чтобы обе аминокислоты дипептида являлись -формами. Предпочтительно введение дипептидов в виде пероральной, инъекционной, назальной лекарственной формы, поскольку при этих способах введения обеспечивается наибольшая точность дозирования активного вещества. К числу пероральных лекарственных форм,содержащих глутаматсодержащий дипептид, могут относиться таблетки, капсулы (в т.ч. мягкие и твердые), порошки и гранулы, жидкость для орального применения. Инъекционной лекарственной формой, содержащей глутаматсодержащий дипептид, может быть раствор для инъекций (инфузий), или лиофилизированный порошок для приготовления раствора для инъекций (инфузий), или стерильная сухая рассыпка для приготовления раствора для инъекций (инфузий). Среди других возможных лекарственных форм на основе глутаматсодержащего дипептида предпочтительны назальные капли, обеспечивающие малоинвазивное вмешательство. При этом фармацевтическая композиция может содержать одно или несколько разрешенных к медицинскому применению вспомогательных веществ (целевых добавок), способных улучшить фармацевтические характеристики заявляемой композиции. К числу предпочтительных вспомогательных веществ относятся лактоза (наиболее предпочтительно - в виде моногидрата), крахмал (в т.ч. модицифированный), аэросил, целлюлоза микрокристаллическая, растительные масла, лецитин, поливинилпирролидон, магния стеарат, воск пчелиный, -маннит в количествах, требующихся для приготовления фармацевтической композиции - такие количества хорошо известны специалистам в области фармации и составляют для таблеток, твердых и мягких желатиновых капсул, гранул для приема внутрь - 0,0005-1,0 г, для порошка для приема внутрь 0,01-150,0 г, для инъекционных лекарственных форм - 0,005-50,0 г. Количество воды дистиллированной для приготовления фармацевтической композиции в виде глазных капель и инъекционных растворов составляет 1,0-1000,0 г. Аспартил-глутамат (формула , -, молекулярная формула - 91427) имеет молекулярную массу 262,22, регистрационный номер соединения по- 6157-06-8. Глутамил-глутамат (формула , -, молекулярная формула - 101627) имеет молекулярную массу 276,24, регистрационный номер соединения по- 3929-61-1.. Гаммаглутамилцистеин (формула , , молекулярная формула 81425) имеет молекулярную массу 250,27, регистрационный номер соединения по- 636-58-8 15608 1 2012.04.30 Влияние глутаматсодержащих дипептидов на функции центральной нервной системы,в т.ч. на память, способность к обучению, интеллектуальные способности, в научной литературе до настоящего времени не описано, указанные соединения используются в качестве химических реактивов. Пример 1. Габитуация (угашение, привыкание) - одна из элементарных форм неассоциативного обучения, которая состоит не в приобретении новых поведенческих реакций, а в их подавлении, поэтому ее называют также негативным обучением. Одним из проявлений привыкания в эксперименте является ослабление (угашение) во времени исследовательско-ориентировочной реакции (ИОР) на новую обстановку вследствие ее оценки как биологически незначимой. Постепенное снижение показателей горизонтальной двигательной активности (ГДА) животных относительно исходных значений при помещении в экспериментальный бокс свидетельствует о запоминании окружающей обстановки и, как следствие, о развитии привыкания. Влияние тестируемых образцов на угашение ИОР животных изучали с использованием камер актометра(Италия). Опыты проводили в утренние и дневные часы при неярком освещении боксов. Процесс габитуации описывали с помощью уравнений линейной регрессии для построения прямойиспользовали натуральные логарифмы значений ГДА, полученных за каждую минуту наблюдения (ГДА). При этом коэффициентхарактеризовал условный, теоретически рассчитанный исходный уровень локомоторной активности (чем выше , тем выше начальная ГДА), а коэффициентотражал выраженность привыкания(положительные значениясоответствовали дисгабитуации, отрицательные - габитуации чем ниже значения , тем более выражено неассоциативное обучение). Статистическую значимость различий коэффициентов уравнений линейной регрессии оценивали с применением однофакторногос - анализом по Даннету. Сравнивали значенияи , полученные только для прямых с уровнем статистической значимости 0,05. Изучали эффективность дипептида аспартил-глутамат (здесь и далее использована субстанция производства фирмы -, США, 1916) при внутрибрюшинном(в/б) введении в отношении процессов памяти и обучения в условиях групповой актометрии у аутбредных мышей , характеризующихся ненарушенным поведением. В эксперименте использовали 260 особейв возрасте 2-3 мес. Животным контрольной группы инъецировали растворитель, мышам 3-х других экспериментальных групп - дипептид - в дозах 0,1, 0,5 и 5,0 мг/кг. Образцы вводили в/б за 30 мин до высадки в камеры актометра. Мышей помещали в экспериментальные боксы группами по 10 особей в каждой. Анализировали влияние - на процессы ультракраткосрочного (10 мин) и краткосрочного (30 мин) привыкания. Как в контроле, так и на фоне введения дипептида, динамика изменения показателей ГДА при 10- и 30-минутной актометрии носила характер статистически значимых прямых(0,05, критерий Стьюдента) - табл. 1. Назначение мышам дипептида - в дозах 0,1-5,0 мг/кг как при 10-минутном, так и при 30-минутном наблюдении не приводило к существенным изменениям значений коэффициента а уравнений соответствующих прямых (0,05, однофакторный ),что указывает на отсутствие прямого стимулирующего эффекта, либо существенных изменений тревожно-фобического статуса (фризинг-реакция или замирание) экспериментальных животных. Процесс неассоциативного обучения (ультракраткосрочного и краткосрочного привыкания) у аутбредных мышейпри высадке в камеры актометра достаточно хорошо выражен, что проявляется отрицательными значениями коэффициентав соответствующих уравнениях регрессионного анализа. 7 15608 1 2012.04.30 При 10-минутном наблюдении статистически значимое улучшение ультракраткосрочной памяти габитуации отмечалось в группе мышей, получавших инъекцию заявляемого соединения в дозе 5,0 мг/кг (0,05) - табл. 1. В условиях 30-минутной сессии актометрии применение мышам - в дозах 0,1 и 0,5 мг/кг сопровождалось отчетливым усилением угашения ГДА. Увеличение дозы вводимого соединения до 5,0 мг/кг приводило к еще более выраженному достоверному(0,05) улучшению неассоциативного обучения - таблица 1. Полученные результаты свидетельствуют о значимых мнемотропных эффектах заявляемого дипептида. При этом - улучшает способность к обучению в дозах, в 30 и более раз низких, чем у деанола ацеглумата. Заявляемый дипептид, в отличие от прототипа 7, не повышает уровень тревожности и не оказывает психостимулирующего действия. Пример 2. Изучали эффективность дипептидов аспартил-глутамат и гаммаглутамилцистеин(здесь и далее использована субстанция производства фирмы -, США, 0903) при инъекционном введении на модели неассоциативного обучения в условиях неизбегаемого стресса в тесте подвешивания за хвост (, ). В качестве базисного критерия использовали продолжительность активных попыток избавления(борьба, с) - избавл Тестирование проводили на протяжении 2-х последовательных дней. При повторном подвешивании за хвост животное использует опыт, приобретенный при первом тестировании. В этой ситуации привыкание - адаптивная энергосберегающая реакция - проявляется снижением борьбы и увеличением продолжительности иммобилизации. Статистически значимое снижение избавл. (увеличение интервала иммобилизации животного) за 1-ю мин экспозиции от 1-й ко 2-й сессии подвешивания за хвост расценивали как маркер привыкания к стрессирующей обстановке эксперимента. В исследованиях использовано 80 аутбредных мышей-самцовв возрасте 2-3 мес. Формировали 4 экспериментальные группы особям группы(контроль) назначали растворитель, мыши группы(препарат сравнения) получали глутаматсодержащий олигопептид семакс, обладающий мнемотропным действием. Животным группиприменяли дипептиды - (0,1 мг/кг) и (0,5 мг/кг) соответственно. Все растворы вводили в/б в объеме 10 мл/кг массы тела трижды, в том числе 2 последние инъекции - за 30 мин до каждой сессии тестирования животных. У аутбредных мышейв контроле в 1-ю мин наблюдения при повторной регистрации не было отмечено существенного снижения избавл. и увеличения продолжительности иммобилизации (0,05, критерий Уилкоксона). Это указывает на недостаточно выраженную обученность особей названной группы в(табл. 2). Применение семакса мышам группыне сопровождалось статистически значимыми изменениями избавл. (0,05, критерий Уилкоксона), что указывает на неэффективность препарата сравнения в отношении привыкания в . Введение мышам - в дозе 0,1 мг/кг (группа ), а также в дозе 0,5 мг/кг (группа ) при повторном подвешивании за хвост сопровождалось статистически значимым снижением показателя избавл. в 1-ю мин относительно соответствующего значения при первом тестировании (0,05, критерий Уилкоксона). Полученные данные показывают, что у аутбредных мышейдипептиды - (0,1 мг/кг) и (0,5 мг/кг) оказывают достоверное облегчающее влияние на процессы привыкания в . Заявляемые соединения характеризуются более высокой (в 300-1500 раз) активностью,чем деанола ацеглумат 7, при их введении не обнаруживаются описанные для прототипа побочные эффекты. Пример 3. Изучали эффективность - при инъекционном введении годовалым инбредным крысам-самцам , характеризующимся генетически обусловленной сниженной способностью к ассоциативному обучению. 8 15608 1 2012.04.30 Крыспомещали в камеры актометраоднократно поодиночке. Показатели ГДА регистрировали в 1-ю, 2-ю и 3-ю минуты наблюдения. Нарушения неассоциативного обучения у животных оценивали как отсутствие статистически значимого снижения уровня ГДА в каждую последующую минуту пребывания в актометре по отношению к 1-й минуте (ультракраткосрочная память габитуации). В эксперимент включали 16 особейв возрасте 12 мес. Формировали 2 группы особям контрольной группы (10) применяли растворитель крысам основной группы(6) - - в дозе 1,0 мг/кг. Все образцы вводили 6-кратно в/б последнее введение осуществляли за 30 мин до начала регистрации ГДА. На фиг. 1 представлены данные анализа влияния - на процесс ультракраткосрочной габитуации у инбредных крыс . При помещении животных контрольной группы в камеры актометра статистически значимых изменений уровня ГДА от 1-й к 3-й мин тестирования отмечено не было, что указывает на сниженную способность у животных названной линии к неассоциативному обучению. У крыс основной группы введение - в дозе 1,0 мг/кг сопровождалось статистически значимым снижением показателей локомоции в 3-ю мин наблюдения (0,05, критерий Фридмана с - анализом по Ньюмену-Кейлсу) в сравнении с исходным значением (1-я мин), что указывает на нормализацию неассоциативного обучения на фоне применения заявляемого дипептида. Таким образом, у крыс линии , характеризующихся генетически обусловленными нарушениями способности к обучению, дипептид - в дозе 1,0 мг/кг оказывает выраженное облегчающее влияние на процессы ультракраткосрочной габитуации. Как и в примере 1, - характеризуется более высокой (в 150 раз) активностью в сравнении с прототипом 7. В отличие от прототипа 7, введение заявляемого дипептида не вызывает негативных изменений психоэмоционального и тревожно-фобического статуса животных. Пример 4. Изучали эффективность глутамил-глутамата (здесь и далее использована субстанция производства фирмы -, США, 3640) при инъекционном применении в условиях моделирования когнитивных расстройств у инбредных мышей /, связанных с нарушениями тревожно-фобического статуса у животных названной линии. Особи/ характеризуются патологически повышенным уровнем базовой тревожности и предложены в качестве экспериментальной модели генерализованных тревожных расстройств у человека. Кроме того, мыши / в определенной степени склонны к судорожным реакциям. Оценивали угашение ГДА у мышей линии / в условиях однократной 5-минутной высадки в камеры актометрапоодиночке. В эксперименте использовано 38 особей в возрасте 2-3 мес. Мышам контрольной группы применяли растворитель, основной группы - дипептид - в дозе 0,5 мг/кг. Исследуемые растворы вводили в/б за 30 мин до высадки животных в камеры актометра. На фиг. 2 показано влияние соединения - на процессы ультракраткосрочной габитуации ГДА у инбредных мышей /. Как в контроле, так и на фоне введения дипептида, динамика изменения показателей ГДА при 5-минутной актометрии носила характер статистически значимых прямых (0,05, критерий Стьюдента). Известно, что у патологически тревожных мышей линии / в условиях острого стресса новизны развивается пассивно-оборонительная фризинг-реакция. Статистически значимое возрастание коэффициента , отражающего начальный уровень ГДА, у особей основной группы в сравнении с контролем может объясняться снижением уровня тревожности на фоне введения дипептида -. О нарушениях ультракраткосрочной памяти габитуации у инбредных / контрольной группы свидетельствовали низкие значения угла наклона прямой, описывающей привыкание у животных названной линии. 9 15608 1 2012.04.30 У мышей, получавших - в дозе 0,5 мг/кг, значение коэффициентастатистически значимо снижалось относительно контроля (0,05, однофакторный ). Это указывает на достоверный корректорный эффект заявляемого дипептида в отношении нарушений процессов ультракраткосрочной памяти, вызванных патологически повышенной тревожностью. Таким образом, по данным эксперимента, глутамил-глутамат обладает мнемотропной активностью. Заявляемый дипептид предотвращает достоверное ухудшение процессов неассоциативного обучения у мышей линии /, характеризующихся генетически обусловленным патологическим повышением уровня базовой тревожности и склонностью к судорожным реакциям. Применение прототипа в подобной ситуации нежелательно, поскольку его назначение часто сопровождается анксиогенным побочным действием, он противопоказан при эпилепсии 6, 7. Указанное действие - проявляет в дозах, многократно (в 300 раз) меньших, чем прототип 7. Пример 5. Пероральная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде таблеток аспартил-глутамат 0,05 г лактоза 0,160 г крахмал кукурузный 0,028 г поливинилпирролидон 0,010 г магния стеарат 0,002 г. Таблетки, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом получения таблеток (например, методом прямого прессования или путем таблетирования с предварительным влажным или сухим гранулированием). Лекарственную форму в виде таблеток предпочтительно получать путем влажного гранулирования, что в последнем случае включает операции просеивание и смешивание порошков, увлажнение порошков раствором связывающих веществ и их перемешивание, гранулирование влажной массы, сушка влажных гранул, обработка сухих гранул, таблетирование, фасовка и упаковка. Берут 0,05 г аспартил-глутамата, 0,160 г лактозы, 0,028 г кукурузного крахмала, просеивают, загружают в чистый сухой смеситель, перемешивают 10-15 минут и увлажняют при перемешивании 10 раствором ранее просеянного поливинилпирролидона (0,010 г). Наиболее предпочтительным является использование лактозы в виде моногидрата. Увлажненную смесь гранулируют, влажные гранулы раскладывают на лотки слоем 1,5-2 см и сушат (предпочтительно в сушилке с псевдоожиженным слоем) при температуре 603 С в течение 10-12 часов, периодически помешивая, до остаточной влажности 3,00,5 . 0,002 г магния стеарата просеивают, добавляют к сухому грануляту и перемешивают в течение 10-15 мин. Прессуют полученную смесь для получения таблеток (например, с использованием пресса для формования таблеток). Каждая таблетка массой 250 мг содержит 50 мг аспартил-глутамата. Пример 6. Пероральная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде твердых желатиновых капсул аспартил-глутамат 0,030 г лактоза 0,155 г крахмал кукурузный 0,010 г поливинилпирролидон 0,004 г магния стеарат 0,001 г. Твердые желатиновые капсулы, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом. Для лекарственной формы в виде твердых желатиновых капсул используют гранулят, получаемый аналогично способу, описанному в примере 5. Полученныйгранулят с содержанием 30 мг аспартил-глутамата капсулируют в твердые желатиновые капсулы. 10 15608 1 2012.04.30 Пример 7. Пероральная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде мягких желатиновых капсул аспартил-глутамат 0,15 г масло растительное 0,1 г лецитин очищенный 0,1 г воск пчелиный 0,1 г. Мягкие желатиновые капсулы, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом, с использованием любого подходящего эксципиента, например, с использованием растительного масла(подсолнечное, соевое, кукурузное и др.), лецитина, триглециридов, глицерина, животных жиров, воска и др. Для получения лекарственной формы в виде мягких желатиновых капсул приготовляют раствор из 100 мг масла растительного, 100 мг лицетина очищенного, с добавлением 100 мг воска пчелиного. 150 мг аспартил-глутамата равномерно распределяют в этом растворе. Полученную суспензию вводят традиционно применяемым способом в мягкие желатиновые капсулы, по 450 мг на 1 капсулу. Пример 8. Пероральная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде гранул для приема внутрь аспартил-глутамат 0,050 г лактоза 0,160 г крахмал кукурузный 0,028 г поливинилпирролидон 0,010 г магния стеарат 0,002 г. Гранулы для приема внутрь, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом. Для лекарственной формы в виде гранул для приема внутрь используют гранулят, получаемый аналогично способу, описанному в примере 5. Полученный гранулят с содержанием 50 мг аспартил-глутамата фасуют в пакеты по 250 мг. Пример 9. Пероральная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде порошка для приема внутрь аспартил-глутамат 0,150 г лактоза 0,250 г. Проводят измельчение исходных материалов, разделяют частицы порошка по размерам, смешивают 0,150 г аспартил-глутамата и 0,250 г лактозы, проводят фасовку в пакеты по 0,4 г. Пример 10. Инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде раствора для инфузий аспартил-глутамат 0,3 г-маннит 5,0 г вода для инъекций до 100 мл. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха, водоподготовку подготовку флаконов или пластиковых пакетов к наполнению. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций 0,3 г аспартил-глутамата и 5,0 г маннита. Полученный раствор фильтруют, проводят розлив во флаконы или пластиковые пакеты,укупоривают или запаивают, стерилизуют. 11 15608 1 2012.04.30 Пример 11. Инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде раствора для инъекций аспартил-глутамат 0,05 г-маннит 0,05 г вода для инъекций до 5 мл. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха, водоподготовку моют и стерилизуют ампулы. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций 0,05 г аспартил-глутамата и 0,05 г маннита. Полученный раствор фильтруют, ампулируют, стерилизуют. Пример 12. Сублимационно высушенная инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата(для приготовления раствора для инъекций) аспартил-глутамат 0,05 г-маннит 0,08 г. Порошок лиофилизированный для приготовления раствора для инъекций готовят следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха. Получают воду для инъекций, проводят мойку и стерилизацию ампул или флаконов. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций (проводя стерильную фильтрацию) 0,05 г аспартил-глутамата и 0,08 г маннита. Наполняют ампулы или флаконы полученным раствором, замораживают, проводят сублимацию. Осуществляют запайку ампул или укупорку флаконов с готовой продукцией. Раствор для инъекций готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (5 мл воды для инъекций). Пример 13. Сублимационно высушенная инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата(для приготовления раствора для инфузий) аспартил-глутамат 0,3 г-маннит 5,0 г. Порошок лиофилизированный для приготовления раствора для инфузий получают следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха. Получают воду для инъекций, проводят мойку и стерилизацию флаконов. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций (проводя стерильную фильтрацию) 0,30 г аспартил-глутамата и 5,0 г маннита. Наполняют флаконы полученным раствором,замораживают, проводят сублимацию. Осуществляют укупорку флаконов с готовой продукцией. Раствор для инфузий готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (100 мл воды для инъекций). Пример 14. Инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде порошка (сухая стерильная рассыпка) для приготовления раствора для инъекций аспартил-глутамат 0,15 г-маннит 0,05 г. Порошок для приготовления раствора для инъекций (стерильная рассыпка) получают следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха подготовку флаконов к наполнению. Подготавливают, взвешивают и помещают во флаконы (с соблюдением требований стерильности) 0,15 г аспартил-глутамата и 0,05 г маннита, укупоривают флаконы с готовой продукцией. Раствор для инъекций готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (5 мл воды для инъекций). Пример 15. Инъекционная лекарственная форма аспартил-глутамата в виде порошка (сухая стерильная рассыпка) для приготовления раствора для инфузий 12-маннит 5,0 г. Порошок для приготовления раствора для инфузий (стерильная рассыпка) получают следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха мойку и стерилизацию флаконов. Подготавливают, взвешивают и помещают во флаконы(с соблюдением требований стерильности) 0,3 г аспартил-глутамата и 5,0 г маннита. Помещают во флаконы аспартил-глутамат и маннит с соблюдением требований стерильности,укупоривают флаконы с готовой продукцией. Раствор для инфузий готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (100 мл воды для инъекций). Пример 16. Лекарственная форма аспартил-глутамата в виде назальных капель аспартил-глутамат 0,5 г нипагин 0,1 г вода дистиллированная до 1 мл. Подготавливают, взвешивают 0,5 г аспартил-глутамата, 0,1 г нипагина. Подготавливают необходимое количество воды дистиллированной. Раствор аспартил-глутамата готовят весообъемным способом с добавлением нипагина, используя в качестве растворителя воду для инъекций. Пример 17. Пероральная лекарственная форма глутамил-глутамата в виде таблеток глутамил-глутамат 0,005 г лактоза 0,155 г крахмал кукурузный 0,028 г поливинилпирролидон 0,010 г магния стеарат 0,002 г. Таблетки, содержащие глутамил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом получения таблеток (например, методом прямого прессования или путем таблетирования с предварительным влажным или сухим гранулированием). Лекарственную форму в виде таблеток предпочтительно получать путем влажного гранулирования, что в последнем случае включает операции просеивание и смешивание порошков, увлажнение порошков раствором связывающих веществ и их перемешивание, гранулирование влажной массы, сушка влажных гранул, обработка сухих гранул, таблетирование, фасовка и упаковка. Берут 0,005 г глутамил-глутамата, 0,155 г лактозы, 0,028 г кукурузного крахмала, просеивают, загружают в чистый сухой смеситель, перемешивают 10-15 минут и увлажняют при перемешивании 10 раствором ранее просеянного поливинилпирролидона (0,010 г). Наиболее предпочтительным является использование лактозы в виде моногидрата. Увлажненную смесь гранулируют, влажные гранулы раскладывают на лотки слоем 1,5-2 см и сушат (предпочтительно в сушилке с псевдоожиженным слоем) при температуре 603 С в течение 10-12 часов, периодически помешивая, до остаточной влажности 3,00,5 . 0,002 г магния стеарата просеивают, добавляют к сухому грануляту и перемешивают в течение 10-15 мин. Прессуют полученную смесь для получения таблеток (например, с использованием пресса для формования таблеток). Каждая таблетка массой 200 мг содержит 5 мг глутамил-глутамата. Пример 18. Пероральная лекарственная форма глутамил-глутамата в виде твердых желатиновых капсул глутамил-глутамат 0,010 г лактоза 0,155 г крахмал кукурузный 0,010 г 13 15608 1 2012.04.30 поливинилпирролидон 0,004 г магния стеарат 0,001 г. Твердые желатиновые капсулы, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом. Для лекарственной формы в виде твердых желатиновых капсул используют гранулят, получаемый аналогично способу, описанному в примере 17. Полученный гранулят с содержанием 10 мг глутамил-глутамата капсулируют в твердые желатиновые капсулы. Пример 19. Инъекционная лекарственная форма глутамил-глутамата в виде раствора для инъекций глутамил-глутамат 0,005 г-маннит 0,05 г вода для инъекций до 5 мл. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха, водоподготовку моют и стерилизуют ампулы. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций 0,005 г глутамил-глутамата и 0,05 г маннита. Полученный раствор фильтруют, ампулируют, стерилизуют. Пример 20. Инъекционная лекарственная форма глутамил-глутамата в виде порошка (сухая стерильная рассыпка) для приготовления раствора для инъекций глутамил-глутамат 0,05 г-маннит 0,05 г. Порошок для приготовления раствора для инъекций (стерильная рассыпка) получают следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха подготовку флаконов к наполнению. Подготавливают, взвешивают и помещают во флаконы (с соблюдением требований стерильности) 0,05 г глутамил-глутамата и 0,05 г маннита, укупоривают флаконы с готовой продукцией. Раствор для инъекций готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (5 мл воды для инъекций). Пример 21. Лекарственная форма глутамил-глутамата в виде назальных капель глутамил-глутамат 1,0 г нипагин 0,1 г вода дистиллированная до 10,0 мл. Подготавливают, взвешивают 1,0 г глутамил-глутамата, 0,1 г нипагина. Подготавливают необходимое количество воды дистиллированной. Раствор глутамил-глутамата готовят весообъемным способом с добавлением нипагина, используя в качестве растворителя воду для инъекций. Пример 22. Пероральная лекарственная форма гаммаглутамилцистеина в виде таблеток гаммаглутамилцистеин 0,015 г лактоза 0,145 г крахмал кукурузный 0,028 г поливинилпирролидон 0,010 г магния стеарат 0,002 г. Таблетки, содержащие гаммаглутамилцистеин, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом получения таблеток (например,методом прямого прессования или путем таблетирования с предварительным влажным или сухим гранулированием). Лекарственную форму в виде таблеток предпочтительно получать путем влажного гранулирования, что в последнем случае включает операции просеивание и смешивание порошков, увлажнение порошков раствором связывающих веществ и их перемешивание, гранулирование влажной массы, сушка влажных гранул,обработка сухих гранул, таблетирование, фасовка и упаковка. 14 15608 1 2012.04.30 Берут 0,015 г гаммаглутамилцистеина, 0,145 г лактозы, 0,028 г кукурузного крахмала, просеивают, загружают в чистый сухой смеситель, перемешивают 10-15 минут и увлажняют при перемешивании 10 раствором ранее просеянного поливинилпирролидона (0,010 г). Наиболее предпочтительным является использование лактозы в виде моногидрата. Увлажненную смесь гранулируют, влажные гранулы раскладывают на лотки слоем 1,5-2 см и сушат (предпочтительно в сушилке с псевдоожиженным слоем) при температуре 603 С в течение 10-12 часов, периодически помешивая, до остаточной влажности 3,00,5 . 0,002 г магния стеарата просеивают, добавляют к сухому грануляту и перемешивают в течение 10-15 мин. Прессуют полученную смесь для получения таблеток(например, с использованием пресса для формования таблеток). Каждая таблетка массой 200 мг содержит 105 мг гаммаглутамилцистеина. Пример 23. Пероральная лекарственная форма гаммаглутамилцистеина в виде твердых желатиновых капсул гаммаглутамилцистеин 0,015 г лактоза 0,150 г крахмал кукурузный 0,010 г поливинилпирролидон 0,004 г магния стеарат 0,001 г. Твердые желатиновые капсулы, содержащие аспартил-глутамат, могут быть получены из композиций данного изобретения любым подходящим способом. Для лекарственной формы в виде твердых желатиновых капсул используют гранулят, получаемый аналогично способу, описанному в примере 22. Полученный гранулят с содержанием 15 мг гамма-глутамилцистеина капсулируют в твердые желатиновые капсулы. Пример 24. Инъекционная лекарственная форма гаммаглутамилцистеина в виде раствора для инъекций гаммаглутамилцистеин 0,005 г-маннит 0,05 г вода для инъекций до 5 мл. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха, водоподготовку моют и стерилизуют ампулы. Подготавливают, взвешивают и растворяют в воде для инъекций 0,005 г гаммаглутамилцистеина и 0,05 г маннита. Полученный раствор фильтруют, ампулируют, стерилизуют. Пример 25. Инъекционная лекарственная форма гаммаглутамилцистеина в виде порошка(сухая стерильная рассыпка) для приготовления раствора для инъекций гаммаглутамилцистеин 0,15 г-маннит 0,05 г. Порошок для приготовления раствора для инъекций (стерильная рассыпка) получают следующим образом. Проводят подготовку помещения, оборудования, очистку воздуха подготовку флаконов к наполнению. Подготавливают, взвешивают и помещают во флаконы (с соблюдением требований стерильности) 0,15 г гаммаглутамилцистеина и 0,05 г маннита, укупоривают флаконы с готовой продукцией. Раствор для инъекций готовят непосредственно перед применением с использованием стерильного растворителя, прилагаемого в упаковке (5 мл воды для инъекций). Пример 26. Лекарственная форма гаммаглутамилцистеина в виде назальных капель гаммаглутамилцистеин 1,0 г нипагин 0,1 г вода дистиллированная до 5,0 мл. 15 15608 1 2012.04.30 Подготавливают, взвешивают 1,0 г гаммаглутамилцистеина, 0,1 г нипагина. Подготавливают необходимое количество воды дистиллированной. Раствор гаммаглутамилцистеина готовят весообъемным способом с добавлением нипагина, используя в качестве растворителя воду для инъекций. Все описанные в примерах 5-26 лекарственные формы должны удовлетворять требованиям Государственной Фармакопеи Республики Беларусь 8. В примерах описаны наиболее применяемые на практике варианты фармацевтических композиций, однако заявляемые глутаматсодержащие дипептиды в дозировках 0,0001-1,0 г могут быть включены и в другие фармацевтические композиции (не ограничиваясь приведенными примерами),описанные в Государственной Фармакопее Республики Беларусь 8. Показаниями для применения фармацевтической композиции с мнемотропным действием, содержащей глутаматсодержащий дипептид, выбранный из группы, включающей аспартил-глутамат, глутамил-глутамат, гаммаглутамилцистеин, являются профилактика и лечение нарушений памяти и способности к обучению, интеллектуальных расстройств. Заявляемая фармацевтическая композиция может назначаться как взрослым, так и детям, подросткам. Лекарственные формы, содержащие заявляемый глутаматсодержащий дипептид, применяют 1-3 раза в сутки в течение 1-3 недель, при необходимости - до 1-6 месяцев. Таблица 1 Анализ влияния аспартил-глутамата (5,0 мг/кг, в/б) на процессы ультракраткосрочной (10 мин) и краткосрочной (30 мин) габитуации у аутбредных мышейпри групповой актометрии Группа / Интер- Коэффициенты уравнений линейной регрессии 2 доза (мг/кг) / вал,число мышей мин Серия 1 Растворитель 10-0,0660,0064 Примечания- коэффициент корреляции уровень статистической значимости 1 прямой, 2 - коэффициентас соответствующим значением в контроле (однофакторныйс - анализом по Даннету)- число высадок группами по 10 особей. Таблица 2 Влияние глутаматсодержащих олигопептидов на процессы габитуации вГруппа / доза (мг/кг) / число животных Растворитель (52) Семакс, 0,01 (9) Продолжительность активных попыток избавления,избавл.,День 1 39,691,59 41,653,30 43,592,96 41,012,94//.-.//5-2005/5-200523. - Дата доступа 17.02.2009. 3. Патент СССР 939440, МПК 07 103/52,61 37/02, 1981. 4. Семакс. // ТКФС Электронный ресурс. Режим доступа //./2.10161268 - Дата доступа 17.02.2009. 5. Золотарев Д.И. Сравнительная эффективность синтетических пептидов при экспериментальном диабете и возможности клинического применения дипептида -глутамил-триптофана в качестве антидиабетического средств Автореф. дис. к.м.н. Работа выполнена в Воронежской государственной мед. академии.Курск, 2001.-24 с. 6. ТКФС // Типовая клинико-фармакологическая статья Электронный ресурс. - Режим доступа ///2.48424841 - Дата доступа 24.12.2009. 7. Воронина Т.А. и др. Фармакол. и токсикол. - 1987. -5. - С. 12-15. 8. Государственная Фармакопея Республики Беларусь (1 издание) / Под ред. Г.В.Годовальников, А.А.Шеряков. - Минск, 2006. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 17