Производные индолил-3-глиоксиловой кислоты с терапевтически полезными свойствами

(71) Заявитель БАКСТЕР ХЕЛСКЕР СА(73) Патентообладатель БАКСТЕР ХЕЛСКЕР СА-(пиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)индол-3-илглиоксиламид,-(пиридин-4-ил)-(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламид,-(4-фторфенил)-1-(3-пиридилметил)индол-3-илглиоксиламид,-(пиридин-4-ил)-1-(4-хлорбензил)индол-3-илглиоксиламид,-(пиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)индол-3-илглиоксиламид,их физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли или, возможно, -оксиды,в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что применяют кислотно-аддитивные соли, в частности соли с неорганическими кислотами, прежде всего такими как соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, соли с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, лимонная кислота, эмбоновая кислота, метансульфоновая кислота, трифторуксусная кислота, янтарная кислота и 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, или, возможно, их -оксиды. 3. Применение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 4. Применение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 5. Применение -(пиридин-4-ил)-1-(4-фторбензил)индол-3-илглиоксиламида или его гидрохлорида в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 6. Применение по п. 5, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 9113 1 2007.04.30 7. Применение по п. 5, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 8. Применение -(пиридин-4-ил)-(1-бензилиндол-3-ил)глиоксиламида в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 9. Применение по п. 8, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 10. Применение по п. 8, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 11. Применение -(4-фторфенил)-1-(3-пиридилметил)индол-3-илглиоксиламида в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 12. Применение по п. 11, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 13. Применение по п. 11, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 14. Применение -(пиридин-4-ил)-1-(4-хлорбензил)индол-3-илглиоксиламида в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 15. Применение по п. 14, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 16. Применение по п. 14, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 17. Применение одного или более соединений, указанных в пп. 1, 2, 5, 8, 11, 14, их физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей или, возможно, -оксидов в качестве средства для лечения опухолей, прежде всего при лекарственной устойчивости и метастазирующей карциноме, и для подавления ангиогенеза. 18. Применение по п. 17, отличающееся тем, что соединение применяют при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. 19. Применение по п. 17, отличающееся тем, что соединение применяют в фиксированной или произвольной комбинации с известными противоопухолевыми средствами при лекарственной устойчивости в качестве замены лекарственного средства, уже не обладающего противоопухолевой активностью. Изобретение относится к дальнейшей разработке заявки на выдачу патента Германии Индол-3-глиоксиламиды (-3-), регистрационный номер 19814838.0. При химиотерапии онкологических заболеваний возникают большие проблемы, вопервых, из-за появления устойчивости к лекарственному средству и, во-вторых, из-за тяжелых побочных действий этого лекарственного средства. 2 9113 1 2007.04.30 Известно, что многие первичные опухоли при достижении определенных размеров рано проявляют склонность к метастазированию по кровеносным и лимфатическим сосудам. Непрерывный процесс инвазии опухоли и образование метастаз являются наиболее частой причиной смерти онкологических больных. Для объяснения этого распространения существуют различные факторы, в том числе усиленный ангиогенез, повышенное разрушение межклеточного матрикса, миграция опухолевых клеток и модуляция клеточной адгезии. Эти факторы могут действовать совместно, но до настоящего времени объяснены лишь частично. Метастазирование опухоли в большинстве случаев сопровождается неблагоприятными прогнозами лечения. Предпосылками метастазирования являются отделение клеток от первичной опухоли, перемещение клеток по направлению к кровеносным сосудам, инвазия в кровеносных сосудах и инвазия клеток из кровеносных сосудов в другие ткани. Для определенных противоопухолевых средств, таких как тамоксоифен, известно подавляющее действие в отношении миграции и инвазии опухолевых клеток (. . . ., (1995), янв. 80(1) 308-313). Описано подавление инвазии опухолевых клеток верапамилом (.,(1991), дек. 4(5-6) 225-233). Описано влияние мелантонина на инвазивные и метастатические свойства клеток рака груди человека -7 ( ., (1998), 1 окт. 58(19) 4383-4390). В опубликованной заявке РСТ 96/23506 сообщается о возможности преодоления лекарственной устойчивости к известным противоопухолевым лекарственным средствам вследствие вызванной этими препаратами амплификации генов множественной лекарственной устойчивости. Кроме того, противоопухолевые средства, такие как винкристин и таксол, проявляют значительную нейротоксичность, что является недостатком при химиотерапии. Целью настоящего изобретения является расширение области применения -замещенных индол-3-глиоксиламидов с одновременным увеличением их терапевтической ценности. В связи с этим должна быть описана возможность использования меньшей дозы, более длительного действия и лучшей переносимости лекарственного средства для класса веществ противоопухолевого действия, описанного в заявке на выдачу патента Германии 19814838 0. Прежде всего, должен быть устранен такой недостаток, как развитие лекарственной устойчивости, который известен для многих противоопухолевых средств. Кроме того, должно быть предотвращено распространение опухолей через метастазы. Поскольку, согласно новейшим исследованиям, опухолевый рост и развитие метастаз очевидно связаны с ангиогенезом, то свойство подавлять ангиогенез представляет дополнительное преимущество, благоприятное при действии лекарственных средств, например,при терапии рака. Вызванное -замещенными индол-3-глиоксиламидами усиление действия должно приводить к более эффективному использованию лекарственных средств в терапии опухолей. Более того, следует сократить время лечения и расширить область применения лекарственного средства для лечения заболеваний, устойчивых к медикаментозному воздействию. Кроме того, следует сократить или исключить возникновение рецидивов и метастаз, а также повысить продолжительность жизни пациентов. Цель изобретения заключается в разработке лекарственных средств, способных активно влиять на процесс метастазирования. Неожиданно было обнаружено, что -замещенные индол-3-глиоксиламиды, описанные в заявке на выдачу патента Германии 19814838.0, соответствующие нижеприведенной общей формуле 1 и предназначенные для лечения опухолевых заболеваний, обладают дополнительными полезными свойствами, которые могут расширить область их применения. Предметом изобретения является применение -замещенных индол-3-глиоксиламидов по пункту 1 общей формулы 1 а для лечения опухолей, прежде всего, в случае возник 3 9113 1 2007.04.30 новения лекарственной устойчивости и метастазирования карцином, а также для подавления образования метастаз и в качестве средства, подавляющего ангиогенез где , 1, 2, 3, 4 иимеют следующие значенияозначает водород, (С 1-С 6)-алкил, причем алкильная группа может содержать в качестве заместителей одно или более фенильных колец, которые, в свою очередь, могут иметь один или более заместителей, таких как галоген, (С 1-С 6)-алкил и (С 3-С 7)-циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с (С 1-С 6)-алканолами, трифторметильные и гидроксильные группы, метоксигруппы, этоксигруппы,бензилоксигруппы, а также бензильные группы, содержащие один или более заместителей в фенильном остатке, таких как (С 1-С 6)-алкил, галоген или трифторметил. Кроме того,означает бензилоксикарбонильную группу (-группа) и трет-бутоксикарбонильный остаток (ВОС-группа), а также ацетильную группу. 1 может означать фенильное кольцо, содержащее один или более заместителей(С 1-С 6)-алкил, (С 1-С 6)-алкоксил, циано, галоген, трифторметил, гидрокси, бензилокси,нитро, амино, (С 1-С 6)-алкиламино, (С 1-С 6)-алкоксикарбониламино и карбоксильную группу, а также сложные эфиры карбоксильной группы с (С 1-С 6)-алканолами, или остаток пиридина формулы 2 5 и его -оксид, причем остаток пиридина по выбору связан с циклическими атомами углерода 2, 3, и 4 и содержит заместители 5 и 6. Остатки 5 и 6 могут быть одинаковыми или различными и означают (С 1-С 6)-алкил, а также (С 3-С 7)-циклоалкил, (С 1-С 6)-алкокси,нитро, амино, гидрокси, галоген и трифторметил, а также этоксикарбониламиногруппу и карбоксиалкилоксигруппу, в которой алкильная группа может содержать 1-4 атома углерода. Кроме того, 1 может означать 2- или 4-пиримидинильный гетероцикл, причем 2-пиримидинильное кольцо может содержать одну или более метильных групп в качестве заместителей, а также означать остаток 2-, 3-, 4- и 8-хинолила, содержащий в качестве заместителей (С 1-С 6)-алкил, галоген, нитро, амино, (С 1-С 6)-алкиламино, причем 1 может означать 2-, 3- и 4-хинолилметильную группу, причем циклические атомы углерода в пиримидилметильном остатке хинолильной группы и хинолилметильные группы могут иметь следующие заместители (С 1-С 6)-алкил, (С 1-С 6)-алкокси, нитро, амино и (С 1-С 6)алкоксикарбониламино. Кроме того, в случае еслипредставляет собой водород, метил или бензил, а также бензилоксикарбонил (-группа), трет-бутоксикарбонил (ВОС-группа) и ацетилгруппу, то 1 означает следующие остатки 9113 1 2007.04.30 Кроме того, в случае еслипредставляет собой водород, -гпп, ВОС-группу и ацетил или бензилгруппу, то 1 может означать кислотный остаток природной или неприродной аминокислоты, например, такой как -глицил, -саркозил, -аланил, -лейцил,-изолейцил, -серил, -фенилаланил, -гистидил, -пролил, -аргинил, -лизил, -аспарагил и -глутамил, причем аминогруппы соответствующих аминокислот могут быть защищенными или незащищенными. В качестве защитной группы аминогрупп используют карбобензоксигруппу (-группа) и трет-бутоксикарбонильную группу (ВОС-группа), а также упомянутую ацетилгруппу. В случае использования в качестве 1 остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот вторая несвязанная карбоксильная группа присутствует в форме свободной карбоксильной группы или в форме сложного эфира с С 1-С 6-алканолами, такого, например, как метиловый, этиловый или трет-бутиловый эфир. Кроме того, 1 может означать аллиламинокарбонил-2-метил-проп-1-ил-группу. Кроме того,и 1 могут быть объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием пиперазинового кольца формулы 3 или гомопиперазинового кольца,если 1 означает аминоалкиленовую группу, в которой 7 означает алкильную группу, фенильное кольцо, которое может содержать один или более заместителей, таких как (С 1-С 6)-алкил, (С 1-С 6)-алкокси, галоген, нитро, амино и(С 1-С 6)-алкиламино. Кроме того, 7 означает бензгидрильную группу и бис-п-фторбензилгидрильную группу. 2 может означать водород и (С 1-С 6)-алкил, причем алкильная группа может содержать один или более заместителей, таких как галоген и фенил, в котором, в свою очередь,могут присутствовать один или более заместителей, таких как галоген, (С 1-С 6)-алкил, (С 3 С 7)-циклоалкил, карбоксильные группы, сложные эфиры карбоксильных групп с 1-6 алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилокси. Кроме того, используемая в качестве 2 (С 1-С 6)-алкильная группа может содержать заместители, такие как 2-хинолилгруппа и остаток 2-, 3- и 4-пиридила, причем обе эти группы могут содержать один или более заместителей, таких как галоген, (С 1-С 4)-алкил или (С 1-С 4)-алкокси. Кроме того, 2 означает ароильный остаток, причем арильный фрагмент представляет собой фенильное кольцо, которое может содержать один или более заместителей галоген,(С 1-С 6)-алкил, (С 3-С 7)-циклоалкил, карбоксильные группы и сложные эфиры карбоксильных групп с (С 1-С 6)-алканолами, трифторметил, гидроксил, метокси, этокси или бензилоксигруппы. 3 и 4 могут быть одинаковыми или различными и означать водород, (С 1-С 6)-алкил,(С 3-С 7)-циклоалкил, (С 1-С 6)-алканоил, (С 1-С 6)-алкокси, галоген и бензилоксигруппу. Кроме того, 3 и 4 могут означать нитро, амино, аминогруппу, содержащую моно- или ди(С 1-С 4)-алкил, (С 1-С 6)-алкоксикарбониламино или (С 1-С 6)-алкоксикарбониламино-(С 1-С 6)алкилгруппуозначает О и . Термины алкил, алканол, алкокси или алкиламиногруппа для остатков , 1, 2, 3,4, 5, 6, 7 означают линейные и разветвленные алкильные группы, причем термин линейные алкильные группы может означать, например, остатки, такие как метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, а термин разветвленные алкильные группы - остатки,такие как, например, изопропил или трет-бутил. Термин циклоалкил означает остатки, такие как, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. Термин галогенозначает фтор, хлор, бром или йод. Термин алкоксигруппа означает остатки, такие как метокси, этокси, пропокси, бутокси, изопропокси, изобутокси или пентокси. Соединения могут быть также введены в виде кислотно-аддитивных солей, например,солей с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, солей с органическими кислотами, например, такими как ук 5 9113 1 2007.04.30 сусная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, лимонная кислота, эмбоновая кислота, метансульфоновая кислота, трифторуксусная кислота, янтарная кислота и 2-гидроксиэтансульфоновая кислота. Соединения формулы 1, а также их соли обладают биологической активностью. Соединения формулы 1 можно вводить в свободной форме или в виде солей с физиологически приемлемыми кислотами. Соединения могут быть введены пероральным, внутрибрюшинным, внутривенным,чрескожным способами или в виде ингаляций. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим,по крайней мере, одно соединение формулы 1 или его соль с физиологически приемлемыми неорганическими или органическими кислотами и соответствующими фармацевтически приемлемыми носителями и/или разбавителями или вспомогательными веществами. Соединения могут быть введены в форме, например, таблеток, драже, капсул, растворов для вливания или ампул, суппозиториев, пластырей, порошков для ингаляции, суспензий, кремов и мазей. В качестве способов синтеза соединений могут быть использованы способы, описанные в патенте 19636150 А 1. Показано, что полезные терапевтические свойства относятся к следующим преимуществам не наблюдается развития лекарственной устойчивости определены параметры, характерные для подавления образования метастаз (миграции) определены параметры, подтверждающие подавление неоваскуляризации (образования новых сосудов, ангиогенез). в различных моделях показано, что -замещенные индол-3-глиоксиламиды по п. 1 общей формулы 1 а, в отличие от большинства противоопухолевых лекарственных средств, характеризуются отсутствием нейротоксичности. Для подтверждения отсутствия развития лекарственной устойчивости используют следующие фармакологические модели или клеточные культуры. 1. Наблюдается устойчивая цитотоксическая активность соединения -24851 (по п. 4) по отношению к клеточным линиям лейкемии мыши 1210/, с множественной лекарственной устойчивостьюв опытахи, фиг. 1, 2 и 3. Соединение -24851 (по п. 4) в отличие от таксола, доксирубицина, винкристина или эпотолона В проявляет постоянную цитотоксическую активность в отношении клеточной сублинии 1210/ лейкоза мыши, с множественной лекарственной устойчивостью. Методика проведения исследований. Клеточные линии лейкоза мыши 1210/ адаптируют к винкристину. Неадаптированные ( 1210) и адаптированные ( 1210/) клетки подвергают действию цитостатиков и измеряют рост клеток, определяемый по метаболической активности (анализ ХТТ). Кривые, построенные по данным анализа ХТТ, рассчитывают с помощью программы нелинейной регрессии. Данные исследований подтверждены такжес использованием устойчивой клеточной линии человека 12/, фиг. 4. 2. Доказательство отсутствия метастазирования получают в виде данных по подавлению миграции клеток МО 4, фиг. 5. Соединение -24851 (по п. 4) характеризуется дозозависимым подавлением миграции клеток МО 4, что позволяет сделать вывод о том, что соединение -24851 обладает антиинвазивным и антиметастатическим действием. Способность к миграции клеток МО 4 можно определить, при этом клетки высевают в центр чашки Петри и через различное количество дней измеряют радиус перемещения или площадь, покрытую клетками, в присутствии и в отсутствии соединения-24851. На фиг. 4 показано, что при повышении концентрации соединения -24851 снижается миграция клеток. 6 9113 1 2007.04.30 Для определения антиинвазивной активности соединения -24851 исследуют инвазию клеток фибросаркомы МО 4 в сердечной ткани цыплят. В этом случае также показано, что инвазия полностью прекращается при концентрации соединения, равной 260 и 1000 нМ, в то время как при более низких концентрациях способность к инвазии клеток МО 4 возрастает. На основании этих данных становится очевидным, что соединение -24851 подавляет как миграцию, так и инвазию опухолевых клеток, и вследствие этого обладает чрезвычайно высоким антиметастазирующим действием. 3. На основании сравнительных экспериментов с использованием соединения -24851 по изобретению (по п. 4) на крысах, у которых оценивают атаксию, мышечную тягу, реакцию на сигнал (фиг. 6), показано, что указанное соединение в отличие от таксола и винкристина не обладает нейротоксическим действием. Кроме того, соединение -24851 в отличие от таксола и винкристина не оказывает отрицательного воздействия на скорость проведения нервного импульса, фиг. 7. Эти данные подтверждают вывод о том, что по причине отсутствия нейротоксичности соединение -24851 обладает значительно меньшим побочным действием по сравнению с другими химиотерапевтическими препаратами. 4. На основании других исследований, согласно фиг. 8 и 9, показано, что соединение-24851 (по п. 4) обладает свойствами ингибитора ангиогенеза. Соединения, подавляющие ангиогенез из-за физиологической взаимосвязи с ростом опухоли, одновременно являются средствами, подавляющими рост опухоли, так как при этом подавляется образование кровеносных сосудов, питающих опухоль. Как показано в модели ангиогенеза на эндотелиальных клетках, соединение-24851 вызывает полное подавление сосудообразования, не связанное с цитотоксическим действием. На фиг. 8 показано, что соединение -24851, при концентрации соединения -24851 0,1 мкмоль/л, почти полностью разрушает межклеточные контакты (см. окрашивание живых клеток). В норме клетки находятся, по крайней мере, в частичном контакте. Миграция клеток заметно снижена, многие клетки принимают округлую форму. Окрашивание погибших клеток в монослое перед индукцией ангиогенеза в присутствии соединения -24851 не свидетельствует о повышении гибели клеток. В первые 22 часа после индукции по сравнению с контролем также не наблюдается заметного увеличения гибели клеток (см. окрашивание погибших клеток на фиг. 9, белые точки). Клетки выделяют из пупочной вены человека (артериальная функция). Для исследования их проводят через третий и четвертый пассаж. Ангиогенез вызывают природным стимулятором. Первичным стимулятором эндотелиальной миграции является белок, экспрессия которого значительно возрастает в васкуализирующейся ткани. Соединение добавляют в культуральную среду непосредственно перед индукцией ангиогенеза. Концентрация соединения -24851, вызывающая подавление ангиогенеза, значительно ниже, чем концентрация, необходимая для проявления цитотоксической активности. В связи с этим можно разделить эти типы активности (цитотоксическое действие и способность подавлять ангиогенез). Следует отметить, без ограничения объема настоящего изобретения, что можно использовать пероральные дозировки приблизительно от 20 до 500 мг в день. При внутривенном введении в виде инъекций или в виде вливаний можно вводить до 250 мг в день или более в зависимости от веса тела и индивидуальной переносимости пациента. В результате отсутствия развития лекарственной устойчивости и подавления метастазирования следует ожидать высокой эффективности и широкой области применения лекарственного средства для лечения пациентов с рефрактерными (не поддающимися лечению) опухолями. Эффект подавления ангиогенеза может быть использован для дополнительного ограничения распространения опухолей. 7 9113 1 2007.04.30 Кроме того, изобретение относится также к использованию -замещенных индол-3 глиоксиламидов по п. 1 общей формулы 1 а для лечения других заболеваний, для которых требуется функциональное подавление ангиогенеза (например при ранозаживлении). Кроме того, предметом изобретения является также фиксированная или произвольная комбинация -замещенных индол-3-глиоксиламидов по п. 1 общей формулы 1 а с известными противоопухолевыми средствами, а также замена протовоопухолевых средств, являющихся неэффективными вследствие развития лекарственной устойчивости, на -замещенные индол-3-глиоксиламиды по п. 1 общей формулы 1 а. 9113 1 2007.04.30 Торможение миграции клеток МО 4 соединением- 24851 Соединение- 24851 оказывает дозозависимое торможение миграции клеток МО 4 и в связи с этим проявляет антиинвазивное и антиметастатическое действие Фиг. 5 Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 12